1. Hayvanlar Sonuçlar, aşağıdaki rapor için, üç, dört fare C57BL/6J B6.V-Lep ob / J fareleri Jackson Laboratories (Bar Harbor, Ana, USA) elde edildi. B6.V-Lep ob / J farelerde obezite erken modellerinden birini temsil eden ve aktif araştırılmış kalır. B6.V-Lep ob / J fareler artmış adiposit büyüklüğü ve sayısı ile karakterize bir fenotip sergilemek ve yabani tip farelere oranla üç kat daha fazla ağırlığa ulaşabilen. Burada 7,8, B6.V-Lep ob / J farelerde olumlu olarak istihdam edildi BT bazlı yağ içeriği ölçümleri için Albira BT sisteminin uygulanabilirliğini göstermek için bir obez fenotip için kontrolü. Hayvanların yaklaşık 12 haftalık ulaştığında görüntüleme yapıldı. (B6.V-Lep ob / J farelerde Obezite tezahür yaş 4 hafta sonra) olduğunu. Fareler Isofluorane (% 2.5 akış hızı) ile anestezi uygulandı ve görüntüleme için bir burun konisi kurulumu ile% 2.5 altında tutulmaktadır. Birimals Albira görüntü istasyonu ile birlikte verilen standart sıçan yatak (M2M Imaging Inc Cleveland, OH) eğilimli yerleştirilmiştir. Uzuvlar düzgün bir BT edinimi için gövde yanal yerleştirilmiştir. Görüntü alımı tamamlandıktan sonra, farelerin burun konisi kaldırılır ve ayaktan kadar bir kurtarma kafesine geri döndü. 2. Görüntü Alma ve İmar Görüntü satın Albira BT sistemi (Carestream Moleküler Görüntüleme, Woodbridge, CT) kullanılarak yapılmaktadır. Fareler Isofluorane (% 2.5 akış hızı) ile anestezi uygulandı ve görüntüleme için bir burun konisi kurulumu ile% 2.5 altında tutulmaktadır. Devralmalar 600 projeksiyonları kullanılarak, 115 mm uzunluğunda bir yatağa tarama yapıldı. X-ışını kaynağı 200 uA ve 45 kVp geriliminin bir akım ayarlanır ve sertleşmesine ışını bir 0.5 mm Al filtre kullanıldı. BT ayarları için yaklaşık radyasyon derin doz eşdeğeri 220 mSv idi ve sığ doz eşdeğeri 357,4 mSv idi. Budozda 20 kat rapor daha düşük LD50 değerlerine bitti. 9 Görüntüler "Standart" parametreleri kullanarak Albira Suite 5.0 Reconstructor üzerinden FBP (Filtreli Arka Projeksiyon) algoritması kullanılarak yeniden inşa edilir. Bu kombine satın alma ve yeniden yapılanma ayarları, 125 mikron izotropik vokseller ile nihai bir görüntü elde Bütün hayvanlar analiz için yeterli sayılır. Detaylı bölgeye özgü analizi için, 35 mikron izotropik vokseller ile rekonstrüksiyon 90 mikron nihai bir çözüm için seçilebilir. 3. Image Analysis Görüntü analizi PMOD (PMOD Teknolojileri LTD, Zürih, İsviçre) analiz yazılımı kullanılarak yapılır. Görüntüler toplam hacim yoğunluk-ilk doku ve yağ hacmine göre PMOD bölümlenmiş vardır. 3.1 Görüntüler hesaplama taleplerini en aza indirmek için analiz için azalabilir. Azaltmak için, ana Görünüm sekmesine gidin. </li> Araçlar> azaltın. 2 2, 2 Y X seçeneğini seçin, ve Z. Değiştirin kontrol edin. Çalıştır'ı seçin. Mesaj: azaltma tamamlandıktan sonra ekranlarda "kutusunu değişecek Sınırlayıcı". 