の定位注入マイクロRNA発現マウス海馬CA1領域にレンチウイルスと行動アウトカムの評価

マイクロRNAは（miRNA）は長さ22ヌクレオチドの周りの小さな規制一本鎖RNA分子であるかもしれないことを各ターゲット多数のmRNA転写を誘導破壊および/またはこれらのターゲットの翻訳を阻害することによって薄暗い全体の遺伝子発現経路。いくつかのmiRNAは、神経構造と機能を維持するために、より高いレベルの脳機能において重要な役割を果たし、及び方法は、これらの機能を探索するためのそれらのレベルを操作するために求められている。ここでは、miRNAをコードするウイルス粒子の定位注射によってマウスにおける過剰な強制miRNAの認知影響を調べるためのインビボ方法で直接を提案する。具体的には、現在のプロトコルでは、海馬CA1哺乳類メモリの統合に貢献する地域、学習、ストレス応答への注入を含み、便利な注射部位を提供しています。座標は、デジタル制御と非常に遅い保持されるマウスブレグマとウイルス血流に従って測定される。注射後、手術創傷を密閉し、動物が回復される。対応するmRNAターゲットのサイレンサーをコードレンチウイルスはナイーブマウスに、生理食塩水及び対照として "空"のレンチウイルスベクターを注射したマウスに注射したマウスで、観察された効果に責任を特定のmiRNA /ターゲットの相互作用を巻き込むのに役立つ。一ヶ月後噴射は、動物はそれらのナビゲーション学習および記憶能力を評価するためのモリス水迷路（MWM）で検討されている。 MWMは1センチメートル水面下に沈んで小さなプラットフォームで着色水で満たされた丸いタンクである。タンクの周りに着実視覚的な手がかりは、空間ナビゲーション（音と地球の磁場にもナビゲートで動物を助けるかもしれない）を可能にします。ビデオカメラの監視は、水泳とプラットフォームを見つけ、量に時間の経路を測定することができます。マウスが最初に隠れたプラットフォームをマウントすると、強制水泳からの脱出を提供することを教えられて、それは、その後、このエスケープとfを使用するためにテストされinally、プラットフォームは削除され、マウスがその前の位置を記憶した場合のプローブテストは検討されています。複数の連続した​​日間のテストプラットフォームを見つけてマウントするために短い待ち時間で試験されたマウスのパフォーマンスの向上を強調し、より直接的なルートがプラットフォームまたはその場所に到達するまで繰り返される。このような改善を示すに失敗すると、その後（高架迷路内など ）は、特に試験することができる障害、学習と記憶、および/ ​​または不安を表します。このアプローチは、研究、認知および/またはストレス関連のプロセス内の特定のmiRNAと標的転写物の検証を可能にします。