遺伝的に定義された神経回路のトレースウイルス

神経回路を研究するための古典的な方法は、かなり低いスループットです。特に経シナプスウイルス、仮性（PRV）と狂犬病ウイルス（RABV）、そして最近では、水疱性口内炎ウイルス（VSV）、回路を研究するために、ますます人気が高まっています。これらのより高いスループット方法は順行性または逆行どちらの方向でもニューロン間の送信、ウイルスを使用しています。

最近では、単シナプス逆行トレースのために修飾されたRABVが開発されました。 （ 図1A）。この方法では、糖タンパク質（G）遺伝子はウイルスゲノムから削除され、標的ニューロンでのみ補給。感染特異性はASLV-糖タンパク質と正常^RABV-G1用RABV-G（/ RG）の細胞質ドメインの細胞外ドメインから成るキメラGを代入することによって達成される。このキメラGは具体的にTVAの受容体^1を発現^している細胞に感染します。をコードする遺伝子TVAはdきできます様々な方法で^2月8日 elivered。 TVA発現ニューロンのRABV-Gの感染後、RABVはTVAの受容体との共同配信された、独自のGの性質によって逆方向に他の、シナプス接続されたニューロンに信号を送ることができます。この手法は、定義されたスターター細胞型へのすべての入力のサンプリングを提供し、定義された細胞型への入力の数が比較的多い^{（5-10％）2に}ラベル^{を付けます} 。

我々は最近、経シナプストレーサー⁹としてVSVを使用するには、この手法を変更しました。 VSVのは、遺伝子発現の迅速性など、いくつかの利点があります。ここでは、詳細解像度を上げると超小型回路をプロービングするための有用なVSVを使用して、新しいウイルストレースシステムを。ウィッカーシャムらによるオリジナルの公表戦略^。4 Whileとバイエルら TVA発現細胞に感染した当初は上に任意のニューロンと、そのプロジェクトの⁹許可の標識は、ここにVSVをテレビにのみ送信するように設計されました発現細胞（ 図1B）。ウイルスは最初TVA発現ニューロンのニューロンの下流の感染を可能にするためにRABV-Gでシューされています。細胞のこの第一の集団を感染させた後、リリースされたウイルスは、TVA-発現細胞に感染することができます。経シナプスウイルスの拡散がTVA発現細胞に限られているため、定義された種類の細胞からの接続の有無の存在は、高分解能で調べることができます。これらの実験の実験のフローチャートを図2に示します。ここでは、マウス網膜で方向選択性のあること、モデル回路を示しています。我々は、網膜神経節細胞に星形アマクリン細胞（SACの）（のRGC）の接続性を検証する。