تجزئة والقياس من وحدات تخزين الدهون في الفئران نماذج السمنة عن طريق الأشعة السينية التصوير المقطعي
Summary
ويجري بصورة روتينية الدهون تحليل المحتوى في دراسات استخدام نماذج البدانة الفئران. الأساليب المستجدة في حيوان صغير CT التصوير والتحليل وتقديم لمزيد من التفاصيل الغنية طولية تحليل محتوى الدهون. الخطوة هنا بالتفصيل ونحن من خلال إجراءات لتنفيذ خطوة صغيرة حيوان CT التصوير والتحليل والتصور.
Abstract
وترتبط السمنة مع زيادة معدلات الاعتلال والوفيات وكذلك مقاييس تخفيض في نوعية الحياة. وترتبط كل من 1 العوامل البيئية والوراثية وبين السمنة، على الرغم من إعلان أن الآليات الدقيقة الأساسية التي تساهم في المرض الذي يرسم. 2،3 حيوان صغير عدة وقد وضعت نماذج من السمنة ويعملون في مجموعة متنوعة من الدراسات. 4 ألف عنصر حاسم لهذه التجارب تنطوي على مجموعة من البيانات محتوى الدهون الحيوانية الإقليمية و / أو الكلي في ظل ظروف متنوعة.
الطرق التجريبية التقليدية المتاحة لقياس نسبة الدهون في نماذج حيوانية صغيرة من البدانة وتشمل الغازية (المجراة سابقا على سبيل المثال قياس رواسب الدهون)، وغير الغازية (مثل ثنائي الطاقة امتصاص الأشعة السينية (DEXA)، أو الرنين المغناطيسي (MR)) بروتوكولات كل واحدة منها تقدم نسبي المقايضات. قد طرق الغازية الحالية لقياس نسبة الدهون التفاصيلللهيئة والمنطقة توزيع الدهون محددة، ولكن التضحية والموضوعات يحول دون تقييم طولية. وفي المقابل، الحالية غير الغازية استراتيجيات تقديم تفاصيل محدودة لجهاز ومنطقة توزيع الدهون محددة، ولكن يمكن تقدير قيمة طولية. ربما مع ظهور حيوان صغير مخصص الأشعة السينية نظم محسوب (CT) التصوير المقطعي الإجراءات التحليلية وحسب الطلب، على حد سواء، وجهاز تحليل منطقة محددة من توزيع الدهون والتنميط طولية يكون ممكنا. والتحقق من صحة التقارير الأخيرة استخدام CT للتصوير في الجسم الحي طولية من السمنة في الفئران الحية. 5،6 هنا نقدم طريقة تعديل يسمح لقياس حجم الدهون / مجموع، والتحليل والتصور الاستفادة من Carestream التصوير الجزيئي نظام CT Albira بالاشتراك مع حزم البرامج PMOD وVolview.
Protocol
Discussion
هنا، وذلك باستخدام الفئران OB / J-B6.V لاب قد بينت لنا مدى جدوى إجراء قياسات نسبة الدهون في نموذج حيوان صغير باستخدام نظام التصوير المقطعي Albira. هذه القياسات متوافقة مع التوقعات لمجموعة من المقارنات والقياسات البينية بين المجموعة. أولا، قدم ممثل هنا تسليط الضوء على نتائج محدودة داخل المجموعة التباين في قياس نسب حجم الدهون / مجموع في كل من المجموعتين الفئران WT ويعانون من السمنة المفرطة باستخدام هذه الإجراءات. ثانيا، ونسب حجم الدهون / مجموع وزن الفئران مقابل يعانون من السمنة المفرطة تختلف اختلافا كبيرا. أخيرا، استنادا إلى المقارنات (لا تظهر) مع القيم السابقة الإبلاغ عن كتلة نسبي في المئة من الدهون والدهون في الجسم للوزن مقابل B6.V-لاب الفئران OB / J، لدينا قياسات لحجم نسب الدهون / الإجمالية للوزن مقابل B6.V- LEP OB / J الفئران تقع ضمن النطاق المتوقع، 7، 8.
