פילוח ומדידה של כמויות השומן מודלים השמנת יתר Murine באמצעות קרני רנטגן טומוגרפיה ממוחשבת
Summary
ניתוח תכולת השומן מתבצעת באופן שגרתי מחקרים ניצול מודלים השמנה Murine. שיטות המתעוררים קטנה החיה CT הדמיה וניתוח מספקים ניתוח האורך עשיר בפרטים תכולת השומן. כאן יש פירוט צעד אחר צעד לביצוע הליכים קטנה החיה CT הדמיה, ניתוח, הדמיה.
Abstract
השמנה קשורה לתחלואה ותמותה מוגברת, כמו גם מדדים מופחת איכות החיים. 1 שני גורמים סביבתיים וגנטיים הקשורים להשמנה, אם כי המנגנונים המדויקים התורמים המחלה נמצאים כעת התחום. 2,3 חיה קטנה כמה מודלים של השמנת יתר פותחו מועסקים במגוון רחב של מחקרים. 4 מרכיב קריטי אלה ניסויים כרוכה אוסף של אזוריים ו / או שומן מן החי הכולל נתונים התוכן בתנאים מגוונים.
שיטות ניסיוניות המסורתיים הקיימים למדידת תכולת השומן במודלים של בעלי חיים קטנים של השמנת יתר כוללים פולשנית (למשל לשעבר המדידה vivo של משקעי שומן) ולא פולשניות (כגון אנרגיה כפול רנטגן absorptiometry (DEXA) או תהודה מגנטית (MR)) פרוטוקולים, שכל אחד מהם מציג את יחסי הפשרות. שיטות פולשניות שוטפות למדידת כמות השומן עשויה לספק פרטיםלעוגב והפצה ספציפית באזור שומן, אבל להקריב הנבדקים ימנע הערכות האורך. לעומת זאת, כיום לא פולשנית אסטרטגיות לספק פרטים מוגבלים על איבר מסוים והפצה באזור שמנה, אבל מאפשרים הערכת אורך יקר. עם כניסתו של ייעודיים קטנים רנטגן בעלי חיים טומוגרפיה ממוחשבת (CT) מערכות ונהלים אנליטיים אישית, הן איברים וניתוחים באזור מסוים של חלוקת שומן פרופיל האורך יכול להיות אפשרי. דיווחים אחרונים אימתו את השימוש CT עבור בתחום ההדמיה vivo האורך של השמנה בעכברים חיים. 5,6 כאן אנו מספקים שיטה שונה המאפשר מדידת שומן / הכולל נפח, ניתוח להדמיה ניצול מערכת הדמיה מולקולרית Carestream Albira CT יחד עם חבילות PMOD ו Volview תוכנה.
Protocol
Discussion
כאן, תוך שימוש בעכברים B6.V-הלפריקונים OB / י לנו הדגימו את הכדאיות של ביצוע מדידות תכולת השומן במודל חיה קטנה באמצעות מערכת ה-CT Albira. מדידות אלה עולים בקנה אחד עם ציפיות השוואות של קבוצת הפנים וקבוצת בין המדידות. ראשית, התוצאות מייצגות הניתן כאן להדגיש השונות מוגבלת התוך קבוצה מדידות של שומן / סך יחס נפח של שתי קבוצות עכברים WT והשמנה באמצעות הליכים אלה. שנית, שומן / סך יחס נפח של עכברים WT לעומת שמנים שונים משמעותית. לבסוף, בהתבסס על השוואות (לא מוצג) עם ערכים קודמים דיווחו על מסת השומן היחסית סך השומן בגוף אחוז לעומת WT B6.V-הלפריקונים OB / י עכברים, שלנו מדידות של שומן / סך יחס נפח של WT לעומת B6.V- הלפריקונים OB / י עכברים ליפול בטווח הצפוי, 7, 8.
