大人のラットの特定の脳領域の興奮毒性病変に対する定位手術
Summary
定位座標を使用して、興奮性毒を注入することにより、特定の脳領域の対象とアブレーション（s）は記載されています。この手法はまた、ラット脳内に他の化学物質の注入に適応することができます。
Abstract
げっ歯類及びヒトを含む哺乳動物、の多くの行動の関数は、離散的な脳の領域によって主に媒介される。動作や他の実験成果のための様々な脳領域の肥えた関数の一般的な方法は、関数の局所アブレーションを実装することです。ヒトでは、ローカライズされた脳病変を有する患者集団は、多くの場合、損傷部位の基本的な機能を明らかにすることを期待して、赤字のために研究を行っている。げっ歯類で、一つは実験的に特定の脳領域の病変を誘発することができる。
病変は、いくつかの方法で達成することができます。電解病変は、局部的な損傷を引き起こす可能性がありますが、種々の細胞型と同様に病変部位の近くに起こる他の脳領域からの横断繊維を損傷します。細胞型特異的プロモーターを用いた遺伝学的手法は、サイト固有のターゲットを有効にすることができます誘導。これらの手法は、ターゲットの脳領域に応じて複雑で、常に実用的ではありません。 Excitot定位手術を用いた有酸素病変は対照的に、地元のグリア細胞に損傷を与えたり、繊維を通過することなく、興奮性ニューロンをlesioningの中で最も信頼性の高い実用的な方法の一つである。
ここでは、興奮性毒、基底扁桃体複合体にN-メチル-D-アスパラギン酸（NMDA）、定位注入するためのプロトコルを提示します。解剖学的指標を用いて、我々はターゲットの脳領域の位置を決定し、ちょうどターゲット上記の場所に注射針を下げるために定位座標を適用します。その後、近くのニューロンの興奮毒性死、その結果、脳に我々の興奮性毒を注入する。選択した我々の実験対象はラットですが、同じ方法は、機器や座標の適切な調整を、他の哺乳動物に適用することができます。
このメソッドは、基底扁桃1-6、他の扁桃核6、7、海馬8、耳鼻咽喉科など、脳の領域の様々に使用することができますorhinal皮質9と前頭前皮質10。また、そのようなウイルスベクター1、11のような生物学的化合物を注入するために使用することができます。基本的な定位技術はまた、目的の化合物より長期の暴露を可能にする、より恒久的な浸透圧ポンプの注入に適応することができます。
Protocol
Discussion
ここで紹介する定位方法は、NMDAの注入を介して、特定の脳領域の興奮毒性病変を可能にします。基本的な定位の方法は、サイト固有の方法で薬理学的および生物学的な種々の薬剤を注入するために適応させることができます。また、脳アトラス12の彼らの定位座標で定義されている脳の領域の様々なターゲットに適合させることができます。マウスなど他の種への適応は、より小さ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、yaは博士号を取得する前のフェローシップ（EDK）、NARSAD若手研究者賞（DK）とNIMHブレインズ賞（R01MH087495）（DK）をCIRMサポートされていました。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| N-Methyl-D-aspartic Acid 98% | Fisher Scientific | AC32919-0500 | |
| Dual Lab Standard Stereotaxic w/45 deg. Ear Bars | Stoelting | 51653 | Alternative vendor: Kopf *note of caution: assure compatibility of stereotaxic accessories if purchasing from multiple vendors |
| 10μl SYR SPECIAL (*/*/*) | Hamilton | 701SN | |
| Dremel Moto-Tool | Stoelting | 58600 | Alternative vendor: Kopf |
| Carbide burs, handpiece HP, size 2 | Schein Dental | 2284578 | |
| Stoelting 6 Syringe Programmable Pump | Stoelting | 53140 | Alternative vendor: Kopf |
| Stainless Steel 316 Hypodermic Regular Wall Tubing 30 Gauge .0123″ OD x .00625″ ID x .003″ Wall (infusion needle) | Small Parts | HTXX-30R-06-05 | |
| Intramedic PE 20 tubing (infusion tubing) | VWR | 63019-025 | |
| Reflex Clips, 9mm, non-sterile | Kent Scientific Corp. | INS500346 | Alternative vendor: Fine Science Tools |
| Reflex Clip Applier for 9mm clips | Kent Scientific Corp. | 12031-09 | Alternative vendor: Fine Science Tools |
| Curved Hartman hemostat | Fine Science Tools | 13003-10 | |
| London forceps | Fine Sceince Tools | 11080-02 | |
| 2% chlorhexidine solution | Allivet | 30159 | Alternative vendor: PetSolutions |
| 10% povidone iodine solution | CVS | SKU #739575 | |
| Hot bead sterilizer | Harvard Apparatus | 610183 |
Table 1. Table of specific reagents and equipment.
References
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