Domuzlar miyokard enfarktüsü ve Fonksiyonel Sonuç Değerlendirmesi

All in vivo deneyler Laboratuar Hayvan Kaynakları Enstitüsü tarafından hazırlanan Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için Kılavuzu'na uygun olarak yapılmıştır. Deneyler Yerel Hayvan Deneyleri Komitesi tarafından onaylandı. 1.. İlaçlar, Anestezi, Venöz Erişim ve Entübasyon İlaç ve Anestezi Premedikasyon Amiodaron 150 mg / Başlat aritmileri önlemek için 10 gün önce ameliyat kg. 28 gün. 29. günde 50 mg / kg doz azaltmak ve çalışmanın sonuna kadar devam kadar prosedürün gün ila 100 mg / kg 'lık bir dozda amiodaron devam edin. Anti-trombosit tedavi, 1 mg / ameliyattan önce günde 3 kg klopidogreli ve 4.5 mg / kg, ameliyattan önce asetilsalisilik asit 1 güne başlayın. Klopidogrel gün ve asetilsalisilik asit 80 mg / günde 1 mg / kg devam edin. Başlangıç ​​ağrı ilaç 1 gün ameliyattan önce Fentanil yama ile, 25~ 70 kg domuz ug / sa. ' Yeterli ağrı ilaç sağlamak için 24 saat post-operatif için Fentanil yamalar kullanımına devam. Ayrıca, varsayılan rahatsızlık belirtileri ağrı ilaç artırmak için (yani davranış, solunum, yürüme, hareketlilik, vb) günlük monitör. 12 saat boyunca hayvan oruç, suya sınırsız erişim sağlamak. Anestezi Gereksiz stres ve rahatsızlığı önlemek için, midazolam 0.4 mg / kg ketamin 10 mg / kg, ve atropin 0.014 mg / kg 'lik bir karışımının kas içi enjeksiyon ile istikrarlı olarak domuz sakinleştirici. 18 G iv kanül ile kulak ven cannulating venöz erişim elde. 5 mg / kg sodiumthiopental intravenöz ile anestezi neden, ve enfeksiyonları önlemek için 1,000 / 100 mg amoksisilin / klavulanik asit verir. Domuz antibiyotik tedavisi gibi cerrahi sonrası gün 1000/100 mg amoksisilin / klavulanik asit alacaksınız. Bir endotrach kullanarak domuz entübeeal tüp (boy ~ 70 kg ağırlığındaki domuzlar için 8.5). Gerekirse 12/min bir frekans ile balon-havalandırma gerçekleştirmek ve faaliyet tiyatroya domuz taşımak. Ameliyathane üzerine varış, hemen FiO2 0.50, 10 ml / kg tidal volüm ile mekanik pozitif basınçlı ventilasyon başlar ve 12/min under frekans Kapnografi devam ediyor. İşlem için 0.5 mg / kg / saat, sufentanil 2.5 mikrogram / kg / saat ve pankuronyum bromid, 0.1 mg / kg / st 'lik bir arada intravenöz infüzyonu devam dengeli bir anestezi başlayın. Tüm operasyon sırasında sürekli EKG, anestezi derinliğini ölçmek için arteriyel kan basıncı, sıcaklığı ve Kapnografi izlemek. Bir sinüs taşikardisi varsa ağrı kesici ve / veya anestezi yeterli Örneğin, kontrol edin. Intravenöz% 6 venofundin 500 ml amiodaron 4.3 mg / kg 'infüze. Bir 5 kalp ritmini izlemek EKG yol açar. Boyun ve arka lim tıraş ve temizb alanı. Foley kateter yerleştirin. 2.. Transtorasik Ekokardiyografi Sağ lateral pozisyonda hayvan yerleştirin. Böyle Dalland domuzlar gibi landrace domuzlarda sadece Parasternal görünümleri (uzun ve kısa eksen) elde edilebilir. Nedeniyle toraks şekline, apikal görünüm elde etme uygun değildir. Orient ve 2D (B-mod) parasternal uzun eksen görünümü edinin. M-modda son diastole ve bitiş sistol de LV boyutlarını belirleyin. Mitral kapak papiller kas ve apeks düzeyde LV kısa eksen görüşlerini elde etmek için onun Parasternal konumunu korurken yankı sonda 90 ° saat yönünde döndürmek. Papiller kas ve apeks kısa eksen görünümü yankı prob yerleştirilmesi gerekebilir mitral kapak kısa eksen görünümü için konumuna göre daha düşük bir veya iki interkostal boşluk. 