Dissecção da utrículo rato adulto e adenovírus Infecção mediada por células Coadjuvante

A perda de audição e distúrbios de equilíbrio são frequentemente causada pela morte das células ciliadas mecanosensorial, que são as células receptoras do ouvido interno. Uma vez que não há nenhuma linha de células que satisfatoriamente representa células capilares dos mamíferos, a investigação sobre as células ciliadas depende culturas de órgãos principais. A melhor caracterizados in vitro sistema modelo de células maduras de cabelo de mamíferos utiliza culturas de órgãos de utrículos de ratinhos adultos (Figura 1) ^1-6. O utrículo é um órgão vestibular, e as células ciliadas do utrículo são semelhantes em estrutura e função das células ciliadas no órgão auditivo, o órgão de Corti. O adulto preparação utrículo rato representa um epitélio maduro sensorial para os estudos dos sinais moleculares que regulam a sobrevivência, a homeostase e morte dessas células.

Mamífero células ciliadas são terminalmente diferenciadas e não são regenerados, quando são perdidos. Em não-mamvertebrados do Mali, auditivas ou morte celular vestibular cabelo é seguido por regeneração robusta que restaura a audição e equilíbrio funções ^{7, 8.} Regeneração de células ciliadas é mediada por células gliais-like células de suporte, que contactam com as superfícies basolateral de células ciliadas no epitélio sensorial ^{9, 10.} Células de suporte são também mediadores importantes da sobrevivência de células ciliadas e morte ^11. Recentemente, desenvolveu uma técnica para a infecção de células de suporte em utrículos cultivadas utilizando adenovírus. Usando o adenovírus tipo 5 (dE1/E3) para entregar um transgene contendo GFP sob o controlo do promotor de CMV, descobrimos que o adenovírus especificamente e de forma eficiente infecta células de suporte. Suportando eficiência de infecção de células é de aproximadamente 25-50%, e as células do cabelo não estão infectadas (Figura 2). Importante, descobrimos que a infecção adenoviral de células de suporte não resultar em toxicidade para as células ciliadas ou células de suporte, tal como as contagens de células em Ad-GFP infutrículos ected são equivalentes aos da não-infectadas utrículos (Figura 3). Assim adenovírus mediada por expressão gênica em células de suporte de utrículos cultura fornece uma ferramenta poderosa para estudar os papéis de células de suporte, como mediadores da sobrevivência das células ciliadas, morte e regeneração.