Niet-invasieve beeldvorming van gedissemineerde candidiasis in de zebravis Larven

Verspreid candidiasis door het pathogeen Candida albicans een klinisch belangrijke probleem opgenomen personen en is verbonden met 30 tot 40% aan mortaliteit ^6. Systemische candidiasis wordt normaliter gestuurd door aangeboren immuniteit, en personen met genetische defecten bij aangeboren immuunresponsen cel componenten, zoals fagocytensysteem NADPH oxidase zijn vatbaarder voor candidemia ^7-9. Er is weinig bekend over de dynamiek van C. albicans interactie met aangeboren immuunsysteem cellen in vivo. Uitgebreide in-vitro studies hebben aangetoond dat buiten de gastheer C. albicans kiemt binnenzijde van macrofagen en wordt snel vernietigd door neutrofielen ^10-14. In vitro studies zijn nuttig, kan het complex niet vatten in vivo omgeving, tijdsafhankelijke dynamiek van cytokineniveaus, extracellulaire matrix bijlagen en intercellulaire contacten ^{10 omvat, 15-18} </sup>. Om sonde de bijdrage van deze factoren in gastheer-pathogeen interactie, is het essentieel om een ​​model organisme te vinden voor deze aspecten van de infectie te visualiseren niet-invasieve in een live intact host.

De zebravis larve biedt een unieke en veelzijdige gewervelde gastheer voor de studie van de infectie. Voor de eerste 30 dagen van de ontwikkeling zebravis larven hebben alleen aangeboren afweersysteem ^{2, 19-21,} de vereenvoudiging van de studie van ziekten zoals gedissemineerde candidiasis die sterk afhankelijk zijn van aangeboren immuniteit. Het kleine formaat en de transparantie van de zebravis larven kunnen beeldvorming van de infectie dynamiek op cellulair niveau voor zowel de gastheer en ziekteverwekker. Transgene larven met fluorescerende aangeboren immuunsysteem cellen kunnen worden gebruikt om bepaalde types cellen betrokken bij infectie ^22-24 identificeren. Gemodificeerde antisense oligonucleotiden (Morpholinos) kan worden gebruikt voor het neerslaan verschillende immuun componenten zoals fagocyt NADPH oxidase en bestuderen als reactie op Fungal infectie ^5. In aanvulling op de ethische en praktische voordelen van het gebruik van een kleine lagere gewervelde, de zebravis larven biedt de unieke mogelijkheid om het imago van de veldslag tussen pathogeen en gastheer zowel intravitally en in kleur.

De zebravis is gebruikt om het model-infectie voor een aantal menselijke pathogene bacteriën, en heeft bijgedragen tot de grote vooruitgang in ons begrip van mycobacteriële infectie ^{3, 25.} Echter, pas onlangs hebben veel grotere pathogenen zoals schimmels zijn gebruikt om larven te infecteren ^{5, 23, 26,} en tot op heden is er geen sprake van een gedetailleerde visuele beschrijving van de infectie methodologie. Hier presenteren we onze technieken voor achterhersenen ventrikel micro-injectie van prim ²⁵ zebravis, met inbegrip van onze wijzigingen naar de vorige protocollen. Onze bevindingen met behulp van de larven zebravis model voor een schimmelinfectie afwijken van de in vitro studies en versterken de noodzaak om de gastheer-pathogeen Intera te onderzoekenActies in de complexe omgeving van de gastheer in plaats van de vereenvoudigde regeling van de petrischaal ^5.