Corneal Spendergewebe Vorbereitung für Endothelial Keratoplasty

1. Setup: aseptische Arbeitsweise 11 Schalten Sie Laminar Flow Hood (LFH). Schalten Sie das Stickstoffgas Steuereinheit. Stellen Sie sicher, dass Schlauch wird zwischen Konsole und Stickstoff-Tank-Einheit verbunden. Schalten Sie auf Gas. Gas-Einstellung sollte auf 50-60 PSI am Tank Regler eingestellt werden. Turbine Druck auf die Einheit lesen sollten 3,3 bis 3,4 Bar. Drücken Sie auf die Schaltfläche Test. Luftdruck wird in den 700er und Pumpen 1 und 2 lesen sollte unter 200. Das Gerät piept, wenn die Tests abgeschlossen sind. Don Maske mit Augenschutz, soweit anwendbar, und die Kappe. Hände waschen und Don nicht-sterile Handschuhe. Legen Sie sterile Sets innerhalb LFH und offene Packungen zu sterilen Bereich zu etablieren. Legen Sie eine sterile Medizin Tasse und einem sterilen Kunststoff-Becken mit steriler Gaze neben dem etablierten sterilen Bereich. Gießen Sie sterile Isopropylalkohol in die Medizin-Cup. Wischen Pachymetrie Sonde mit Alkoholtupfer / Pad und Sonde, nach unten, in die Medizin Tasse kippen. Die Sondenspitze sollte in Isopropylalkohol für 10 m einweicheninuten. Nach Pachymetrie Sonde für 10 Minuten eingeweicht hat, spülen Sie die Sondenspitze mit sterilem Wasser aus der Fertigspritze zu Alkohol-und Platz-Sonde in der Kunststoff-Becken zu entfernen. Unter aseptischen Bedingungen öffnen und fallen lassen sterile Gegenstände (Messer, sterile Handschuhe, und der Hornhaut Betrachten Kammern) auf sterilen Bereich sofern nicht bereits Teil der vorgefertigten Packung. Erhalten Hornhautgewebe in Medien und Erhaltung Ort innerhalb LFH (Abbildung 2). Öffnen Sie Durchstechflasche (n) und entsorgen Sie den Deckel (s) in einen geeigneten Behälter Biohazard. Entsorgen Sie nicht sterile Handschuhe. Don sterile Handschuhe. Platzieren Sie vorverpackte Plastikschüssel auf der Seite des Feldes, wo Pachymeter befindet. Schließen Sie Infusionsleitung an Hahn und Platz Spike Ende der Infusion Linie außerhalb der Haube die Sicherung der Linie in einer Weise, die Linie außerhalb der Haube verhindern, dass Sie wieder ins Kapuze und Berühren des sterilen Feldes. Führen Hornhautgewebe Transfer. Vorsichtig gießen Sie das Gewebe und Medium, in einer Si-NGLE Bewegung, aus der vorhandenen Fläschchen in eine sterile Kammer Anzeige. Achten Sie darauf, um die endotheliale Seite mithalten. Setzen Sie die Kappe auf der Kammer. Halten Kammern, die Gewebe und Medien auf sterilen Bereich. Entfernen Fläschchen (e) von LFH. Entfernen und entsorgen Sie sterile Handschuhe. Spike ausgewogene Salzlösung (BSS) Flasche mit Infusionsleitung. Hängen Flasche steril BSS etwa vier Fuß vom Arbeitsbereich Oberfläche. Öffnen Sie zwei Paar sterile Handschuhe und sterile Kittel mit Handtuch. Führen Sie 6 Minuten chirurgische Macchia und trockene Hände. Setzen Sie auf sterilen Kittel, dann werden beide Paar sterile Handschuhe. Öffnen Instrument Boxen und Ort die Inhalte auf den sterilen Bereich. Dispense 10-20 ccm BSS-Lösung in Metall-Becken oder Medizin Tasse. Füllen sterilen Pipette mit BSS-Lösung. Schließen Sie Hahn und Infusionsleitung an Infusionsanschluss der Vorderkammer und bündig mit BSS, so dass eine kleine Menge sichtbar oben auf dem Kolben ist. Position künstliche Kammer in LFH aufTop of Mull. Der untere Kolben durch Drehen Graft-Dichtring gegen den Uhrzeigersinn. 