科学における国内とミニブタの利用は近年大幅に増加している。挿管、経尿道的膀胱へのカテーテル挿入、大腿動脈および静脈カテーテルだけでなく、transcardial灌流を行う方法を示すことによって、我々は、さらに生物医学研究にゲッティンゲンminipigsの価値を高めることを目指します。
このような神経科学、毒物学、糖尿病、肥満、そして実験的な手術のようなトピックの研究にゲッティンゲンミニ豚の出現は、人間の解剖学と生理学〜1-6これらの動物の酷似を反映している。ゲッティンゲンミニ豚のサイズが外科の使用を許可する人間6-8に使用されるものと同様の設備と高度な画像診断法。この教育ビデオの目的は、気管挿管、経尿道的膀胱へのカテーテル挿入、大腿動脈および静脈カテーテルだけでなく、transcardial灌流を行う方法を示すことによって、生物医学研究におけるminipigsの価値に対する認識を高めることです。
それは、気道を維持する補助換気を可能にし、吸引液から気道を保護するので、ミニ豚は、全身麻酔を受けるたびに、気管内挿管を行うべきである。経尿道的膀胱へのカテーテル挿入は、長い外科手術中に約水和状態に関する有用な情報だけでなく、腎と心血管機能を提供することができます。また、尿道カテーテルは、動物を傷つけるし、不必要に迷走神経の緊張と変更された生理学的パラメータの設定によって、実験に影響を与える可能性のある繊細な医学の技術設備と痛みを伴う膀胱の拡張子の汚染を防ぐことができます。動脈と静脈カテーテル法は、繰り返される血液サンプルを入手し、様々な生理学的パラメータを監視するのに便利です。フレームベースの定位脳神経外科、脳のイメージングを伴う実験を行う際に大腿血管のカテーテルは、アクセスを容易にするために首の血管のカテーテル挿入に好適である。生存試験における血管カテーテル検査を行うときは、厳格な無菌テクニックは、感染症6を避けるために採用されている必要があります。 Transcardial灌流が最も効果的な固定法であり、そして組織学および組織化学2.9のためのミニ豚の臓器を準備する際に卓越した結果が得られます。一般の豚の麻酔、手術と実験手法の詳細については、我々は2007年をスウィンドルを参照してください。麻酔の前投薬と誘導、補助換気、鎮痛、ゲッティンゲンのminipigsのプレおよび術後のケアについての補足情報は、インターネット経由で利用可能ですhttp://www.minipigs.com 10。ブタ解剖学に関する広範な情報のため我々はニッケルらを参照してください。巻。 1月5日11。
このプレゼンテーションでは、研究12,13のミニ豚の4つの頻繁に使用される手順を実行する方法についてステップバイステップのビジュアルを説明します。説明された技法は、在来種の豚や犬や羊14のような他の大規模な研究の動物のほとんど、あるいはまったく適応で使用することができます。無菌操作は、生存率の研究で説明した手順を実行する際に、感染症を避けるために採用されている必要があります。
麻酔導入は、動物福祉と科学的な理由から重要であり、気管内挿管を試みる前に、角膜反射と良い筋肉の弛緩の欠如を提供する必要があります。所望の効果が観察されるまで誘導のために使用される麻酔薬は、固定用量で与えられたが、投与されていないため、しかし、、それは密接にプロポフォール6,10を使用している場合は特に、無呼吸のリスクがあるために動物を監視することが重要です。気管挿管のために、キシロカインスプレーや筋弛緩剤の使用は、チューブの導入を促進することができますが、神経筋遮断薬の使用は、そのような倫理的な要件に適合するように、そのような手順ではよく訓練されている職員によって行われる必要があります。ケアは、気管の腫れや浮腫を避けるために、挿管時の喉頭の通路をトラウマにしないように注意してください。気道の浮腫は、NSAIDまたは類似の抗炎症薬10で治療することができます。豚は、さまざまな位置から挿管、それは同様の方法6で気道を提示すると、その後ろに動物を持つことは、定期的に人間の挿管を行う人にとって容易になる傾向ができます。挿管時の最も一般的なエラーは、単に動物が、その裏に置かれて喉頭の通路の下に位置して食道に管、の不注意な配置です。 (注)は、チューブは、最初に明確にarytenoidsの軟骨と声帯を識別することなく進めてはいけません。
この手順では、男性6で、おそらく不可能な、非常に困難であるしながら尿道を通って膀胱の経尿道的カテーテル挿入が容易に、雌豚で行われます。それは女性の尿道口が膣の前なので、大きな膣の開口部が誤ってカテーテルを挿入することができることに留意すべきである。滅菌と消毒潤滑剤の使用は、生存の研究のためにお勧めです。さらに、局所麻酔効果を持つ潤滑剤は、カテーテルの手続きを容易にすることがあります。
大腿動脈および静脈カテーテル、血管カテーテルの選択と方法を実行するとき、それらは、カテーテルが時間6の長時間にわたって注入される場合は特に、非生存と生存の研究間で異なって固定されている。慢性移植のためのインスタンスのカテーテルは、非常に生体適合性でなければならないためだけでなく、時間の経過とともに血管壁がトラウマではないとして、このように血栓症や浸食6を誘導、固定用リテンションビーズや袖口を持っている。
現在のビデオでは、我々はtranscardial灌流のために圧縮空気を搭載したクローズドシステムを使用してください。別のオプションは、重力によって駆動されるシステムを使用することです。圧縮空気を利用したシステムと比較して重力システムの利点は、効率的な、シンプルであり、血管系に入る加圧された空気の危険性を提示しないことです。しかし、重力システムによって加えられる静圧は、血流中に連続的に変化し、これは組織学的結果15影響を与える可能性があります。いずれかの実行を希望する病理組織学的研究の種類に応じて、それは最初にヘパリン生理食塩水で動物を灌流することは有利かもしれません。赤血球によって引き起こされる自家蛍光の問題を回避するために免疫蛍光染色を行う場合に特定のimportantanceです。興味の臓器は、脳の場合はさらに、、下行大動脈は、固定保存にクランプすることができます。しかし、豚では、このステップでは、解剖の追加を伴いますし、手順を延長します。