השיטות שפורטו כאן יכול להיות מיושם או מותאמת מ 'השניodels ו / או מטרות המחקר. שינויים בפרמטרים השיקום עשויים להידרש כדי להשיג מטרות מסוימות. לדוגמה, Judex et al. (2010) דיווחו כי 50 תמונות ברזולוציה מיקרומטר נדרשו לניתוח כלשהו באזור מסוים. אחד הכרכים איזוטרופיים ס"מ של התמונה ניתן לבחור 35 שחזורים מיקרומטר Reconstructor 5.0 סוויטה Albira באמצעות "משאבי אנוש" אפשרות שחזור. לאחר מערכת ה-CT Albira נוצל לאזור ועוגב מדידות ספציפיות תוכן שומן היתרונות מלא (כלומר האזור בו זמנית ועל איברים ספציפיים מדידות שומן נפח מדידות אורך) של ניתוח תוכן מבוסס-CT שומן הבא לידי למערכת Albira CT.
מסקנות:
כאן אנו מספקים צעד מפורט, בשיטת צעד למדידת תכולת השומן בעכברים חיים באמצעות צילום רנטגן CT הדמיה. רכשנו נתוני CT שנו באמצעות תחנת התמונה Albira, וביצע לאחר פילוח ואנהתמוגה באמצעות חבילת התוכנה PMOD. לבסוף, אנו מספקים הוראות כדי לאפשר עיבוד קליל ויזואליזציה של התפלגות רקמת שומן בתוך חיה כולו.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים בחום נוטרדאם משולב מתקן הדמיה (NDIIF) ובריאות Carestream עבור תמיכה כספית עבור פרויקט זה.
References
- Clarke, P. J., O’Malley, P. M., Schulenberg, J. E., Johnston, L. D. Midlife and Socioeconomic Consequences of Persistent Overweight Across Early Adulthood: Findings From a National Survey of American Adults (1986-2008). Am. J. Epidemiol. , (2008).
- Brockman, G., Bevova, M. Using Mouse Models to Dissect the Genetic of Obesity. TRENDS in Genetics. 18, 367-376 (2002).
- Bray, G. A. Progress in Understanding the Genetics of Obesity. Journal of Nutrition. 127, 940S-942S (1997).
- Carroll, L. Mouse Models of Obesity. Clinics in Dermatology. 22, 345-349 (2004).
- Judex, S., Luu, Y. K., Ozcivici, E., Adler, B., Lublinsky, S., Rubin, C. T. Quantification of Adiposity in Small Animal Rodents using Micro-CT. Methods. 50, 14 (2010).
- Luu, Y. K., Lublinsky, S., Ozcivici, E., Capilla, E., Pessin, J. E., Rubin, C. T., Judex, S. In Vivo Quantificaiton of Subcutaneous and Visceral Adiposity by Micro Computed Tomography in a Small Animal Model. Med. Eng. Phys. 31, 34-41 (2009).
- Medina-Gomez, G., Gray, S. L., Yetukuri, L., Shimomura, K., Virtue, S., Campbell, M., Curtis, R. K., Jimenez-Linan, M., Blount, M., Yeo, G. S., Lopez, M., Seppänen-Laakso, T., Ashcroft, F. M., Oresic, M., Vidal-Puig, A. PPAR gamma 2 prevents lipotoxicity by controlling adipose tissue expandability and peripheral lipid metabolism. PLoS Genet. 3, e64 (2007).
- Sakkou, M., Wiedmer, P., Anlag, K., Hamm, A., Seuntjens, E., Ettwiller, L., Tschöp, M. H., Treier, . M.A role for brain-specific homeobox factor bsx in the control of hyperphagia and locomotory behavior. Cell Metab. 5, 450-463 (2007).
- Patchen, M. L., MacVittie, T. J., Souza, L. M. Postirradiation treatment with granulocyte colony-stimulating factor and preirradiation WR-2721 administration synergize to enhance hemopoietic reconstitution and increase survival. International Journal of Radiation Oncology. 22, 773-779 (1992).