2. Verfahren Mit einer Pinzette vorsichtig fassen Hornhaut durch Sklerarand. Öffnen Sie zum Hahn-System mit BSS spülen, während sorgfältig Zentrierung Hornhaut auf der Oberseite des Kolbens mit der endothelialen Seite nach unten. Wenn sich Blasen unter der Hornhaut sichtbar sind, die Infusion mit BSS und leichtes Verschieben der Hornhaut zu entfernen. Unterbrechen Infusion einmal Luftblasen entfernt sind. Stellen Sie sicher, dass die Hornhaut auf den Kolben (3a) zentriert ist. Position Vorderkammer Abdeckung auf Basis Sicherungsring so dass die Laschen der Abdeckung passen in die Freiflächen an der Basis. Verriegeln Sie decken in den Sockel durch Drehen im Uhrzeigersinn Abdeckung 15 °. Raise Kolben nach oben und ziehen Sie vollständig (Abbildung 3b). Mit einem sterilen behandschuhten Finger berühren oben Hornhaut um sicherzustellen, dass ausreichender Druck vorhanden ist, um den Vorgang durchzuführen. Prüfen Sie, indem Sie Pachymetrie Sonde auf der Oberfläche of Hornhaut an Dicke Ablesung zu erhalten (Abbildung 4). Die Standardabweichung muss kleiner als 10 ist. Wenn nicht, wiederholen die Messung. Mit dem sterilen Handschuhen, die nicht verwendet wurde, um die Pachymetrie durchführen, vorbei an der Turbine Schlauch an die Hand, die Pachymetrie durchgeführt und schrauben Sie die Turbine Schlauch in die Steuereinheit. Haben Sie die Unterstützung Techniker Rekord Pachymetrie Lesen. Kontaminierte Handschuhe. Mit einer sterilen Markierstift, ziehe eine Linie von 4mm Limbus in Richtung Zentrum der Hornhaut (oder markieren Sie nicht, wenn Chirurgen lieber keine Markierung). Mit der bereitgestellten Pipette fünf Tropfen der BSS auf der Hornhaut zu platzieren. Sofern nicht besondere Anweisungen durch den Chirurgen erbracht werden, werden die 300 um Schneidkopf verwendet, wenn der Zuschnitt Pachymetrie Messung ist weniger als 600 um betragen. Wenn mehr als 600 um, wird der 350 um Schneidkopf eingesetzt werden. Mit Gewinde zugewandt Sie und Zahl nach oben, laden Klinge in die rechte Seite des Kopfes Mikrokeratom, spitzen Ende zuerst, die Vermeidung von Kontakt with der Klinge. Halten Sie den Kopf auf jeder Seite, schrauben Sie den Kopf auf die Turbine. Ziehen Sie die künstliche Kammer mit den Fingern. Schrauben Sie auf Turbine Turbine Schlauch. Testen Sie die Klinge Schwingung durch Drücken der Vakuum-Pedal einmal, Eintauchen der Schneidkopf in sterilem Wasser und Impuls die Turbine für 5 Sekunden. Ziehen Kolben. Ort Mikrokeratom auf den Sockel mit Aufbaupfosten und Position um fünf Uhr. Drücken und halten Turbine Blade Pedal zu (Abbildung 5a) oszillieren. Mit Zeigefinger und Daumen halten Mikrokeratom auf halbem Weg zwischen der Basis und der Spitze der Turbine. Drehen Sie am Handgelenk, um einen reibungslosen, selbst durch und über die Hornhaut geschnitten zu machen. Release-Turbine treten und heben Mikrokeratom Anhieb Einheit. Drücken Sie Vakuum-Pedal zum Ausschalten Vakuum (Abbildung 5b). Don eine sterile