3.2 Görüntüler sonraki hacim-of-ilgi (VOI) analizi için yatak ve burun konisi unsurları ortadan kaldırmak için kamufle edilebilir. Maskelemek için, Düzlemler gidin, Düzenler, Dönmeler, Ayna, 3D İşaretçiler> Uçaklar ve Düzenleri. Göster uçağı Z seçin. Z düzleminde burun konisi gidin. Ana VOI sekmesini seçin> vertices çizin. Hayvan etrafında faiz getirisi (ROI) bir bölge çiz burun hariç yatak ve burun konisi. SeçmekGerçek ROI kopyalayın. Sonraki dilim taşıyın ve burun ilgili uçakları ile tampon ROI yapıştırın. Gerekirse İB'leri ayarlamak için Edit Tepe Grubu kullanın. Burun konileri ötesinde ilk uçakları ROI Sil'i seçin. Burun konileri ötesinde ilk uçakları hayvan çevresi (hayvan yatağı hariç) kapsayacak şekilde yeni bir VOI oluşturun. VOI Araçlar> Maskeleme & Cebir gidin. Sağlanan diyalog kutusunda -1000 girin. Seçilen VOIs düğmesi dışında Maske voksellerden seçin. Iletisi: ". Irreversible veri işlem Devam etmek istiyor musunuz?" görüntülenir. Evet seçeneğini seçin. Düzlemler gidin, Düzenler, Dönmeler, Ayna, 3D İşaretçiler> Uçaklar & Layçıkışları. Tüm uçak göster seçeneğini seçin. Bütünlüğü için VOI inceleyin. Kaydet seçeneğini seçin. Çözümle olarak kaydet. Dosya adı öneki değiştirin. 3.3 Birinci segment toplam hayvan birimi için resim: Araçlar> Dış seçin. Segmentasyon onay kutusunu işaretleyin. -300 Ila 3500 (abdominal yağ-bölge yoğunluk aralığında elde edilen yoğunluk aralığı referans) bir dizi girin. Segmentasyon Çalıştır'ı seçin. Segmentasyon bütünlüğünü inceleyin. Tamam seçeneğini seçin. ROI Kaldır 'ı seçin. VOI istatistikleri seçin. Dolaylı istatistikleri toplam hacmi temsil eder. Bildirilen ses kaydedin. </li> 3.4 Sonraki segment yağ hacmi için görüntü: Yağ hacimli segmentasyon için olmayan parçalı maskeli Resme geri dön. Maskeli kaydedilen veri dosyasını yüklemek için) Yük penceresinde Çözümle kutusunu işaretleyin. Araçlar> Dış seçin. Segmentasyon onay kutusunu işaretleyin. -50 -200 Bir dizi girin. Segmentasyon Çalıştır'ı seçin. Segmentasyon bütünlüğünü inceleyin. Tamam seçeneğini seçin. VOI istatistikleri seçin. Rapor istatistikleri yağ hacmi temsil eder. Bildirilen ses kaydedin. Kaydet seçeneğini seçin. Çözümle olarak kaydet. Dosya adı öneki değiştirin. <sTrong> İsteğe Bağlı: cilt / periferik yoğunluğu kalırsa, aşağıda "Erozyon ve dilatasyon" protokol VOI analiz için bu bölgelerde ortadan kaldırmak için yapılabilir. Araçlar> Dış seçin. Morfolojik onay kutusunu işaretleyin. Morfolojik görünümü görüntülenir. Erozyon seçin. Tamam seçeneğini seçin. Araçlar> Dış seçin. Morfolojik onay kutusunu işaretleyin. Morfolojik görünümü görüntülenir. Genleşme seçin. Tamam seçeneğini seçin. 