Protégé antigènes fonctionnels globules rouges par la membrane greffage de compacts Polyglycérols hyperbranchés
Summary
La modification la membrane cellulaire des globules rouges (hématies) avec le polyglycérol hyperbranché (HPG) est présenté. Globules rouges modifiés ont été caractérisées par séparation de phase aqueuse à deux, fragilité osmotique et la lyse médiée par le complément. Le camouflage des protéines de surface et des antigènes a été évaluée en utilisant la cytométrie en flux et Micro Typing System (MTS) cartes de phénotypage de sang.
Abstract
De globules rouges (RBC) la transfusion est indispensable pour le traitement d'un certain nombre de problèmes graves et chroniques médicales telles que la thalassémie majeure et une anémie drépanocytaire 1-3. En raison de la présence de la multitude des antigènes à la surface du globule (~ 308 antigènes connus 4), les patients du traitement par transfusion sanguine chronique développer des allo-anticorps en raison de la Miss Match des antigènes mineurs sur les globules rouges transfusés 4, 5. Greffage de polymères hydrophiles comme le polyéthylène glycol (PEG) et de polyglycérol hyperbranché (HPG) forme une couche d'exclusion de membrane des globules rouges qui empêche l'interaction d'anticorps avec des antigènes de surface, sans affecter le passage de petites molécules telles que l'oxygène, le glucose, et des ions 3. À l'heure actuelle aucune méthode n'est disponible pour la production de cellules rouges universels de donneurs de sang en partie à cause de l'énorme défi présenté par la présence d'un grand nombre d'antigènes (protéines et des glucides en fonction) sur la surface du globule et le développement de ces méthodes permettra d'améliorer sensiblement la sécurité transfusionnelle, et d'améliorer considérablement la disponibilité et l'utilisation de globules rouges. Dans le présent rapport, les expériences qui sont utilisés pour développer des antigènes protégées globules rouges fonctionnels par la membrane greffage de HPG et leur caractérisation sont présentés. HPGs sont hautement biocompatible polymères compacts 6, 7, et on s'attend à être situé dans le glycocalyx cellulaire qui entoure la membrane lipidique 8, 9 et antigènes de surface masque RBC 10, 11.
Protocol
Representative Results
Discussion
GR donateurs universelles ont un grand potentiel dans la disponibilité du sang et de sécurité pour améliorer la thérapie de transfusion sanguine. Les globules rouges sont également considérés comme vecteurs de médicaments prometteurs en raison de leur longue circulation et la biocompatibilité inhérente 14, 15. Les expériences présentées dans cet article d'évaluer la caractéristiques in vitro de globules rouges modifiés HPG. L'propriétés in vitro e…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche a été financée par les Société canadienne du sang (SCS) et les Instituts canadiens de sciences de la santé du Canada (IRSC) Fonds de partenariat pour la recherche. Les auteurs remercient le Hub LMB macromolécule au Centre de l'UBC pour la recherche de sang pour l'utilisation de leurs installations de recherche. L'installation de l'infrastructure est soutenu par la Fondation canadienne pour l'innovation (FCI) et la Fondation Michael Smith pour la recherche en santé (MSFHR). R. Chapanian est récipiendaire de (IRSC / CBS) bourses postdoctorales en transfusion sanguine et d'un destinataire de recherche MSFHR poste stagiaire boursier de doctorat. JN Kizhakkedathu est récipiendaire de carrière MSFHR chercheur Scholar Award.
Materials
| Glycidol | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| Trimethylolpropane | Fluka | (ON, Canada) | |
| Potassium methylate | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| Anhydrous pyridine | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| 4-Dimethylaminopyridine | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| Succinic anhydride | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| Acetone | Fisher Scientific | (ON, Canada) | |
| Anhydrous dimethyl formamide | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| N-Hydroxysuccinimide | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| N,N’-Diisopropylcarbodiimide | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| MTS cards | Micro Typing System (MTS) cards (FL, USA) | ||
| Dextran 500 kDa | Pharmacia Fine Chemicals | (Sweden) | |
| PEG 8 kDa | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| FITC monoclonal anti-Rhesus D (RhD) | Quotient Biodiagnostics | (PA, USA) | |
| PE monoclonal anti-CD47 | BD Biosciences | (NJ, USA) | |
| Drabkin’s reagent | Sigma Aldrich | (ON, Canada) | |
| Table. Chemicals and reagents used for the grafting of HPG polymers to RBC membrane and their analysis. |
References
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