Handschuhe und überprüfen Sie noch einmal nach Hornhaut-Pachymetrie Lesen Kappe wird erreicht, indem Sonde auf Hornhautoberfläche zu zweiten Dicke Lektüre sein zu erhalten entferntbewusst, dass das Gewebe sehr dünn und leicht beschädigt ist. Verunreinigte Handschuhe. Viel Unterstützung techniker Rekord Pachymetrie zweiten Lesung. Mit einer sterilen Markierstift, setzen Sie ein Zeichen auf Wunsch von Chirurgen, auf der Mitte der peripheren Rand der Rest Stromabett in der künstlichen Kammer. Geben Sie einige Tropfen von steriler BSS auf Rest-Stroma-Bett. Entfernen Sie die vordere Kappe von der Hornhaut Mikrokeratom (Abbildung 6) und ersetzen Sie es auf die Hornhaut vor dem Entfernen von Hornhaut künstlichen Vorderkammer. Cap sollte auf der Hornhaut zentriert werden mittels peripherer Kennzeichnung an die Kappe richtig ggf. ausrichten. Verwenden Sie Tupfer Speer sanft positionieren Sie die Kappe auf der Hornhaut. Verwenden Sie frische Speer, jede BSS unter vordere Kappe zu absorbieren. Absperrhahn öffnen, drehen Kammer Upside-Down-und untere Kolben langsam genug, um eine Verformung zu verhindern Hornhaut. Schalte Basis und ermöglichen dem Druck der BSS-Flow, um die künstliche Kammer-Becher von der Basis zu schieben. Mit Zange, ziehen eint die Cornea-Rand an 9, 12 und 3 Uhr-Position, um es von der Schale zu lösen. Einmal gelöst, verwenden Pinzette an der 12-Uhr-Position, um Hornhaut zu entfernen. Legen Sie die Hornhaut in der Anzeigen-Kammer-, Endothel-Seite nach oben (Abbildung 7). Setzen Sie den Deckel nach Betrachtungswinkel Kammer. Entfernen Sie sterile Handschuhe. Ziehen Sie Sichtkammer Deckel. Führen Sie die nach-cut Spaltlampe Auswertung und spiegelnde Mikroskopie der Hornhaut und der Rekord Erkenntnisse. Ort Kammer (n) in entsprechenden Abschnitt des Kühlschranks. Verpackung für den Transport zum Arzt (Abbildung 8). 3. Repräsentative Ergebnisse Richtiger mechanischen Mikrokeratom Dissektion der Spender-Hornhaut führt zu glatten, gleichmäßigen Lamellen der Hornhaut Spendergewebe. Dies wird durch eine optische Kohärenztomographie (OCT) Bild der Hornhaut im Querschnitt (9) gezeigt. Die endgültige hinteren Hornhautgewebe sollten ausreichend dick sein, wie durch pachymet gemessenry. Im Laufe der letzten 6 Monate an der Michigan Eye Bank, betrug die mittlere Pre-Processing Hornhautdicke 558 Mikron und Post-Processing Dicke der posterioren Hornhaut betrug 158 Mikron. Siebenundachtzig Prozent der Mikrokeratom-seziert Spendergewebe zwischen 100-200 Mikrometer, 10,9% gemessen> 200 Mikrometer und 2,1% gemessen <100 Mikrometer gemessen. Der hintere Hornhautgewebe muss beibehalten hohe Endothelzelldichte (ECD) zur Verbesserung der endothelialen Funktion, um das Transplantat Empfänger liefern. Specular-Mikroskopie wird verwendet, um ECD zu messen. In den letzten 6 Monaten hatten alle das Hornhautgewebe als förderfähig für endothelialen Keratoplastik von der Michigan-Eye Bank eine ECD von> 2200 Zellen / mm 2. Neunundneunzig Prozent der vorgeschnittenen DSAEK Gewebe hatte ein Post-Processing ECD> 2400 Zellen / mm 2, und 19% hatten eine ECD> 3000 Zellen / mm 2. Die mittlere Veränderung in der Vor-bis Post-Processing ECD war mit 1,2% (p = 0,0003, gepaarter zweiseitiger t-Test) zu vernachlässigen.Komplikationen, die während des Eingriffs auftreten können, gehören der Verlust von Druck, asymmetrische Dissektion, und der wesentlichen Gewebe Einbuchtung (resultierend in Hornhautendothelzellzahlbestimmung Verlust). Unsachgemäße Dissektion kann auch im Gewebe Perforation führen. 