Schnelle Point-of-Care-Test von Enoxaparin Gerinnungshemmer Wirksamkeit im Vollblut
Summary
Demonstration einer raschen quantitativen Assay der Hemmung der Blutgerinnung durch den niedrigen Molekulargewicht-Heparin, Enoxaparin. Der Beitrag von Enoxaparin durch Entfernen seinen Einfluss durch Verdauung mit Heparinase beurteilt. Eine umfassendere Beschreibung des Tests wird in unserer veröffentlichten Papier detailliert.<sup> 1</sup> Der Test erfordert noch klinische Bestätigung.
Abstract
Es besteht das Bedürfnis nach einem klinischen Assay, um den Umfang, in dem Blut eines Patienten wirksam von der niedrigen Molekulargewicht-Heparin (LMWH), Enoxaparin ist antikoaguliert bestimmen. Es gibt auch dringende klinischen Situationen, wo es wichtig sein würde, wenn diese schnell ermittelt werden konnte. Der vorliegende Assay wurde entwickelt, um dies zu erreichen. Wir nur getestet menschlichen Blutproben, die mit bekannten Konzentrationen von Enoxaparin versetzt wurden. Das wesentliche Merkmal des vorliegenden Tests ist die Quantifizierung der Wirksamkeit von Enoxaparin in einer Blutprobe des Patienten durch Abbau von Inaktivität es mit Heparinase abzuschließen. Die mit Enoxaparin versetzt wurden; zwei Blutproben in Vacutainer-Röhrchen (Franklin Lakes, NJ Becton-Dickenson); gezogen wurden eine Probe wurde mit Heparinase für 5 min bei 37 ° C verdaut, repräsentiert die andere Probe des Patienten Basislinie antikoaguliertem Status. Die prozentuale Verkürzung der Gerinnungszeit in der Heparinase-behandelten Probe, wie zum Vergleich baseline Staat, ergab die gerinnungshemmende Beitrag von Enoxaparin. Wir verwendeten die tragbare, batteriebetriebene Hemochron 801 Vorrichtung zur Messung von Gerinnungszeiten (International Corp Technidyne, Edison, NJ). Die Vorrichtung hat zwei thermostatisch gesteuerten (37 ° C) Assay Rohrbrunnen. Wir haben die Assays in zwei Arten von Kassetten, die Assay beim Hersteller des Gerätes sind. Eine Patrone wurde modifiziert, um die Empfindlichkeit zu erhöhen. Wir entfernten das Kaolin aus der FTK-ACT Kartusche durch umfangreiche Spülen mit destilliertem Wasser, so dass nur die Glasoberfläche des Rohres, und vielleicht die Detektion Magneten als Aktivatoren. Wir nannten diese unsere minimal aktiviert Assay (MAA). Die Verwendung eines minimal aktiviert Assay wurde von uns und anderen untersucht. 2-4 Die zweite Patrone, die untersucht wurde eine aktivierte partielle Thromboplastinzeit (aPTT) Assay (A104). Dies wurde als geliefert vom Hersteller verwendet. Die thermostatisiert Brunnen des Instruments werE für sowohl die Heparinase Verdauung und Koagulation Assays verwendet. Der Assay kann innerhalb von 10 min abgeschlossen. Der MAA-Assay zeigte robuste Veränderungen Gerinnungszeit nach Heparinase Verdauung von Enoxaparin über einen typischen klinischen Konzentrationsbereich. Mit 0,2 Anti-Xa IU pro ml Enoxaparin Blutprobe, verursacht Heparinase Verdauung eine mittlere Abnahme von 9,8% (20,4 sec) in Gerinnungszeit; bei 1,0 IU pro ml Enoxaparin gab es eine 41,4% ige Abnahme (148,8 sec). Dieser Bericht nur präsentiert die experimentelle Anwendung des Assays, dessen Wert in einem klinischen Umfeld muss noch eingerichtet werden.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dieser Assay von Enoxaparin Wirksamkeit kann als eine wichtige Option, um die relative Sicherheit der Durchführung einer invasiven Prozedur, die eine Begleitperson Blutungsrisiko oder Entwicklung eines Hämatoms ist festzustellen, dienen. Dies wäre besonders wichtig sein, wenn ein Epiduralinjektion erwogen wird. Die Mehrheit der Leitlinien empfehlen eine Wartezeit von 12 Stunden zwischen Injektion von Enoxaparin und Einleitung einer invasiven Verfahren fünf Nierenfunktion, Adipositas und Schwangerschaft kann die Dosierung Anforderungen der Enoxaparin beeinflussen 6,7 Da der Test innerhalb von 10 abgeschlossen werden kann.. – min Zeit, es könnte auch in einer Klinik oder Arztpraxis, wo sie Informationen über die Angemessenheit der Antikoagulation bei Patienten, bei denen ein Risiko der Entwicklung von venösen Thromboembolien sind bieten würde verwendet werden. Sofortige Dosisanpassung könnte eingeleitet werden, je nach Bedarf.
Die Enoxaparin-Konzentration im Plasma kann durch einen chromogenen einem gemessen werdenssay des Ausmaßes der Hemmung des Koagulationsfaktor, Xa. Allerdings ergibt dies nur seine Konzentration, die nicht speziell ihre gerinnungshemmende Wirkung, die weit variiert zwischen den einzelnen Patienten. 6-8
Unsere Untersuchungen wurden nur mit Enoxaparin durchgeführt. Es kann jedoch davon ausgegangen, dass der Assay irgendeinem NMH, die abgebaut Heparinase I. Dieses ist bereits bekannt, der Fall für Dalteparin, Nadroparin und Tinzaparin sein soll angewandt werden könnte. 9-11 Wir haben das Assay in Bezug auf die Merkmale Das HEMOCHRON Gerinnungszeit Instrument. Das Instrument ist relativ kostengünstig, auch die Einweg-Blutentnahmeröhrchen, Heparinase Ampulle, und Assay-Patronen, eine Analyse für einen Patienten ist etwa 15 $ abzuschließen. Somit wäre es zu erwarten, dass geeignet ist, den Status Antikoagulans in verschiedenen klinischen Situationen zu überwachen.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die Untersuchungen wurden ausschließlich mit Unterstützung von Abteilungs-und institutionellen Ressourcen durchgeführt. Die Koagulation Apparat (Hemochron 801) wurde unverbindlich vom Hersteller ausgeliehen. Die Assay-Patronen wurden bei ihren Privatkunden die Kosten gekauft. Der einleitende Figur in dem Video wurde von Sanderink, et al geändert. 12 Die zweite Zahl in dem Video (Heparinase Aufschlusszeit natürlich) mit freundlicher Genehmigung von Inchiosa et al reproduziert wurde. 1
Materials
| Name of reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Hepzyme | Siemens | B4240 | heparinase I |
| “MAA” cartridge | Technidyne | FTK-ACT | modified by kaolin removal |
| aPTT cartridge | Technidyne | A104 |
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