Использование отечественных и миниатюрных свиней в науке значительно увеличилось в последние годы. Демонстрируя, как выполнять интубация, катетеризация мочевого пузыря трансуретральной, бедренная артерия и вена катетеризации, а также transcardial перфузии, мы нацелены на дальнейшее увеличение стоимости Геттингене minipigs в биомедицинских исследованиях.
Появление Геттингене minipig в исследовании таких тем, как неврология, токсикология, сахарный диабет, ожирение и экспериментальной хирургии отражает сходство этих животных к анатомии и физиологии человека 1-6. Размер Геттингене minipig позволяет использовать хирургические оборудование и передовые визуализации условия аналогичные тем, которые используются в организме человека 6-8. Цель этого учебного видео является повышение осведомленности о значении minipigs в биомедицинских исследованиях, демонстрируя, как выполнять интубации трахеи, трансуретральной катетеризации мочевого пузыря, бедренная артерия и вена катетеризации, а также transcardial перфузии.
Интубации трахеи следует проводить, когда minipig подвергается общим наркозом, так как он поддерживает дыхательных путей, позволяет вспомогательной вентиляции и защищает дыхательные пути от аспирационной. Трансуретральная катетеризации мочевого пузыря может дать полезную информацию о том, о гидратации государства, а также почек и сердечно-сосудистой системы в течение длительных хирургических процедур. Кроме того, мочевого катетеризация может предотвратить загрязнение тонкий медико-технического оборудования и болезненные расширения пузырь, который может нанести вред животным и излишне влияние эксперимента в связи с увеличением тонуса блуждающего нерва и измененные физиологические параметры. Артериальная и венозная катетеризация полезно для получения повторяющихся образцов крови и мониторинга различных физиологических параметров. Катетеризация бедренных сосудов предпочтительнее катетеризации сосудов шеи для удобства доступа при выполнении экспериментов на основе кадров стереотаксической нейрохирургии и визуализации головного мозга. При выполнении катетеризации судна в выживании исследования, строгой асептики должны быть использованы, чтобы избежать инфекции 6. Transcardial перфузии является наиболее эффективным методом фиксации и дает выдающихся результатов при подготовке minipig органов для гистологии и гистохимии 2,9. Дополнительные сведения о анестезии, хирургии и экспериментальных методов в свиней в целом мы имеем в виду Мошенничество 2007 года. Дополнительная информация о премедикации и вводного наркоза, вентиляции легких, обезболивание, пред-и послеоперационного ухода за minipigs Геттингене доступны через Интернет по адресу http://www.minipigs.com 10. Для обширную информацию об анатомии свиньи мы ссылаемся на никель и соавт. Том 1-5 11.
Эта презентация шаг за шагом визуальные инструкции о том, как выполнить четыре часто используемых процедур в minipig исследований 12,13. Методы, описанные могут быть использованы практически без адаптации в ландрас свиней и других крупных животных, исследования, таких как собаки и овцы 14. Асептических условиях должны быть использованы, чтобы избежать инфекции, при выполнении описанных процедур в выживании исследований.
Индукция анестезии имеет важное значение для благополучия животных и научных целей, и должны обеспечить отсутствие роговичного рефлексов и хорошей мышечной релаксации, до интубации трахеи делается попытка. Однако, поскольку анестетики используются для индукции не даны в фиксированных дозах, но управление пока желаемого эффекта не наблюдается, очень важно внимательно следить за животным из-за риска апноэ, особенно при использовании пропофола 6,10. Для интубации трахеи, использование xylocaine спрей или миорелаксантов может способствовать введение трубки, а использование нервно-мышечных блокаторов должно быть сделано только те сотрудники, которые хорошо подготовленных в таких процедур, с тем чтобы соответствовать этическим требованиям. Следует проявлять осторожность, чтобы не травмировать гортань проход во время интубации, для того, чтобы избежать трахеи отек и отек. Дыхательных путей отек можно лечить с помощью НПВС или подобные противовоспалительные препараты 10. Свиньи могут интубированных с разных позиций, но имеющих животное на спину, как правило, легче для тех, кто регулярно проводят интубацию человека, так как она представляет дыхательных путей в подобной манере 6. Наиболее распространенные ошибки при интубации случайного размещения трубки в пищевод, который находится чуть ниже гортани проход, когда животное находится на спине. Обратите внимание, что труба не должна быть выдвинуты без предварительного четкого определения arytenoids хрящей и голосовых связок.