1. Gesamtsystem der Hornhautgewebe Vorbereitung Endothelial Keratoplasty 1a bis 1e sind Querschnittsansichten Darstellungen der Spender-Hornhaut Herstellung. Figuren 1f bis 1i sind Querschnittsansichten Darstellungen des Transplantat-Empfängers der Hornhaut während DSAEK Chirurgie. Die Spender-Hornhaut wird auf einer künstlichen Vorderkammer montiert und seziert mit dem Mikrokeratom Kopf. Nach Gewebedissektion, sind die beiden Lamellen getrennt, aber die vordere Lamelle (GAP) wird wieder auf die Hornhaut blieb Bett für den Transport zum Arzt positioniert. ImOP, verwendet der Chirurg einen Trepan, um die zentrale Hornhaut senkrecht durchschneiden beide vorderen und hinteren Lamelle. Nach dem Trepan Schnitt wird die periphere Spenderhornhaut vom Spielfeld entfernt. Die hintere Lamelle vorsichtig aus dem vorderen Lamelle mit einem Spatel entfernt. Der Spender hinteren Lamelle (DSAEK Gewebe) ersetzt den erkrankten Abschnitt des Empfängers Hornhaut (1i). Der Patient hat einen kranken posterioren Hornhaut entfernt werden soll. Die erkrankten hinteren Hornhaut wird mit einer intraokularen Instrument (Reverse Sinsky Haken) in einem großen Kreis mit einem Durchmesser erzielt. Nach der Wertung des erkrankten Hornhaut, wird die Cornea-Membran entfernt. Der Spender hinteren Lamelle (DSAEK Gewebe) wird für den Empfänger ein Auge platziert. Abbildung 2. Hornhautgewebe in Media. Hornhautgewebe ist in Konservierungsmedien nach harvesting vom Spender. Abbildung 3. Hornhautgewebe auf künstliche Vorderkammer. Hornhautgewebe wird auf die künstliche Vorderkammer vor Basis Sicherungsring oder Gewebedissektion montiert. Hornhautgewebe wird auf künstliche Vorderkammer mit Sockel Klemmring über das Gewebe versiegelt montiert. Abbildung 4. Hornhautgewebe Dicke Prüfen. Die Hornhautdicke mittels Ultraschall überprüft wird Pachymetrie Sonde auf der Oberfläche der Hornhaut. Abbildung 5. Hornhautgewebe Dissection. Mikrokeratom Klinge ist an der Basis mit Montage-und post-Position um fünf Uhr gestellt. Mikrokeratomwird durch Hornhaut geleitet, um das lamellare Dissektion zu machen. Abbildung 6. Anterior Cap, der Hornhaut nach der Sektion. Der vordere Hornhaut Kappe ist nach dem Mikrokeratom Sezieren frei ist abgeschlossen. Abbildung 7. Seziert Hornhaut in Sichtkammer. Nach Präparation abgeschlossen ist, wird die Hornhaut an den Sichtkammer für den Transport wird zurückgegeben. 8. Hornhaut in Verpackungen für den Transport. Die Hornhaut in der Anzeigen-Kammer wird dann sicher für den Transport zum Arzt verpackt. Abbildung 9. Oktober Aussehen der Cornea. Der Oktober von derendgültige seziert Hornhaut (im Querschnitt) zeigt, dass die Hornhaut in zwei Hälften geteilt wird. Die Schnittstelle ist stärker reflektiert als das umgebende Gewebe, wie durch den Pfeil angedeutet.