3. Cerrahi Hazırlık ve Damar Girişi Disiniyot% 2 ile cerrahi alanları fect ve domuz steril olmayan kısımlarını örtecek şekilde steril bir cerrahi örtü kullanın. Boyunda bir medial kesi yapmak. Kas hasarı en aza indirmek ve açık açık karotis arter ve trakea yanında juguler ven yaklaşım linea alba geçmek. Dikkatle karotid arter ve juguler ven izole. Vagus sinir hasarsız olduğundan emin olun. Damar kontrolünü kazanmak için her iki damarlarının etrafında vicryl 2-0 sütür koyun. Seldinger tekniği kullanılarak 8F kılıf ile internal karotis arter cannulating arteriyel erişimini sağlamak. Artere kılıf Fix arter tamamen sütür tarafından tıkalı olmadığından emin olun. Venöz erişim bir 9F kılıf da Seldinger tekniği ile şah damarını cannulating tarafından elde edilebilir. Kılıf emin olun güvence önce damar bağlanır. Seçenek olarak ise, femoral arter, arter erişim için kullanılabilir. Hemen kılıf ile kaplanırlar taktıktan sonra 100 IE / kg heparin uygulayıntrombüs oluşumunu inhibe etmek için hs. Istikrarlı ve sürekli tansiyon ölçümü için, arter üzerinde küçük bir kesi yaparak arka bacaklarda birinde küçük arterlerin birini cannulate. Arter derinin hemen altında bulunan, pulsasyonları deri yoluyla hissedilebilir. Onun çevresindeki dokudan arteri izole. Geminin yaklaşık 2 vicryl 2-0 sütür, 1 proksimal ve 1 distal yerleştirin. Distal tarafı bağlanır ve 18 G iv kanül takın ve baskı bağlayın sıkıca sabitleyin. 4. İnvaziv Basınç Hacim Döngüsü Analizi Juguler ven önceden yerleştirilen kılıf üzeri Swann-Ganz kateter (SG) takın. Proksimal lümen içinde doruğa SG kısmına bir kardiyak çıkış aygıtı bağlayın. SG proksimal lümen içine% 0.9 serum fizyolojik 5 ml enjekte edilir ve kardiyak output ölçümü; Bu üç kez tekrarlayın ve endeksleri ortalama. Önceden kullanarak PV sistem kalibresaptanan kardiyak çıktı. Floroskopi altında sol ventrikül içine karotis arter yoluyla 7F iletkenlik kateter yerleştirin. Hacim ölçümleri için LV büyük segment mevcut seçin ve bir temel apnesi altında tarama gerçekleştirin. Hacim kalibrasyon tamamlandıktan sonra, rekor 10-15 apnesi altında yener. Kaldır SG ve floroskopi altında diyafram seviyesinde alt kaval ven bir balon kateter yerleştirebilir. Apne altında balon şişirme preload azalma gerçekleştirin ve gelen PV-Loops kaydedebilirsiniz. 5.. İntrakoroner Basınç ve Debi Ölçümü Ml 100 ug / konsantrasyonunda nitrogliserin seyreltin ve 30 ug / ml 'lik bir konsantrasyonda adenozin seyreltin. Sol koroner arter ostiyumunda 8F kılavuz kateter yerleştirin. Sol koroner arterin proksimalinde kombine basınç / akım teli yerleştiriny. Nitrogliserin intrakoroner 200 ug yönetme ve arter basıncı ile, tel ile ölçülen distal basınç (Pd), normalize. Sol ön inen arter (LAD) orta kısmında teli yerleştirin. Bazal basınç ve debi ölçümü başlatın. Tuz 2 ml ile aynı hizada adenozin Intrakoroner ile 60 ug verilerek hiperemi neden ve hiperemik basıncını ve akışını ölçmek. Başlangıç ​​değerlerine geri akışı için bekleyin. Iki ölçümü tekrarlayın. Başka bir 200 mikrogram nitrogliserin intrakoroner aşılamak ve tekrar sol sirkumfleks koroner arter için 1.6 ve 1.7 adımları. MI 6. İndüksiyon Venöz kılıf kullanarak sağ ventrikül intrakardiyak defibrilasyon kateter yerleştirin. Distal elektrotlar ventrikül apeks, atriyum ve / veya daha kaval damar yakın elektrotlar olmalıdır. Defibrilatöre kateter bağlayın ve 50 olarak ayarlayınJ. İkinci AP (D2) diyagonal ve Lao 30 ° görünümünden LAD distalinde çapını ölçün. D2'den LAD distal (Şekil 1) çapına göre bir çapı olan bir anjiyoplasti balonu seçin. Distale LAD kılavuz kateter yoluyla bir kılavuz tel yerleştirin. Kılavuz tel üzerinden balon kateteri. D2 gelen balon distalinden yerleştirin. 