The authors have nothing to disclose.
研究は、財政的にルンドベック財団、カレンエリーゼジェンセン財団、中央デンマーク地域の保健研究基金と臨床医学オーフス大学病院の研究所によってサポートされていました。我々は感謝の気持ちでドナルドFスミス、アンダーススティーンSoerensen、ヘンリックSoerensen、Asbjoern Ettrup -クリステンセン、そしてPaaskehoejgaardのスタッフの巧みな支援を認める。
Procedure | Equipment | Company | Catalogue-number |
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Intubation | |||
Respirator | Datex-Ohmeda S/S Avance, GE Healthcare | 1009-9002-000 | |
Suction with blunt tip | Unomedical | 34091181 | |
Laryngoscope | Miller | 85-0045 (Laryngoscope set) | |
Endotracheal tube 5.5 mm ID | Smiths Medical International Ltd. | 100/199/055 | |
Stylet | Hudson RCI | 5-151001 | |
Syringe 5ml | |||
Stethoscope | Martin | 17-262-00 | |
Bladder catherization | |||
AquaFlate glycerine silicone Foley catheter 8-French with stylet | Rüsch | 178003 | |
Speculum nasal | Martin | 36-859-50 | |
Speculum rectal | Martin | 30-613-15 | |
Blunt-tip forceps | Martin | 13-374-16 | |
Catheter lubricant gel | |||
Cathejell Lidocain | Montavit | CJL08501 | |
Instillagel Comb. | Farco Pharma | 08-40-200 | |
A4 Urine drainage bag | Unomedical | 38 155 1S | |
Adhesive tape | |||
Femoral artery and vein catherization </ | |||
Scalpel | Martin | 10-295-11 | |
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Tissue forceps | Martin | 12-100-14 | |
Small blunt-tip surgical forceps | Martin | 13-375-13 | |
Small self-retaining Tissue retractor | Martin | 15-753-13 | |
Needleholder | Martin | 20-634-14 | |
Surgical swaps | |||
Suture with needle | |||
Saline | |||
Heparine | LEO | 585679 | |
18-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393206 | |
4-French brite tip sheaths with introducer and Seldinger guide wire | Cordis | 154-2629-1/0017 | |
Transcardial perfusion | |||
Pressurized perfusion system | Home made from parts available in most professional hardware stores | ||
Fume extraction system | Gram A/S | 01750000 and 0303700 | |
Perfusant 5L | |||
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Bone shears | F.S.T | 16150-24 | |
Large curved tip self-holding forceps | Martin | 13-421-18 | |
Self retaining sternal retractor | Rudolf Medical | 7520-10 | |
Pentobarbital | The Royal Veterinary and Agricultural University (KVL) | 200 mg/ml | |
22-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393202 |