Terugkerende Herpetische Stroma Keratitis in Muizen, een model voor het bestuderen van de Mens HSK
Summary
De meeste studies van de herpes ziekte van het hoornvlies gebruik maken van een primaire infectie model. Echter, primaire infectie met HSV-1 gewoonlijk niet tot menselijke ziekte. Hier beschrijven we een terugkerende herpes model van ziekte van het hoornvlies, die beter nabootst menselijke ziekte.
Abstract
Herpetische oogziekte, genoemd herpetische keratitis stromale (HSK), is een potentieel verblindende infectie van de cornea die resulteert in meer dan 300.000 klinische bezoeken per jaar voor behandeling. Tussen 1 en 2 procent van de patiënten met klinische ziekte ervaart verlies van het gezichtsvermogen van de geïnfecteerde hoornvlies. De overgrote meerderheid van deze gevallen zijn het resultaat van reactivering van een latente infectie door herpes simplex virus type I en niet door acute ziekte. Interessant is dat de acute infectie is de meest gebruikte model om deze ziekte te bestuderen. Er werd echter van mening dat een steeds terugkerend model van HSK zou meer een afspiegeling is van wat er gebeurt tijdens de klinische ziekte. De recurrente diermodellen voor HSK hebben gebruikt zowel konijnen en muizen. Het voordeel van konijnen is dat ze ervaren reactivering van latentie bij gebrek aan een bekende stimulus. Dat gezegd hebbende, is het moeilijk om te verkennen de rol die vele immunologische factoren spelen in terugkerende HSK, omdat het konijn model heeft niet de Immunsche en genetische hulpbronnen die de muis heeft. We kozen voor het muismodel voor terugkerende HSK gebruiken omdat het heeft het voordeel dat er veel middelen beschikbaar en ook wij weten wanneer reactivering zal optreden omdat reactivering wordt veroorzaakt door blootstelling aan UV-B licht. Tot nu toe heeft dit model mag deze laboratoria te gebruiken om een aantal immunologische factoren die belangrijk zijn voor deze ziekte te definiëren. Het is ook toegestaan om zowel therapeutische als werkzaamheid van het vaccin te testen.
Protocol
Discussion
De recurrente model van herpetische stromale keratitis (HSK) hier beschreven staat stelt de onderzoeker voor de menselijke HSK studeren in een model dat meer in overeenstemming is met hetgeen wordt waargenomen tijdens ziekte bij de mens. Dus het model sterktes die ziekte zich in het kader van een immuunsysteem dat reeds door gestimuleerd tijdens primaire ziekte. Omdat deze muizen al een immuunrespons tegen HSV-1, de factoren die de immuunrespons opnieuw waarschijnlijk verschillend van die oorspronkelijk gegenereerd. Daa…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
De auteurs willen graag Dr Jay Pepose bedanken voor het helpen van het onderwijzen van de model voor ons. Dit werk werd ondersteund door de National Institutes of Health Grants EY11885 (PMS), EY21247 (PMS) en een onbeperkte subsidie van onderzoek naar blindheid te voorkomen bij Afdeling Oogheelkunde.
Materials
| DMEM | Sigma | D5796 |
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11150 |
| Human Serum | Sigma | S7023 |
| L-Glutamine | Cellgro | 25-005-C1 |
| Pen/ Strep | Sigma | P4333 |
| Fungizone | Invitrogen | 15290018 |
| Centrifuge | Sorvall | Legend RT |
| Centrifuge | Beckman | 52-21 |
| Transilluminatior | UVP | 95-0452-02 |
| Sonicatior | Branson | Sonifier 450 |
| Oak Ridge Tubes | Nalgene | Z 720410 |
| Flasks- 7150 | Corning | 430823 |
| Plates- 12 well | Corning | CLS 3513 |
| Plates- 48 well | Corning | CLS 3548 |
| Sterile Conical Tubes- 30 ml | Corning | CLS 430828 |
| Sterile Cotton-tipped Applicators | Fisher | 23-400-125 |
| 30G Needles | Becton-Dickinson | 305106 |
| 25G Needles | BD | 305122 |
| 10 ml Syringe | BD | 309602 |
| 10 ml Syringe | BD | 309604 |
References
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, B., Easty, D. An improved model of recurrent herpetic eye disease in mice. Curr. Eye Res. 8, 1193-1205 (1989).
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, W. A., Easty, D. L. Reactivation of latent infection and induction of recurrent herpetic eye disease in mice. J. Gen. Virol. 71, 397-404 (1990).
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, W. A., Easty, D. L. Passive immunization protects the mouse eye from damage after herpes simplex virus infection by limiting spread of virus in the nervous system. J. Gen. Virol. 71, 681-687 (1990).
- Laycock, K. A., Lee, S. F., Brady, R. H., Pepose, J. S. Characterization of a murine model of recurrent herpes simplex viral keratitis induced by ultraviolet B radiation. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 32, 2741-2746 (1991).
- Keadle, T. L., Stuart, P. M. IL-10 ameliorates corneal disease in a mouse model of recurrent herpetic keratitis. Microbial Path. 38, 13-21 (2005).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Miller, J. K., Hook, K. K., Fenoglio, E. D., Francotte, M., Slaoui, M., Stuart, P. M., Pepose, J. S. Efficacy of a recombinant glycoprotein D subunit vaccine on the development of primary and recurrent ocular infection with herpes simplex virus type 1 in mice. J. Inf. Dis. 176, 331-338 (1997).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Proinflammatory cytokines IL-1 and TNF-a are required for recurrent herpetic keratitis in NIH mice. Invest. Ophth. Vis. Sci. 41, 96-102 (2000).
- Keadle, T. L., Usui, N., Laycock, K. A., Kumano, Y., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Corneal cytokine expression in a murine model recurrent herpetic stromal keratitis. Ocular Immunol. Inflam. 9, 193-205 (2001).
- Keadle, T. L., Morris, J. L., Pepose, J. S., Stuart, P. M. CD4+ and CD8+ cells are key participants in the development of recurrent herpetic stromal keratitis in mice. Microbial Path. 32, 255-262 (2002).
- Keadle, T. L., Morrison, L. A., Morris, J. L., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Therapeutic immunization with a virion host shutoff-defective, replication-incompetent herpes simplex virus type 1 strain limits recurrent herpetic ocular infection. J. Virol. 76, 3615-3625 (2002).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Morris, J. L., Leib, D. A., Morrison, L. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Therapeutic vaccination with vhs(-) herpes simplex virus reduces the severity of recurrent herpetic stromal keratitis in mice. J. Gen. Virol. 83, 2361-2365 (2002).
- Keadle, T. L., Morris, J. L., Stuart, P. M. The effects of aminoguanidine on primary and recurrent ocular herpes simplex virus infection. Nitric Oxide. 13, 247-253 (2005).
- Stuart, P. M., Morris, J. E., Sidhu, M., Keadle, T. L. CCL3 protects mice from corneal pathology during recurrent HSV-1 infection. Front. Biosci. 13, 4407-4415 (2008).
- Keadle, T. L., Alexander, D. E., Leib, D. A., Stuart, P. M. Interferon gamma is not required for recurrent herpetic stromal keratitis. Virology. 380, 46-51 (2008).
- Carr, D. J., Austin, B. A., Halford, W. P., Stuart, P. M. Delivery of Interferon-gamma by an adenovirus vector blocks herpes simplex virus Type 1 reactivation in vitro and in vivo independent of RNase L and double-stranded RNA-dependent protein kinase pathways. J. Neuroimmunol. 206, 39-43 (2009).
