Summary

Ein neues Verfahren zur Bewertung der verstärkenden Eigenschaften von Geschmacksstoffe in Labor-Ratten: Operante Intraorale Selbstverwaltung

Published: February 06, 2014
doi:

Summary

Die aktuelle Studie untersucht ein neues Verfahren für die Beurteilung der verstärkenden Effekte von schmackhaften Lösungen im Laborratten: intraorale Selbstverwaltung. Zu diesem Zweck operante reagiert (also Hebelpressen) für die intraorale Infusionen von süß-Lösungen in unterschiedlichen Konzentrationen wurde die kontinuierliche und progressive Verhältnisse Verstärkungspläne gemessen.

Abstract

Dieser Artikel beschreibt ein neues Verfahren zur Untersuchung der biologischen Verhaltens aufgrund der Abhängigkeit von Lebensmitteln. Diese Methode kombiniert die chirurgische Komponente des Geschmacks Reaktivität mit den Verhaltensaspekte der operanten Selbstverwaltung von Drogen. Bei sehr kurzen Vollnarkose werden Ratten mit einem intraoralen (IO) Kanüle, die die Lieferung von Testlösungen in der Mundhöhle ermöglicht direkt implantiert. Tiere werden dann in der operanten Selbstverwaltung Kammern getestet wodurch sie einen Hebel zu drücken, um IO-Infusionen von Testlösungen erhalten. IO Selbstverwaltung hat mehrere Vorteile gegenüber experimentellen Verfahren, trinken eine Lösung aus einer Tülle oder operante Reaktion für feste Pellets oder in einem Behälter geliefert Lösungen beinhalten. Hier zeigen wir, dass IO Selbstverwaltung eingesetzt werden, um die Selbstverwaltung von High Fructose Corn Syrup (HFCS) zu studieren. Die Ratten wurden zunächst für die Selbstverwaltung auf einer progressiven Ratio (PR) Zeitplan, der die maximale Menge an op beurteilt getestettemittel Verhalten, das für verschiedene Konzentrationen von HFCS (dh 8%, 25% und 50%) emittiert wird. Nach diesem Test, Ratten selbst verwaltet diese Konzentrationen auf einer kontinuierlichen Verstärkungsplan (dh eine Infusion für jede Hebelpresse) für 10 aufeinanderfolgenden Tagen (1 Sitzung / Tag; von jeweils 3 Stunden), und dann sind sie auf der PR-Zeitplan erneut getestet wurden . Auf der kontinuierlichen Verstärkung Zeitplan, nahm Ratten weniger Infusionen von höheren Konzentrationen, obwohl die niedrigste Konzentration an HFCS (8%) gehalten variabler Selbstverwaltung. Darüber hinaus zeigten die Tests, dass PR 8% hatten unteren Verstärkungswert als 25% und 50%. Diese Ergebnisse zeigen, dass IO Selbstverwaltung eingesetzt werden, um Erwerb und Wartung der Reaktion für süße Lösungen zu untersuchen. Die Empfindlichkeit des operanten Reaktion auf die Unterschiede in der Konzentration und Verstärkungsplan macht IO Selbstverwaltung eine ideale Verfahren, um die Neurobiologie der freiwillige Aufnahme o untersuchenf Süßigkeiten.

Introduction

Die Untersuchung der neurobiologischen und verhaltens Grundlage der Sucht nach Essen stützt sich auf die Beobachtungen, die, ähnlich wie bei Drogen, fördert übermäßige Verzehr von Lebensmitteln schmackhaft Verhaltensabhängigkeit 1-4 und induziert Veränderungen im Gehirn Belohnungsschaltkreise bei Mensch 6.5 und Labor Tiere 7-8. Aber, während es mehrere Protokolle und Verfahren für die Untersuchung der süchtig machenden Eigenschaften von Drogen bei Laborratten, die Anpassung dieser Methoden, um "süchtig" Verhaltensweisen, die von Lebensmittel induzierte präsentiert einzigartige Herausforderungen zu beurteilen. Das Ziel der aktuellen Studie war es, Prinzipien der operanten intravenöse (IV) Drogenselbstverwaltung auf die Untersuchung der operante Selbstverwaltung durch intraorale (IO) Infusion verabreicht süß Lösungen. Der süße beschäftigt war High Fructose Corn Syrup (HFCS), weil, obwohl umstritten, es gibt Hinweise, dass HFCS kann zur modernen Epidemie der Fettleibigkeit 9-12 verknüpft werden.