4. CT Görüntüler Görselleştirme 4.1 VolView v3.2 (Kitware, Clifton Park, NY, ABD) segmente görüntülerin 3D render görsel ekranlar oluşturmak için kullanılmıştır. <li> biçiminde analiz belirlenen CT verilerini açın. Pop-up pencerede varsayılan ayarları kullanın. Eklentileri menüsünü açın. Programı altında, birimleri birleştirme seçin. Birleştir Bileşenleri işaretini kaldırın. İkinci Giriş Ata'yı tıklatın. İkinci giriş için bölütlü yağ veri seçin. Pop-up pencerede varsayılan ayarları kullanın. Plug-in Uygula'yı tıklatın. Konu bir fare büyük görmek için çift tıklayın Cilt görünümü penceresi. Renk / Opacity sekmesini 4.2 dön. Bileşeni açılan kutudan düzenlenmekte olduğunu hangi veri seti anlamına gelir. İki sürgü sekmesinin altında bulunan ve değerleri 0 ile 1 kullanarak, yerleşim içinde yer alan her bir bileşenin veri göreceli parlaklığı belirler. Bileşeni 1, th içine CT, bir renk düzeni gri kullanmayı tercih eder. Rengini değiştirmek için: Skaler Renk eşleme bölümü, renk sürgüleri birini çift tıklatın. Bir kaydırma kaldırmak için, kutunun dışına sürükleyin. Yeni bir sürgü eklemek için kaydırıcıyı alanı içinde herhangi bir yeri tıklatın. Sürgülerden birini çıkarın. Sol renk sürgüsünü siyah (skalar değer (S) = -19.000) olun. Doğru renk sürgüsünü beyaz ((S) = 15000) olun. Skaler Saydamlık haritalama kutusunda, kutusunu tıklatarak Yeni bir nokta oluşturmak. Bu pencere üç noktadan toplam verecektir. Orta noktası için ~ -3000 için (S) olarak değiştirin ve Opacity (O) değeri 0. Pencerenin sağ üçüncü noktasını seçin. Yaklaşık 32000 (S) değiştirin ve <stron.25 g> Ç. Birinci nokta, solda her yerde Opacity değerini 0 olarak ayarlanır kadar uzun olabilir. Yağ görünümünü düzenlemek gerekir bileşeni iki, değiştirin. Çift tıklayarak ve yanlış-renk haritası kırmızı yağ sola (H) kaydırıcıyı Hue kaydırarak kırmızı renk sürgüleri her değiştirin. Başka çok az yağ görünümünü ayarlamak için gerekli olmalıdır. CT, yağ ve bindirme gösteren üç panelli rotasyon film oluşturmak için 4.3: Size bakacak şekilde arka dik konuma konu fare tıklayın ve sürükleyin. Komponent Ağırlıkları altında, iki 0 sadece BT gösterilecek Bileşen değerini ayarlayın. İnceleme> Kamera tıklayın. Çerçeveler fo bir dizi seçmekr rotasyon film (mevcut durum için, biz "36" seçti). 360 derece dönme X değerini değiştirin. Oluştur'u seçin. Pop-up iletişim kutusunda, CT adlı yeni bir klasör oluşturun ve dönme görüntüleri bir dizi çıktı, hangi tiff formatında kaydedin. Tek tek klasör içine, her zaman bunların tasarrufu, bu yağ görüntü için adım yanı sıra, üste konan yağ / CT görüntü için tekrarlanır. 