新規タスクを使用した片側子宮頸SCI後前肢の機能を評価する：四肢ステップ交替、姿勢の不安定やパスタの取り扱い

全ての動物手順は、テキサス大学オースティン校の内部IACUCとし、国立衛生研究所（NIH）のガイドラインに基づいて承認されたプロトコルに従って行われた。 この研究で用いた動物は無限ホライゾンインパク、又はC3/C4横方向片側切断モデルとこれらの方法は、他のモデル18に、より広く適用することができるC3/C4を用いて横方向の挫傷を有していた。試験期間中のため、我々は研究者は損傷前に2週間のために動物をテストすることをお勧めし、3日間は、損傷後、定期的に（ 例えば毎週）。特に3日後に手術で、術後の動物に行動試験を行う際には、注意が動物が手術から十分に回復し、行動試験の手順は、動物への追加の痛みやストレスを引き起こさないことをしていることに注意しなければならない。 一般的には、ハンドリングと事前テストの2〜3週間は、手術前に必要になる場合があります。これは、テストだけでなく、動物が、試験表面に自由に移動できるように中に処理される方法と同じようにそれらを処理することで、テスト環境に動物が快適な取得が伴う。これは取り扱いに動物を順応さ非ダイレクトな動きで、試験表面に近く、動物を移動することによって行うことができ、開催されることに慣れた動物を取得することも重要です。これは、開始時および試験セッションの間に動物を緩和することも重要である。 、動物をリラックス "手押し車"の位置に、前肢のみの保有​​スタンスで卓上に動物を保持し、前肢が表面に触れることが可能卓上に優しく動物をバウンスします。これは安定した表面のためにそれらの下に検知するために動物を教え、それはテストが始まる前に動物が緩和されることを保証するための手順の重要かつ必要なステップです。 1。前肢ステップ交代テスト テスト要約：彼らは彼らの前肢の使用を交互にするかどうか決定するために、卓上に触れるの両方前肢で動物を置きます。ステップを試みるためにそれらを強制的に、体の重心をシフト前方ラットを移動します。この試験は、各動物で4回繰り返し、動物の位置は交互する能力、またはより高い、75％を示した場合、それはオルタネータであると考えられる。非オルタネータと考えられている動物が繰り返し同じ前肢でいきますので、これは、強制的なモーションタスクである。 自分の体表からほぼ90°の「手押し車」の位置に、前肢のみの体重支持のスタンスで卓上に動物を開催しています。 動物がリラックス表示されたら、テーブルトップの表面に沿って移動するように前進​​動物を押してください。 表面を横切って移動しながらラットを交互に前肢の使用かどうかを判断し、記録します。 注意して運動を開始し、O動物が代替できるかどうか前肢を記録N前肢ステップ交替テストのスコアシート（付属）。 1手（右または左手）で動物を保​​持した状態で、少なくとも2回のテストを繰り返します。一方で動物を保​​持した状態で少なくとも二回、再び繰り返します。 ラットがこの能力を示した場合は、ステップ交互に交互のパターンが遅延した後に残るかどうかを決定する最初のステップの後に5秒の待ち時間を導入することによって再度試験することができる。スコアシートに結果や記録を注意してください。 このテストでは、毎日使用することができ、それは動物を反復測定実験のために少なくとも週にテストされることをお勧めします。 注：試験動物の交替行動に影響を及ぼし得るので、それは実験者の手の位置を交互にすることが重要である。設けステップ交替スコアシートは、ステッピング時の足の位置および使用を留意することに使用することができる。我々は現在、当社のスコアリングシステムにそれらのデータを組み入れていないが（私たちは持っている使用済みの交替状況基に、現在の研究における損傷動物）、ユーザが容易に特定のプロジェクトに応じて、分析の一部として足の位置データを含むことができる。 2。姿勢の不安定テスト テストサマリー：この行動試験では、前肢交代テストの場合と同様の位置にラットを保持するが、しかし、各々の前肢を個別にテストする必要があります。卓上には、滑りブレース、またはテスト中に前肢のドラッグを防止するために、サンドペーパー（番号220）で覆われている必要があります。 このテストでは、それはそのバランスを取り戻すために前肢が調べられているとの一歩を踏み出すために、動物に要する距離が記録されます。 体重に大きな差が所与の動物19の重心を維持するために必要なベースライン距離の変化をもたらすことができるように、研究グループ内の動物は、ほぼ同じ重量、大きさおよび年齢でなければならない。シャム群は、あるべき行動の変化は、再生または回復ではなく、年齢や体重増加によるものであることを確認するために、PITを使用しながら含まれていた。 快適なスタンスで卓上に動物を持って、両方の前肢が表面に到達することができ、動物が快適に自分の体表からほぼ90°の「手押し車」の位置にあるべきである。それは、より垂直に動物を保持することが重要であることに注意してください。これは、ステップをトリガーするために必要な、より一貫した距離は、重心を取り戻すことを可能にする。 軽く動物の胴体に対して1前肢を抑制し、上から見たゼロラインをラットの鼻の位置を合わせます。 前進ラットを移動します。これは、重力が前方にバランスを取り戻すためにステップするために動物を刺激する動物の中心をシフトします。 二回ラットステップ後の鼻の新しい位置を記録し、距離がステップをトリガーするために、必要に応じてこれらの2つのステップの平均を使用しています。 各foreliをテストMB独立5X、バック0の位置に動物を持ってきて、動物が一貫性のある結果を保証するために、続行する前に、実験者の手で緩和され続けていることを検証する。 提供姿勢の不安定テスト（PIT）スコアシート、上のレコード。このテストは、毎日行うことができ、それは動物が実験期間中に少なくとも週にテストされていることをお勧めします。 3。パスタ取扱テスト テストサマリー：それはパスタを食べるセッション中にパスタや足の好みの部分を食べるのにかかる時間を決定するために、このテストに使用します。このテストでは、乾燥パスタの4.0センチメートルストランド（;直径〜1.6ミリメートルの薄いスパゲッティ）を使用します。テストでは、各試験日ほぼ同時に投与されるべきである。げっ歯類は一般的に容易に乾燥パスタを食べますが、食品離​​脱の4〜6時間はこれが発生しない場合は、テストする前にお勧めします。 ベースライン測定は、1〜2週間前に取得すべき傷害に。ベースラインの記録に先立って、ラットは、試験のためにそれらを準備するために、それらのホームケージにパスタの同じタイプを与えられるべきである。すると、ラットは、試験室でパスタを食べ、パスタを食べる時間を記録することができます。パスタ片は前肢の使用が容易に観察することができ、試験室の正面近くに配置する必要があります。各パスタを食べるセッションは、パスタの少なくとも3個を食べて含める必要があります。彼らのパスタを食べる時は、少なくとも3日間、一貫している場合は、ラットを、パスタを食べに堪能と考えられている。 検査室で一貫してパスタを食べにラットを訓練した後、記録室にラットを配置します。 パスタ取扱スコアシートに見られるように、パスタの一部、使用前肢と前肢の位置を食べに検査室と記録時間の前面付近の床の上にパスタのピースを置きます。 このテストは、毎日実行することができますが、動物の体重を観察しながら、Tとして、毎週それを実行することをお勧めしますO動物を過剰餌を与えない。 注：パスタスコアシートの取り扱いは、この研究に含まれているデータと同様パスタや足の使用を、食べる時間を記録するためのスペースが用意されています。我々はまた、このような足の位置などのパスタを食べるセッション中に足の使用のさらなる詳細を記録する領域が含まれています。