Traditionell werden die IO-Infusionen geliefert, um die Schmackhaftigkeit der Geschmacksstoffe im Geschmack Reaktivität 13 Experimente zu studieren. Kurz gesagt, wird ein IO Kanüle chirurgisch in der Wange und Ratten IO Infusionen verschiedener Lösungen implantiert werden passiv 14 geliefert. Ziel ist es, orofacial Reaktionen der Tiere auf die Geschmacksstoffe zu untersuchen. Allerdings IO Kanülen wurden auch chronisch im Gaumen von Ratten implantiert worden, um festzustellen, ob sie lernen würde, einen Hebel zur Selbst infuse Lösungen direkt in ihre Mundhöhle drücken, daher der Begriff IO Selbstinjektion 15-17. In der aktuellen Studie beschreiben wir ein Verfahren, das kleine Chirurgie nutzt und ermöglicht langfristig operante Selbstverwaltungsprüfung. Dieses Verfahren hat mehrere signifikante Vorteile gegenüber herkömmlichen Verfahren, die trinken eine Lösung aus einer Tülle (a) oder operante Reaktion für feste Pellets enthalten (b) oder operante Reaktion für Tropfen der Flüssigkeit in einem Behälter geliefert(C).

Im Vergleich zu (a), IO Selbstverwaltung beinhaltet eine operante Reaktion (dh Drücken eines Hebels), und daher ist es möglich, den Zeitplan Regulieren der Beziehung zwischen Reaktionsanforderungen und Lieferung von IO Infusionen ändern. Zum Beispiel durch den Einsatz einer fortschrittlichen Verhältnis (PR) Zeitplan, wobei Antworten für aufeinanderfolgende Infusionen erforderlich innerhalb einer Sitzung 18 exponentiell erhöhen, ist es möglich zu beurteilen, wie viel ein Tier "will" die nächste Infusion 19. Dieser wichtige Aspekt der "Suche"-Verhalten kann nicht beurteilt werden, wenn die Tiere trinken eine Lösung aus einem Auslauf, es sei denn, eine spezielle Vorrichtung, die Flüssigkeitsabgabe steuert und überwacht Reaktionen eingesetzt 20. Darüber hinaus bietet IO Selbstverwaltung eine mittlere Verhaltensweisen motiviert durch verschiedene Reize verstärken vergleichen. Das heißt, ist es möglich, operante vergleichen reagieren mit Süßigkeiten und andere Verstärker wie Drogen in haltensogenannte "Substitutionsstudien."

Im Vergleich zu (b), ermöglicht IO Selbstverabreichung Testen jeder Konzentration und jedes Volumen von jeder wasserlöslichen Zusatzstoffes. Dies ist entscheidend, um das Verhalten motiviert durch Süßigkeiten wie HFCS studieren, weil nach bestem Wissen unseren Erkenntnissen gibt es keine handelsüblichen festen Pellets von Fructose, Glucose oder Fructose-Kombinationen in unterschiedlichen Verhältnissen, das wäre geeignet für operante Kammern. Auch ist die Bedeutung der Steuerung und Manipulation Konzentration / Volumen-Verhältnisse in Experimenten, bei denen Zufuhr kann sowohl durch den kalorischen Wert der Lösung (die zur Nährstoffspezifischen Sattheit) und um wie viel von dieser Lösung kann innerhalb eines gegebenen verbraucht moduliert werden zwingend Zeitraum (dh Fülle) 21. IO Selbstverwaltung verkürzt auch die Verzögerung zwischen der operante Reaktion und der Lieferung des primären Verstärker, ein Faktor, der eine wichtige Rolle bei der Übernahme und Wartung spielttung der operanten Verhalten 16,22-23.

Schließlich, im Vergleich zu (c), ermöglicht IO Selbstverwaltung die Lieferung von passiven IO Infusionen von kontrollierten Mengen der Testlösung, und dies macht es möglich, orofacial Antworten der "Geschmack" zu messen (Ziel hedonische Reaktion wie Zunge Vorsprünge 24 -25) und ob diese Reaktionen während IO Selbstverwaltung zu ändern. Ferner die Fähigkeit, passive IO-Infusionen zu verabreichen hat bedeutende Anwendungen für das Studium der Rückfall in Lebensmittelsuche. Das heißt, dass in den Studien der IV Drogenselbstverwaltung folgende Zeiträume vom Aussterben bedroht, kann Drogen Primzahlen (dh die Verabreichung einer kleinen Dosis des Medikaments 26) "wieder herzustellen" reagiert 27-28. Daher kann die Fähigkeit, IO-Infusionen ohne jede Wirkung auf den Teil des Tieres liefern verwendet werden, um "Nahrung" grundiert Wiedereinstellung, sowie mögliche Querwieder zwischen Nahrung und studierenDrogen.

IO Selbstverwaltung der süßen Lösungen ist auch bevorzugt, IV und intra-Magen-Selbstverwaltung. In der Tat, obwohl IV-Infusionen von Fruktose bei Menschen und Versuchstieren erzeugen physiologischen Konsequenzen nach oraler Verbrauch 29-31 vergleichbar, die sich, das ist ein schlechtes Beispiel dafür, wie Süßigkeiten konsumiert werden in der Regel (dh oral). Darüber hinaus kann durch Kauen produziert gustatorische Signale übertragen wichtige Informationen über die Schmackhaftigkeit der Nahrung, und wenn diese Stufe der Verdauung weggelassen wird, wird die Entwicklung von maladaptive Verhaltensweisen wie übermäßiges Essen 32-33 reduziert.

