Rapid Point-of-Care Ensayo de la eficacia anticoagulante enoxaparina en sangre entera
Summary
Demostración de un ensayo cuantitativo rápido de la inhibición de la coagulación de la sangre por el bajo peso molecular de la heparina, enoxaparina. La contribución de la enoxaparina se evalúa mediante la eliminación de su influencia a través de la digestión con heparinasa. Una descripción más completa de la prueba se detalla en nuestro artículo publicado.<sup> 1</sup> El ensayo aún requiere la confirmación clínica.
Abstract
Existe la necesidad de un ensayo clínico para determinar la medida en que es efectivamente la sangre de un paciente anticoagulada por el bajo peso molecular de la heparina (HBPM), enoxaparina. Hay también urgentes situaciones clínicas en las que sería importante si esto podría ser determinada rápidamente. El presente ensayo está diseñado para lograr esto. Sólo se ensayaron muestras de sangre humana que fueron inoculadas con concentraciones conocidas de enoxaparina. La característica esencial del presente ensayo es la cuantificación de la eficacia de la enoxaparina en la muestra de sangre de un paciente mediante la degradación de que se complete la inactividad con heparinasa. Dos muestras de sangre fueron extraídas en tubos Vacutainer (Becton Dickenson-; Franklin Lakes, NJ) que se cargaron con enoxaparina; una muestra se digirió con heparinasa durante 5 min a 37 ° C, la otra muestra representada estado basal del paciente anticoagulada. El porcentaje de acortamiento del tiempo de coagulación en la muestra tratada con heparinasa, en comparación con la bestado aseline, cedió la contribución anticoagulante de la enoxaparina. Se utilizó el portátil, funciona con baterías Hemochron aparato 801 para la medición de los tiempos de coagulación (International Technidyne Corp., Edison, NJ). El aparato dispone de 2 termostáticas (37 ° C) pozos de tubo de ensayo. Hemos llevado a cabo ensayos en dos tipos de cartuchos de ensayo que están disponibles desde el fabricante del instrumento. Un cartucho se modificó para aumentar su sensibilidad. Hemos eliminado el caolín del cartucho FTK-ACT por extenso lavado con agua destilada, dejando sólo la superficie de vidrio del tubo, y tal vez el imán de detección, como activadores. Llamamos a este ensayo mínimamente activa nuestra (MAA). El uso de un ensayo mínimamente activa ha sido estudiado por nosotros y otros. 2-4 El segundo cartucho que se estudió era un tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT) (A104). Esto fue usado tal como se suministra por el fabricante. Los pozos termostatados del instrumento were utiliza tanto para la digestión con heparinasa y ensayos de coagulación. El ensayo puede ser completada dentro de 10 min. El ensayo MAA mostró cambios robustos en tiempo de coagulación después de la digestión con heparinasa de la enoxaparina sobre un rango de concentración clínica típica. A 0,2 UI anti-Xa de la enoxaparina por ml de muestra de sangre, la digestión con heparinasa causado una disminución media del 9,8% (20,4 seg) en el tiempo de coagulación; menos 1,0 UI por ml de enoxaparina hubo una disminución del 41,4% (148,8 seg). Este informe sólo presenta la aplicación experimental del ensayo; su valor en un entorno clínico todavía debe ser establecido.
Protocol
Representative Results
Discussion
Este ensayo de eficacia de enoxaparina puede servir como una opción importante para determinar la seguridad relativa de la realización de un procedimiento invasivo que tiene un riesgo asociado de hemorragia o el desarrollo de un hematoma. Esto sería de particular importancia cuando una inyección epidural se está considerando. La mayoría de las guías recomiendan un período de espera de 12 horas entre la inyección de enoxaparina y la iniciación de un procedimiento invasivo 5 Insuficiencia renal, la obesidad y el embarazo puede influir en los requisitos de dosificación de enoxaparina 6,7 Dado que el ensayo puede ser completado en un 10.. – min período, también podría ser usado en una clínica o consulta del médico, en el que proporcionaría información sobre la adecuación de la anticoagulación en pacientes que están en un riesgo de desarrollo de tromboembolismo venoso. Ajustes inmediatos de dosis podría ser instituido, según sea necesario.
La concentración de la enoxaparina en el plasma se puede medir por un cromogénico unssay de la extensión de la inhibición del factor de coagulación, Xa. Sin embargo, esto sólo da su concentración no, específicamente su eficacia anticoagulante, que varía ampliamente entre los pacientes individuales. 6-8
Nuestros estudios se llevaron a cabo sólo con enoxaparina. Sin embargo, se puede anticipar que el ensayo se podría aplicar a cualquier HBPM que se degrada por la heparinasa I. Esto ya es conocido por ser el caso para la dalteparina, nadroparina y tinzaparina. 9-11 Se diseñó el ensayo en relación con las características de el instrumento Hemochron tiempo de coagulación. El instrumento es relativamente barato, también, los tubos de recogida de sangre desechables, heparinasa ampollas y cartuchos de ensayo para realizar un análisis para un paciente es de aproximadamente 15 dólares. Por lo tanto, se espera que sea adecuado para controlar el estado anticoagulante en diversos escenarios clínicos.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Las investigaciones se llevaron a cabo únicamente con el apoyo de los recursos departamentales e institucionales. El aparato de la coagulación (Hemochron 801) fue cedido sin compromiso por el fabricante. Los cartuchos de ensayo fueron adquiridos en sus costos de venta. La cifra de introducción en el video fue modificado a partir de Sanderink, et al. 12 La segunda figura en el vídeo (digestión heparinasa evolución en el tiempo) se reprodujo con permiso de Inchiosa et al. 1
Materials
| Name of reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Hepzyme | Siemens | B4240 | heparinase I |
| “MAA” cartridge | Technidyne | FTK-ACT | modified by kaolin removal |
| aPTT cartridge | Technidyne | A104 |
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