30 IE / kg heparin yönetmek. Basınç LAD sağ çapına kadar balonu şişirmek. Anjiyografi ile LAD tam tıkalı (Şekil 1) kontrol edin. Steril çalışma alanını ve steril örtüler bezler ile boyun yarayı örtün. Göğüs kompresyonu veya transtorasik defibrilasyon için kullanılabilir yapmak için herhangi bir kapsama göğüs özgür. Sonraki 90 dakika boyunca balonunda basıncını kontrol edin ve gerekirse basıncını geri. Ventriküler fibrilasyon durumda: Hemen 100/dk bir frekans ile göğüs masajına başlayın. Hızlı bolus (~ 1 dak) olarak intravenöz 300 mg amiodaron yönetmek. Intrakardiyak defibrilasyon başlayın, 50 J. şokları vermek 5 başarısız şoklara sonra, göğüs kompresyonu yeniden başlatın. Başarısız şok durumunda 150 J. ile transtorasik defibrilasyon ve şok intrakardiyak defibrilasyon değiştirin, 200 J. değiştirmek Gerekirse, 150 mg amiodaron gibi ilaçlar ve / veya 1 mg adrenalin bir doz tatbik. Gerekli 3-5 dakika aralıklar ile iki kere adrenalin tekrarlayın. Transtorasik defibrilatör ile serpiştirilmiş göğüs masajına devam Cerrahi Prosedür Terbiye (Uzun Süreli Takip Up) Anjiyografi ile 90 dakika onay LAD hala tam tıkalı ise sonra. Başka bir 30 IE / kg heparin yönetmek ve balon deflate. Reperfüzyon için kontrol edin. GUID ile Sönük bir balon çıkarıncarotica'nın gelen kateter ing. Dikkatle arteriyel kılıfı çıkarın ve bir anastomoz kelepçe (Şekil 1) ile hemen karotis arter kelepçe. Kullanım karotis arter kapatmak için dikiş (6-0 prolen) devam ediyor. Kelepçeyi çıkarın ve sızıntı açısından kontrol edin. Dahili defibrilasyon kateteri çıkarın ve juguler venden kılıfı çıkarın. Kılıf giriş ligate yakın. 2-0 Vicryl kullanarak iki kat boyun deri altı ve deri kapatın. 7. Kardiyak Manyetik Rezonans Görüntüleme Sürekli anestezi altında sırtüstü yatar pozisyonda ilk MRG tablo kafasına hayvan yerleştirin. Hayvanın göğüs üzerinde bir adanmış fazlı dizi kardiyak bobin yerleştirin. Görüntü planlaması için kısa eksen ve iki odacıklı uzun eksen görünümlerinde izci görüntüler elde. EKG-kapılı kararlı durum serbest devinim kısa ekseni (SSFP) cine (apeks LV tabanına) ve iki Chambe Edinmeuzun eksen bakıldı r. Geç gadolinyum (LGE) bir inversiyon kurtarma 3D-turbo-gradyan-eko-teknik gadolinyum bazlı kontrast madde çift doz iv bolus enjeksiyondan sonra 15 dakika kullanılarak elde edilebilir. Fonksiyonel parametrelerin geçerliliği yazılımı ile çevrimdışı analiz gerçekleştirin. Sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu (LVEF), LV kitle, diyastol sonu hacmi, sistol sonu hacmi, strok hacmi, kardiyak output ve skar kitle değerlendirin. Çalışma ve Enfarktüs Boyutu 8. Sonu Çalışmanın sonunda, takip ölçümleri elde etmek Protokolleri 1-5 ve 7 izleyin. Sadece kılıç şeklinde bir süreç altında bir noktaya sadece suprasternal aşağıdan medyan 30-40 cm kesi olun. Sternum aşağı linea alba ilerlemek. Kılıç şeklinde bölünmüş ve dikkatli perikarttan posterior sternumu ayırmak için Klinkenberg makas kullanın. Açık açık makas kullandıktan sonra tekrar ayrılmasını devam ediyor. Bir sternotomi b gerçekleştiriny, örneğin, bir çekiç ve Lebsch bıçak kullanarak. Kemik iliği kanama iliği kemik balmumu sürtünme minimize edilir. Bir sternum ekartör ile göğüs kafesi açın. 3. plevral boşluk girin ve mediastende alt kaval ven bulun. Insanca derin anestezi altında alt kaval ven keserek hayvan euthanize. Bir emme cihazı ile kan çıkarın. Ventriküler fibrilasyona yol için apeks üzerinde 9 V pil yerleştirin. Kalbin eksizyonu, sağ kesilmiş ve tepe tabanından beş dilimler halinde sol ventrikül ve 15 dakika boyunca 37 ° C 'de% 0.9 tuzlu su içinde çözülmüş% 1 trifenil tetrazolyum klorid-inkübe edildi. Daha sonra,% 0.9 tuzlu su içinde dilimleri yıkayın ve her iki taraftan dilimleri fotoğraf.