ويمكن تطبيق الأساليب بالتفصيل هنا أو تكييفها لم الأخرىodels و / أو أهداف الدراسة. قد تكون هناك حاجة تعديلات في معايير إعادة الإعمار لتحقيق أهداف محددة. على سبيل المثال، Judex وآخرون. وذكرت (2010) أن هناك حاجة إلى 50 صورة قرار ميكرومتر لبعض التحليل منطقة محددة. ويمكن اختيار واحد مجلدات الخواص سم من صورة لمدة 35 ميكرومتر اعادة البناء في Reconstructor Albira جناح 5.0 باستخدام "الموارد البشرية" خيار إعادة الإعمار. ربما مرة واحدة وقد تم استخدام نظام CT Albira لمنطقة محددة، وجهاز قياس نسبة الدهون يمكن تحقيق الفوائد الكاملة (منطقة في وقت واحد أي جهاز معين وقياسات حجم الدهون والقياسات الطولية) من مقرها CT تحليل محتوى الدهون لنظام CT Albira.
الاستنتاجات:
هنا نقدم تفصيلا، وخطوة خطوة طريقة لقياس نسبة الدهون في الفئران الحية باستخدام الأشعة السينية CT التصوير. حصلنا على بياناتنا المقطعية تحدد باستخدام محطة صورة Albira، وأجرى لاحقا تجزئة وآناتحلل باستخدام برمجيات PMOD. أخيرا، ونحن نقدم تعليمات لتمكين تقديم السهل والتصور لتوزيع الأنسجة الدهنية في كل الحيوانات.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر بحرارة نوتردام مرفق التصوير المتكاملة (NDIIF) والصحة Carestream للحصول على الدعم المالي لهذا المشروع.
References
- Clarke, P. J., O’Malley, P. M., Schulenberg, J. E., Johnston, L. D. Midlife and Socioeconomic Consequences of Persistent Overweight Across Early Adulthood: Findings From a National Survey of American Adults (1986-2008). Am. J. Epidemiol. , (2008).
- Brockman, G., Bevova, M. Using Mouse Models to Dissect the Genetic of Obesity. TRENDS in Genetics. 18, 367-376 (2002).
- Bray, G. A. Progress in Understanding the Genetics of Obesity. Journal of Nutrition. 127, 940S-942S (1997).
- Carroll, L. Mouse Models of Obesity. Clinics in Dermatology. 22, 345-349 (2004).
- Judex, S., Luu, Y. K., Ozcivici, E., Adler, B., Lublinsky, S., Rubin, C. T. Quantification of Adiposity in Small Animal Rodents using Micro-CT. Methods. 50, 14 (2010).
- Luu, Y. K., Lublinsky, S., Ozcivici, E., Capilla, E., Pessin, J. E., Rubin, C. T., Judex, S. In Vivo Quantificaiton of Subcutaneous and Visceral Adiposity by Micro Computed Tomography in a Small Animal Model. Med. Eng. Phys. 31, 34-41 (2009).
- Medina-Gomez, G., Gray, S. L., Yetukuri, L., Shimomura, K., Virtue, S., Campbell, M., Curtis, R. K., Jimenez-Linan, M., Blount, M., Yeo, G. S., Lopez, M., Seppänen-Laakso, T., Ashcroft, F. M., Oresic, M., Vidal-Puig, A. PPAR gamma 2 prevents lipotoxicity by controlling adipose tissue expandability and peripheral lipid metabolism. PLoS Genet. 3, e64 (2007).
- Sakkou, M., Wiedmer, P., Anlag, K., Hamm, A., Seuntjens, E., Ettwiller, L., Tschöp, M. H., Treier, . M.A role for brain-specific homeobox factor bsx in the control of hyperphagia and locomotory behavior. Cell Metab. 5, 450-463 (2007).
- Patchen, M. L., MacVittie, T. J., Souza, L. M. Postirradiation treatment with granulocyte colony-stimulating factor and preirradiation WR-2721 administration synergize to enhance hemopoietic reconstitution and increase survival. International Journal of Radiation Oncology. 22, 773-779 (1992).
