Développement d'une varicelle-zona immunité à médiation cellulaire spécifique-Virus IFN-γ ELISPOT pour évaluer la suite de cordon ombilical transplantation de sang

Tout d'abord effectuée en 1989, UCBT est de plus en plus utilisé dans le cadre du traitement de différentes maladies du sang néoplasiques et non néoplasiques chez les enfants de ^1. Le VZV est un alphaherpèsvirus humaine cytopathique qui provoque deux maladies différentes, la varicelle (après l'infection primaire) et l'herpès zoster (après réactivation). Après l'infection primaire, le VZV persiste tout au long de la vie de l'hôte à l'abri dans les nerfs sensoriels de ganglions rachidiens. Une des complications infectieuses les plus menaçants suivants UCBT est associé à VZV ^2-4. Dans notre centre clinique, en l'absence de prophylaxie VZV, l'incidence cumulative de la maladie VZV maladie de VZV à 3 ans était de 46% postUCBT ^2. Chez ces patients, l'infection de novo avec ou réactivation du VZV est souvent associée à la diffusion viscérale pour le système nerveux central, les poumons et le foie ^5-7. En prophylaxie résultat, l'acyclovir, le valacyclovir ou le famciclovir est couramment administré à UBBénéficiaires CT ^8,9. Cependant, cette stratégie de traitement ne prend pas en compte le potentiel de protection de lymphocytes T spécifiques de VZV ou la cinétique de reconstitution des réponses des lymphocytes T spécifiques de VZV. Problèmes potentiels liés à l'utilisation croissante de la prophylaxie anti-herpétiques à long terme comprennent a) surtraitement patient; b) le développement de la résistance aux antiviraux ^10,11; et c) la dégradation du VZV reconstitution immunitaire spécifique ^12,13. Parce que la détection des lymphocytes T spécifiques fonctionnels VZV est en corrélation avec la présence d'une protection à long terme de l'infection VZV et l'amélioration de l'issue clinique ^4,14,15, le suivi des réponses immunitaires à médiation cellulaire dirigée contre le VZV pendant la période post-transplantation pourrait aboutir à une utilisation plus rationnelle des médicaments antiviraux traitement en permettant aux médecins de distinguer les patients qui pourraient bénéficier de la prophylaxie VZV de celles dont le système immunitaire est capable de contrôler la réplication du VZV ^4,13.

Le test ELISPOT IFN-γ est largement utilisé pour les réponses immunitaires médiées par des cellules de contrôle dans une variété de systèmes expérimentaux et les conditions cliniques. Taches sont générées suivant le clivage d'un substrat chromogène, la génération d'un précipité visible et stable au niveau du site de la réaction. Chaque spot individu représente ainsi l'empreinte d'une cellule de cytokine production individuelle. IFN-γ ELISpot non seulement mesure la capacité des cellules individuelles ex vivo pour produire de l'IFN-γ en réponse à une stimulation in vitro avec l'antigène apparenté, mais il fournit également une estimation de la fréquence de la réponse des cellules dans une population cellulaire donnée ^16,17. En plus de sa grande sensibilité, l'IFN-γ ELISpot est simple à effectuer, ce qui rend son utilisation possible dans le cadre de protocoles cliniques personnalisés destinés à guider l'initiation ou l'arrêt du traitement antiviral. La procédure décrite ci-dessous décrivantes un test ELISpot qui est spécifiquement conçu pour détecter et mesurer la production d'IFN-γ par les cellules mononucléaires du sang périphérique après stimulation in vitro avec des antigènes dérivés du VZV.