4.4 ImageJ v 1.43u VolView çıkış görüntüleri kullanarak bir dönme film dosyası oluşturmak için kullanılmıştır. ImageJ, Dosya> İçe Aktar> Görüntü Sırası seçin. BT klasöründe ilk görüntü seçin. Yazılım otomatik olarak diğer dosyaları tespit etmek ve bir yığın olarak açılacaktır. Yağ ve bindirme dizileri açmak için tekrarlayın. Çözümle altında ROI yöneticisini açın> Araçlar> ROIYöneticisi. Gereksiz arka plan pikseller hariç tabi fare etrafında bir ROI çizin. ROI yöneticisi olarak, ROI eklemek için Ekle öğesini tıklatın. Farklı bir görüntü dizisi seçin. ROI yöneticisi, resim uygulamak için ROI tıklayın. Bu şekilde, kırpılan yığınlarının her mükemmel bir maç olacak. ROI tüm yığınları üzerinde olduğunda, ROI içinde sağ tıklayın. Çoğalt'ı seçin. Resmin geri kalanından ayırmak için ROI Yinelenen Yığın Kutusu seçin. Büyük resim yığınlarının kapatın. Her üç görüntü dizileri için bu yordamı yineleyin. Mesajı Image> Yığınlar> Araçlar> birlikte yığınları birleştirmek için birleştirin. Stack 1 BT seçin. Stack 2 Fat seçin. <li > Yineleyin ve Stack 1 ve Stack 2 Overlay için kombine Yığınları seçin. Resim penceresinin sol alt köşesinde Oyun seçerek önizleme olabilir üç panel, görüntü döndürme yığını şimdi var. AVI olarak film kaydetmek için Dosya> Farklı kaydet …> AVI … Kaydet'i tıklayın. 5.. Temsilcisi Sonuçlar Üç WT (C57BL/6J) fareler ve dört obez (B6.V-Lep ob / J) fareler için Sonuçları Albira BT sistemi kullanan yağ / toplam hacim oranı ölçümleri bir temsilcisi burada örnek olarak bildirilmiştir. Aşağıdaki Şekil 1, bir temsilci sağlar obez farelerin BT görüntülerinin segmentasyon (yani toplam hacim ve yağ hacmi) için VolView v3.2 ile oluşturulan Gösterilebilecek. 0/3680fig1.jpg "/> Şekil 1.. Temsilcisi CT yağ için parçalı görüntüler. Gri tonlamalı (A) Obez fare (B6.V-Lep ob / J) BT toplam hacmi, kırmızı (B) yağ hacmi, ve (C) görüntü birleştirme. Gri tonlamalı (D) WT fare (C57BL/6J) BT toplam hacmi, kırmızı (E) yağ hacmi, ve (F) görüntü birleştirme. Toplam hacmi, yağ hacimleri ve hesaplanan yağ / toplam hacim oranları, her WT fare ve her obez fare için Tablo 1'de bildirilmiştir. WT grubu ve obez grup için ortalama / total yağ hacim oranı sırasıyla 0.09 ve 0.42 (Şekil 2). Obez farelerin karşı WT fareler için / total yağ hacim oranları (p = 0.001) anlamlı bir fark bulunmuştur. WT (C57BL/6J) Toplam (cm 3) Yağ (cm 3) Toplam / Yağ Oranı Obez (B6.V-Lep ob </)> / sup Toplam (cm 3) Yağ (cm 3) Toplam / Yağ Oranı Hayvan 1 28.79 3.00 0.10 Hayvan 1 66.25 26.75 0.40 Hayvan 2 33.25 3.05 0.09 Hayvan 2 61.15 26.31 0.43 Hayvan 3 30.30 2.63 0.09 Hayvan 3 64.19 25.7 0.40 Hayvan 4 54.25 23.78 0.44 Tablo 1. Toplam hacmi, yağ hacmi,ve WT ve obez farelerin için yağ / toplam hacim oranları. Toplam ve yağ hacimleri PMOD VOI analizi kullanılarak parçalı görüntüler elde edilmiştir. Şekil 2. Obez farelerin karşı WT fareler için yağ / toplam hacim oranları Ortalamalı. 0.09 ve 0.42, sırasıyla görüntülenir bulundu WT (C57BL/6J) ve obez (B6.V-Lep ob / J) / total yağ hacim oranları Ortalamalı. (Hata çubukları = tek standart sapma). WT karşı obez / total yağ hacim oranları (p değeri = 0.001) anlamlı bir fark bulunmuştur.