Волокна шелка паука отображать необычные механические свойства. Engineered<em> Araneus Diadematus</em> Фиброин 4 (eADF4) может быть обработано в нетканые сетки использованием электропрядения. Здесь eADF4 нетканые сетки используются для улучшения производительности фильтрации воздуха устройств.
На основе природной последовательности Araneus Diadematus Фиброин 4 (ADF4), рекомбинантного белка шелка паука eADF4 (C16) был разработан. Это часто повторяющихся белок имеет молекулярную массу 48kDa и растворим в различных растворителях (гексафторизопропанол (ГФИП), муравьиной кислоты и водные буферы). eADF4 (С16) обеспечивает высокий потенциал для различных технических применений при обработке в морфологии, такие как пленки, капсулы, частиц, гидрогели, покрытий, волокон и нетканых сеток. Благодаря своей химической стабильности и контролируемой морфологией, последний может быть использован для улучшения фильтрующих материалов. В этом протоколе, мы представляем процедуры для повышения эффективности различных устройств фильтр воздуха, осаждением из нетканого ячейками электропряденых рекомбинантных белков шелка паука. Электропрядения из eADF4 (С16), растворенный в HFIP результатов в гладких волокон. Изменение концентрации белка (5-25% вес / объем) приводит к различных диаметров волокна (80-1,100 нм)Таким образом, размер пор нетканого сетки.
Доочистка eADF4 (С16) электропряденых от HFIP необходимо, так как белка отображает преимущественно α-спиральные вторичной структуры в только что формованные волокна, и поэтому слои являются водорастворимыми. Последующая обработка паров этанола индуцирует образование водостойкость, стабильность β-складчатых структур с сохранением морфологии волокон шелка и сеток. Вторичный анализ структуры проводили с помощью инфракрасной Фурье-спектроскопии (FTIR) и последующего Фурье самостоятельно деконволюции (FSD).
Основная цель заключается в повышении эффективности фильтра существующих фильтров подложки путем добавления шелка нетканых слоев на вершине. Для оценки влияния электропрядение продолжительность и таким образом нетканый слой толщиной эффективность фильтра, мы провели испытания проницаемости воздуха в сочетании с измерениями осаждения частиц. Эксперименты проводились в соответствии со стандартомпротоколов.
Из-за их сочетание прочности и расширяемость, волокна шелка паука может поглощать больше кинетической энергии, чем большинство других натуральных или синтетических волокон 1. Кроме того, в отличие от большинства синтетических полимерных материалов шелк материалы должны быть нетоксичными и биосовместимыми и не вызывают аллергические реакции при введении 2,3. Предполагаемые риски для здоровья можно предотвратить с помощью паучьего шелка. Эти особенности делают шелк паука весьма привлекательным для различных медицинских и технических приложений. Так как пауки не может быть обрабатывали из-за их людоедский поведение, биотехнологических методов были разработаны для получения белков шелка паука, и экономически эффективно и в достаточных количествах 4.
Рекомбинантного белка шелка eADF4 (С16) была разработана на основе природного последовательность Araneus Diadematus Фиброин 4 (ADF4). eADF4 (С16) имеет молекулярную массу от 48kDa 5 и растворим в различных растворителях (hexafluoroisopropanol (ГФИП) 6, муравьиная кислота 7 и водные буферы) 8. eADF4 (С16) могут быть обработаны в различной морфологии, такие как пленки 9, капсулы 8, частицы 10, гидрогели 11, покрытий 7, 12 волокна и нетканые сетки 6. Благодаря своей химической стабильности, последние обеспечивают высокий потенциал в фильтр приложений.