Трансуретральная катетеризации мочевого пузыря через мочеиспускательный канал легко сделать в женской свиней, в то время как эта процедура крайне трудно, даже невозможно, у мужчин 6. Следует отметить, что, поскольку женский уретральный отверстие передней во влагалище, тем больше во влагалище может быть ошибочно катетеризация. Использование стерильных и дезинфекции смазка рекомендуется для выживания исследований. Кроме того, смазка с местными обезболивающий эффект может облегчить процедуру катетеризации.
При выполнении бедренная артерия и вена катетеризации, выбор судна катетеры и как они обеспечены отличаются между неправительственными организациями, выживания и выживания исследованиях, особенно, когда катетеры имплантирован в течение длительного периода времени 6. Например катетеры для хронического имплантации должны быть очень биосовместимых, есть сохранение бусы или манжет для фиксации, а также не травмировать стенку сосуда с течением времени, таким образом вызывая тромбоз или эрозии 6.
В настоящее видео, мы используем замкнутая система работает на сжатом воздухе для transcardial перфузии. Другой вариант заключается в использовании системы обусловлен действием силы тяжести. Преимущество тяжести системы по сравнению с использованием системы сжатого воздуха, что они простые, эффективные и исключить возможность давления воздуха, поступающего сосудистой системы. Тем не менее, гидростатическое давление под действием силы тяжести системы непрерывно изменяется во время перфузии, и это может повлиять на результаты гистологического 15. В зависимости от типа гистопатологические исследования кто-то хочет выполнять, это может быть выгодно заливать животное с гепарином солевым в первую очередь. Это особенно importantance при выполнении иммунофлуоресцентного окрашивания, чтобы избежать аутофлюоресценция проблемы, связанные с эритроцитами. Кроме того, если орган интерес мозга, нисходящей аорты может быть прикреплена сохранить фиксатором. Тем не менее, у свиней, этот шаг влечет за собой дополнительные рассекает и продлит процедуру.
The authors have nothing to disclose.
Работа выполнена при финансовой поддержке Фонда Lundbeck, Карен Элиз Дженсен фонда, Фонда исследований в области здравоохранения в регионе Центральный Дании и Институт клинической медицины Университета Орхус больницы. Мы выражаем признательность умелой помощи Дональд Смит F, Андерс Стин Соеренсен, Хенрик Соеренсен, Asbjoern Ettrup-Кристенсен, а также сотрудники Paaskehoejgaard.
Procedure | Equipment | Company | Catalogue-number |
---|---|---|---|
Intubation | |||
Respirator | Datex-Ohmeda S/S Avance, GE Healthcare | 1009-9002-000 | |
Suction with blunt tip | Unomedical | 34091181 | |
Laryngoscope | Miller | 85-0045 (Laryngoscope set) | |
Endotracheal tube 5.5 mm ID | Smiths Medical International Ltd. | 100/199/055 | |
Stylet | Hudson RCI | 5-151001 | |
Syringe 5ml | |||
Stethoscope | Martin | 17-262-00 | |
Bladder catherization | |||
AquaFlate glycerine silicone Foley catheter 8-French with stylet | Rüsch | 178003 | |
Speculum nasal | Martin | 36-859-50 | |
Speculum rectal | Martin | 30-613-15 | |
Blunt-tip forceps | Martin | 13-374-16 | |
Catheter lubricant gel | |||
Cathejell Lidocain | Montavit | CJL08501 | |
Instillagel Comb. | Farco Pharma | 08-40-200 | |
A4 Urine drainage bag | Unomedical | 38 155 1S | |
Adhesive tape | |||
Femoral artery and vein catherization </ | |||
Scalpel | Martin | 10-295-11 | |
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Tissue forceps | Martin | 12-100-14 | |
Small blunt-tip surgical forceps | Martin | 13-375-13 | |
Small self-retaining Tissue retractor | Martin | 15-753-13 | |
Needleholder | Martin | 20-634-14 | |
Surgical swaps | |||
Suture with needle | |||
Saline | |||
Heparine | LEO | 585679 | |
18-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393206 | |
4-French brite tip sheaths with introducer and Seldinger guide wire | Cordis | 154-2629-1/0017 | |
Transcardial perfusion | |||
Pressurized perfusion system | Home made from parts available in most professional hardware stores | ||
Fume extraction system | Gram A/S | 01750000 and 0303700 | |
Perfusant 5L | |||
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Bone shears | F.S.T | 16150-24 | |
Large curved tip self-holding forceps | Martin | 13-421-18 | |
Self retaining sternal retractor | Rudolf Medical | 7520-10 | |
Pentobarbital | The Royal Veterinary and Agricultural University (KVL) | 200 mg/ml | |
22-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393202 |