Trichuris muris Infection: Un modèle de type 2 Immunité et inflammation de l'intestin
Summary
Trichuris muris infection est un modèle de l'immunité intestinale Th2 où les souris résistantes générer une réponse immunitaire protectrice Th2 et souris susceptibles de générer une réponse Th1 pathologique.
Abstract
Trichuris muris est un pathogène naturel des souris et est biologiquement et antigéniquement similaires aux espèces de Trichuris qui infectent les humains et le bétail 1. Œufs infectieux sont donnés par gavage oral, éclosent dans l'intestin grêle distal, envahissent les cellules épithéliales intestinales (CEI) qui bordent les cryptes du cæcum et du côlon proximal et sur la maturation des œufs des vers la libération dans l'environnement 1. Ce modèle est un outil puissant pour examiner les facteurs qui contrôle l'activation des cellules CD4 + T helper (Th), ainsi que des changements dans l'épithélium intestinal. La réponse immunitaire qui se produit dans les souches résistantes consanguines, telles que C57BL / 6 et BALB / c, est caractérisée par des cytokines Th2 polarisées (IL-4, IL-5 et IL-13) et l'expulsion des vers tout type Th1 associée de cytokines (IL -12, IL-18, IFN-γ) de promouvoir des infections chroniques chez AKR génétiquement sensibles / souris J 2-6. Cytokines Th2 promouvoir des changements physiologiques dans le microenvironnement intestinale, y compris le roulement rapide des CEI, la différenciation des cellules caliciformes, le recrutement et l'évolution de la perméabilité épithéliale et la contraction des muscles lisses, qui ont tous été impliqués dans l'expulsion 7-15 ver. Ici, nous détaillons un protocole pour la propagation de Trichuris muris oeufs qui peuvent être utilisées dans des expériences ultérieures. Nous fournissons également une récolte expérimentale de l'échantillon avec des suggestions pour l'analyse post-infection. Globalement, ce protocole permettra aux chercheurs les outils de base pour réaliser un modèle d'infection par Trichuris muris souris qui peut être utilisé pour traiter les questions relatives à la propension Th dans le tractus gastro-intestinal ainsi que des fonctions effectrices immunitaires des CEI.
Protocol
Discussion
Ce protocole détaille une dose standard de haute aiguë Trichuris muris infection qui peut être modifiée au besoin par l'investigateur. Par exemple, les souris peuvent être sacrifiés et les tissus récoltés à des jours différents. Afin de déterminer que les souris ont réussi à établir la charge parasitaire complète qu'ils peuvent être sacrifiés au jour 14, date à laquelle toutes les souris doivent porter un fardeau de quelque 200 vers. Les souris peuvent également être infectés pendan…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par les Instituts canadiens de recherche en santé (MSH-95368, 89773 et MOP-MOP-106623 à CZ) et la Fondation canadienne pour l'innovation. SMC est le récipiendaire d'une Association des IRSC / canadienne de gastroentérologie de bourses postdoctorales. CZ est un chercheur des IRSC Nouveau.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
|---|---|---|---|
| Animal Feeding Needles (18 x 1½”) | Popper | 7912 | |
| Smooth curved Forceps | Roboz | RS-5047 | |
| DMEM | Gibco | 11965 | |
| NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) | Jackson Laboratories | 005557 | These are the mice we used, however, any immunodeficient mice or susceptible strain should work. |
| RNAlater | Qiagen | 76104 | |
| 2 ml tubes | Axygen | MCT-200-C | |
| 15 ml tubes | Falcon | 352096 | |
| 6 well plates | Falcon | 353046 | |
| Paraformaldehyde | Electron Microscopy Science | 15710 | |
| α-RELMβ antibody | PeproTech Inc | 0694270Rb |
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