Здесь мы приводим протокол для изготовления воздушных фильтров устройств, включая нетканые сетки электропряденых рекомбинантных белков шелка паука. Электропрядение или электростатического формования является метод обычно используют для производства полимерных волокон с диаметрами в диапазоне от 10 нм -10 +13 мкм и нетканой сетки уже были исследованы на фильтрах 14. В прошлом электропрядения был успешно применен для обработки регенерированного 15, а также рекомбинантно 16 шелка паукабелками. Обычно высокое электрическое напряжение (5-30 кВ) применяется к шприца и противоположный электрод (0-20 кВ), расположенных на расстоянии 8-20 см. Сильное электростатическое поле индуцирует силы отталкивания из загруженной решение. Если поверхностное натяжение превышении конуса Тейлора формируется, и тонкой струей извергается из кончика 17,18. После образования, гибка неустойчивости происходит в течение струи приводит к дальнейшему растяжения как растворитель испаряется, и твердый волокна сформированы. Наконец, волокно случайно нанесенных на противоположный электрод как нетканый сетки 19. Свойства волокон, как диаметр и топологии поверхности (гладкие, пористые) в основном зависит от решения таких параметров, как концентрация, вязкость, свободной поверхностной энергией и собственной электропроводностью растворитель и проницаемость 20. Электропрядения из eADF4 (С16), растворенного в ГФИП приводит к гладкой волокна диаметром от 80-1,100 нм в зависимости от концентрации белка в растворе.eADF4 (С16) электропряденых от HFIP отображает преимущественно α-спиральные структуры и вторичные волокна растворимы в воде 6. С целью стабилизации волокон шелка, β-складчатых структур должны быть индуцирован с последующей обработкой этанолом. В отличие от ранее установленных после лечения методами 21, в данном исследовании eADF4 (С16), нетканые материалы были обработаны паров этанола в целях сохранения морфологии волокон шелка. Вторичный анализ структуры проводили с помощью инфракрасной Фурье-спектроскопии (FTIR) и последующего Фурье самостоятельно деконволюции (FSD), как описано в литературе 22. FSD является обработки сигналов инструмент, который позволяет разрешение ИК-спектр, состоящий из нескольких перекрывающихся полос. Таким образом, нечеткие полосы среди широкой области I могут быть сужены помощью фильтра верхних частот для получения деконволюции спектр с улучшенными пик разрешения.
Для того чтобы оценить эффiciency фильтра подложки дополнена шелк нетканые сетки, тесты воздухопроницаемости проводили с использованием Akustron устройство в соответствии со стандартными протоколами. Скорости осаждения были измерены с помощью частиц Palas универсальный классификатор.
Новый фильтр устройства должны позволит снизить общее потребление энергии в области фильтрации воздуха при постоянном или выше фильтра эффективности. Здесь, такие устройства были созданы с использованием нетканых материалов из шелка паука. Из-за низкого поверхностного натяжения и высокую летучесть, HFIP был выбран в качестве подходящего растворителя для электропрядение процесса. Кроме того, водные растворы, шелковых были испытаны в предыдущих экспериментах, но волокна не могут быть получены. При этом, было бы важно использовать добавки для снижения поверхностного натяжения и тем самым улучшить свойства прядильного раствора. Наиболее важным шагом является корректировка условий и используемого материала и концентрации растворителя прядильного раствора, спиннинг высоты, напряжения и скорости экструзии. Во время выполнения, например засорение кончика может быть предотвращено путем подачи кончик иглы с влагой в виде водяного пара, но любые дополнения в электропрядение установка может впоследствии мешатьчувствительным процессом и электрического поля. Основные параметры процесса (концентрация, напряжение, расстояние, влажность) отдельно определены проведение отдельной серии экспериментов (данные не показаны). Принимая во внимание все параметры во внимание очень важно, чтобы заботиться о непрерывном конуса Тейлора и прядения для создания однородных волокон.
Эффективность фильтра является одним из наиболее важных параметров фильтрующих материалов. Этот параметр в основном зависит от структуры фильтрующего материала. Wovens наследуют равномерным размеров пор и в дальнейшем последовательно воздухопроницаемость. Это имеет решающее значение для создания однородной нетканых сетках на этих шаблонов материалов для заполнения пор и сформировать бездефектное фильтр. Эффективность фильтра в наших фильтров показывает прямую зависимость от вращающегося продолжительность (из протеинов шелка), и, следовательно, на количество слоев нетканого материала сетки. Зазоры между одиночными волокнами последовательно заполнены, позволяя удержание ое более мелкие частицы.
В этой работе мы ввели способ получения новых фильтрующих материалов с ячейкой паучьего шелка нетканых, показывая высокую эффективность фильтра. Таким образом, эти фильтры являются перспективными кандидатами для будущего использования в системах фильтрации воздуха.
The authors have nothing to disclose.
Мы выражаем искреннюю благодарность за техническую и научную поддержку Ани Лаутербах (Lehrstuhl Biomaterialien), Лоренц Summa (Sandler AG) и Армин Бек (B / S / H / G). SEM-изображение было выполнено Йоханнес Диль (Lehrstuhl Biomaterialien). Финансирование было получено из BMBF (01RB0710).