小脳顆粒ニューロンの遺伝子操作<em>体外</em>と<em>インビボ</em>ニューロンの形態と移行を研究するために、

小脳は、軸索の成長と移動のメカニズムを研究するための優れたシステムです。小脳は、脳科学¹の黎明期から解剖学の研究の対象となっている。現代の顕微鏡検査および免疫組織化学的技術が大幅に拡大し、サンティアゴ、ラモン、およびカハール^2-4初期の発見に磨きをかけてきました。マウス遺伝学と分子の研究では、小脳顆粒ニューロン（CGNを^）5-7を含むニューロンの様々なタイプの適切な配線に必要な重要なイベントのより深い理解につながった、小脳発生の制御に必須の増殖および転写因子を発見した。

小脳は、途上後脳⁸のrhombomere 1の誘導体である。で最も多くニューロン集団を構成する4 ^番目の心室の屋根の一部である菱形リップ、小脳顆粒ニューロン前駆細胞を生じさせる、大人の小脳^9。吻側移行後、彼らは小脳原基に定住。ここで、顆粒ニューロン前駆体の有糸分裂は、げっ歯類において出生後に行われる外顆粒層（EGL）の劇的な拡大をもたらす。 EGLから、神経細胞は、最終的には、内部顆粒層（IGL ^2）に居を取るためにプルキンエ細胞層を越えて、分子層（ML）を介して内側への移行を開始。この渡り鳥プロセスの間に、彼らは、ML内に延びる2軸索を有するバイポーラ形を獲得する。さらに、移行の際に、細胞体、軸索から離れて移動し、二つのプロセスは、一分岐した、T字型の軸索^10を形成するために融合。その後、これらの軸索は束生のと平行線維と呼ばれている。 IGLに定住した、CGNをは苔状線維とシナプスを確立するために、樹枝状の爪を形成する樹状突起を、育つ。開発小脳において基本的なプロセスを検討するために、in vitroおよびin vivo approac で組み合わせるHは、信頼性の高い結果と結論することができます。

CGNを、小脳のが、脳全体の中で最も数多くの神経細胞であるだけでなく、高純度^11月13日に培養することができる。文化では、この非常に均質なニューロン集団は、急速に分裂後になり、容易に識別軸索と樹状突起を有する極性形態を獲得する。培養されたCGNを、前駆増殖、分化、軸索および樹状突起の発達、神経細胞遊走、アポトーシスおよび電気生理学的特性^（14-19および多くの他）を含む神経発達の様々な側面を研究することは非常に有用であることが証明されている。遺伝子操作の使用は、培養たCGNの汎用性を拡大し、前述のイベントへのさらなる機械論的な洞察を可能にした。極性マーカーまたはソフトウェアでサポートされている解析設備などで免疫細胞化学、続いて低効率リン酸カルシウムまたは親油性の方法を用いて培養されたニューロンのトランスフェクション密な神経細胞培養液中の個々のニューロンの形態学などの評価をtates。このアプローチでは、軸索または樹状突起成長中の目的のタンパク質の役割は^{20-25,26-28を}研究することができる。移行は、高密度培養では非常に限られており、共培養を必要とするので、この培養系は、しかしながら、ニューロン移動を分析するあまり有用である。軸索と樹状突起成長のインビトロ分析も過剰発現または小分子、RNA干渉（i）の組合せを使用してシグナル伝達経路の相互接続されたタンパク質の調査を可能にする。

軸索と樹状突起の成長制御やニューロン移動における目的のタンパク質の関連性を確立するために、in vivoでのエレクトロポレーション（IVE）技術が発達小脳皮質での分析を可能にする。げっ歯類における小脳開発は最初の2週間、生後に道を拡張するという事実のために、小脳はaccessibを表し軸索と樹状突起、ニューロン移動、シナプス形成およびアポトーシス^{20-24,29,30,26,27,31-34}の開発^を検討する遺伝子操作のためのル·脳構造。また、このモデル系はまた、軸索経路探索、配線と合わせて考えると、ニューロンとニューロン-グリア相互作用の接続などそのまま小脳皮質を必要とする神経発達の他の側面に有用であり、このプロトコルは、in vitroおよびin vivo技術は取り組むために提供して神経細胞の形態形成および移行に関する補完的なアプローチ。