Protocol

1. Tierpflege-und Wohnungswesen Alle Experimente werden von der Tierpflege-Ausschuss der Universität von Guelph zugelassen und werden in Übereinstimmung mit den Empfehlungen des Canadian Council on Animal Care durchgeführt. Die vorliegende Studie umfasst 22 erwachsene männliche Sprague-Dawley-Ratten (Charles River, QC) mit einem Gewicht von 200-225 g zu Beginn des Experiments. Einfamilienhaus Ratten und halten sie auf einer umgekehrten Licht / Dunkel-Zyklus (07.00 OFF – 19.00 …

Representative Results

Erwerb von IO Selbstverwaltung Abbildung 3 stellt operante Reaktion auf die aktiven und inaktiven Hebel während der Selbstverwaltung von 8%, 25% oder 50% HFCS 10 aufeinanderfolgenden Sitzungen. Ratten IO Selbstverwaltung der HFCS erwerben innerhalb der ersten drei Sitzungen und Erhaltung stabiler Wirkhebel reagiert (wie oben beschrieben) für den Rest des Erwerbs. Konzentrationsabhängige Unterschiede in der Wirkhebel Antworten sind auch auf der Hand: im Vergleich zu …

Discussion

Die aktuelle Studie zeigt einen neuen Ansatz für die Bewertung der verstärkenden Eigenschaften von süßen Lösungen durch die Kombination von traditionell eingesetzt, um das Verhalten motiviert durch Drogen (intravenös operante Selbstverwaltung) zu studieren und die Schmackhaftigkeit der Geschmacksstoffe (Geschmack Reaktivität durch intraorale Infusionen) beurteilen Methoden. Zu diesem Zweck ist in sehr kurzen Isofluran-Anästhesie induziert, Ratten werden mit einem IO-Kanüle, die zur Lieferung von Testlösungen d…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Studien wurden durch Zuschüsse aus dem Council of Canada (NSERC) Natural Sciences and Engineering Research In den FL und einer kanadischen Graduate Scholarship (CGSD) von NSERC zu AM.L. unterstützt

Materials

Reagents
Meloxicam Boehringer Ingelheim Canada Ltd. From the Ontario Veterinary College pharmacy
Procaine Penicillin G Pen Aqueous, Wyeth Animal Health From the Ontario Veterinary College pharmacy
Lidocaine HCl 2% From the Ontario Veterinary College pharmacy
Marcaine 0.5 % From the Ontario Veterinary College pharmacy
Lubricating eye ointment Product can be bought at any pharmacy
2% Lidocaine Viscous Oral (Topical Anesthetic) Pharmascience Inc. CDMV # 14705 100 ml bottle
Isoflurane USP Pharmaceutical Partners of Canada CDMV # 108737 250 ml bottle
Bacti-Stat Merck Sante Animale CDMV # 6449 3.785 L bottle
Isopropyl alcohol (70%) Perdu Pharma Fisher # MPX18404 4 L bottle
Betadine 10% McKesson Canada CDMV # 104826 500 ml bottle
Super Germiphene Ceva Animal Health CDMV # 103629 454 ml bottle
Chlorhexidene(Novadent) Zoetis CDMV # 8908 236 ml bottle
High Fructose Corn Syrup Natures Flavours HFCS-55 1 Gallon bottle
Materials
PE90 tubing Becton Dickinson and Company VWR # CA-63019-080A 100 ft/coil
PE160 tubing Becton Dickinson and Company VWR # CA-63018-747 100 ft/coil
Polypropylene Mesh Small Parts Inc. CMP-0297-D
Soldering iron Product can be bought at any hardware store
# 64 Elastic bands Staples Office supplies Item # 13556 Product can be bought at any office supply store
15 G thin-walled 3.5 inch needles VWR # CABD1108 12 needles per pack
Electric razor (1/2 in wide blade) Product can be bought at any pet supply store
Percision Glide Needles 20 G needles (1 ½ in) Becton Dickinson and Company Fisher # 14-826D
Percision Glide Needles 16 G needles (1 ½ in) Becton Dickinson and Company Fisher # 14-826-5D
Operant conditioning chambers Med Associates Inc. ENV-008-CTC
Sound attenuating chamber Med Associates Inc. ENV-018M
MED PC IV software Med Associates Inc. SOF-735
Syringe Pumps Razel Scientific Instruments
Disposable plastic swivel assembly Med Associates Inc. PHM-115I
Tygone Microbore tubing Saint Gobain Performance Plastics Fisher # 1417015B 500 ft/coil

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Levy, A., Limebeer, C. L., Ferdinand, J., Shillingford, U., Parker, L. A., Leri, F. A Novel Procedure for Evaluating the Reinforcing Properties of Tastants in Laboratory Rats: Operant Intraoral Self-administration. J. Vis. Exp. (84), e50956, doi:10.3791/50956 (2014).

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