Die Verwendung von in-und Minischweine in der Wissenschaft hat in den letzten Jahren stark zugenommen. Mit dem Nachweis, wie Intubation, transurethrale Blasenkatheter, Arteria und Vena femoralis Katheter sowie transcardial Perfusion durchzuführen, wollen wir weiter steigern den Wert von Göttingen Minipigs in der biomedizinischen Forschung.
Die Entstehung des Göttinger Minischwein in der Forschung mit Themen wie Neurowissenschaften, Toxikologie, Diabetes, Fettleibigkeit und experimentelle Chirurgie spiegelt die Ähnlichkeit dieser Tiere für die menschliche Anatomie und Physiologie 1-6. Die Größe des Göttinger Minischwein erlaubt den Einsatz von chirurgischen Geräte und fortschrittliche bildgebende Verfahren ähnlich wie beim Menschen 6-8 verwendet. Das Ziel dieser Lehr-Video ist, das Bewusstsein über den Wert der Minipigs in der biomedizinischen Forschung zu erhöhen, indem die demonstrieren, wie Intubation, transurethrale Blasenkatheter, Arteria und Vena femoralis Katheter sowie transcardial Perfusion durchzuführen.
Endotracheale Intubation sollte durchgeführt werden, wenn ein Minischwein erfährt Vollnarkose, weil es der Atemwege führt, ermöglicht Beatmung und schützt die Atemwege vor saugt werden. Transurethrale Blasenkatheter können nützliche Informationen über etwa Hydratisierung sowie Nieren-und Herz-Kreislauf-Funktion während der langen chirurgischen Eingriffen bieten. Darüber hinaus können Blasenkatheterisierung verhindern Kontamination empfindlicher medizinisch-technische Ausstattung und schmerzhafte Blase Erweiterung, die das Tier schaden kann und unnötig Einfluss des Experiments aufgrund der erhöhten Vagotonus und veränderte physiologische Parameter. Arterielle und venöse Katheterisierung ist nützlich für den Erhalt wiederholt Blutproben und Überwachung verschiedener physiologischer Parameter. Katheterisierung der Femoralgefäße vorzuziehen ist Katheterisierung der Halsgefäße für einen leichten Zugang, bei der Durchführung von Experimenten mit Frame-basierte stereotaktische Neurochirurgie und Bildgebung des Gehirns. Bei der Durchführung Schiff Katheterisierung der Überlebenszeit durchgeführt wurden, darf strengen aseptischen Bedingungen eingesetzt werden, um Infektionen 6 zu vermeiden sein. Transcardial Perfusion ist die effektivste Methode, Fixierung und liefert herausragende Ergebnisse bei der Vorbereitung Minischwein Organe für Histologie und Histochemie 2,9. Für weitere Informationen über Anästhesie, Chirurgie und experimentellen Techniken bei Schweinen in der Regel beziehen wir uns auf 2007 Swindle. Ergänzende Informationen über die Vorbereitung und Einleitung der Anästhesie, Beatmung, Analgesie, prä-und postoperativen Betreuung von Göttingen Minipigs sind über das Internet zur Verfügung unter http://www.minipigs.com 10. Für umfassende Informationen über Schweine Anatomie verweisen wir auf Nickel et al. Vol. 1-5 November.
Diese Präsentation enthält Schritt-für-Schritt-visuelle Anweisungen, wie zu vier häufig verwendete Verfahren in Minischwein Forschung 12,13 auszuführen. Die beschriebenen Techniken kann mit wenig oder ohne Anpassung in Landrasse Schweine und andere große Forschungseinrichtungen Tiere wie Hunde und Schafe 14 verwendet werden. Aseptische Bedingungen müssen eingesetzt werden, um Infektionen zu vermeiden, bei der Durchführung der beschriebenen Verfahren in Überlebensstudien werden.
Einleitung der Narkose ist für den Tierschutz und wissenschaftlichen Gründen wichtig, und sollte das Fehlen der Corneareflexe und gute muskuläre Entspannung zu bieten, vor Intubation versucht wird. Da jedoch die Anästhetika zur Induktion verwendet werden, nicht in festen Dosen verabreicht werden, sondern verabreicht, bis der gewünschte Effekt beobachtet wird, ist es wichtig, genau zu beobachten das Tier wegen der Gefahr der Apnoe, insbesondere bei Verwendung von Propofol 6,10. Bei der trachealen Intubation kann der Einsatz von Xylocain Spray oder Muskelrelaxans erleichtern die Einführung der Röhre, aber die Anwendung von neuromuskulären Blockern sollte nur von Personen in solchen Verfahren gut ausgebildet sind, um so mit den ethischen Anforderungen genügen durchgeführt werden. Es sollte darauf geachtet werden, dass der Kehlkopf-Passage während der Intubation zu traumatisieren, um trachealen Schwellungen und Ödeme zu vermeiden. Airway Ödem kann mit NSAID oder ähnliche entzündungshemmende Medikamente 10 behandelt werden. Schweine können aus verschiedenen Positionen intubiert werden, aber nachdem das Tier auf dem Rücken neigt leichter zu sein für diejenigen, die regelmäßig durchzuführen menschlichen Intubation, da es die Atemwege stellt in ähnlicher Weise 6. Der häufigste Fehler bei der Intubation wird ein unbeabsichtigtes Platzierung des Tubus in die Speiseröhre, die knapp unterhalb des Kehlkopfes Durchgang, wenn das Tier auf den Rücken gelegt befindet. Beachten Sie, sollte das Rohr nie, ohne vorher klar die Aryknorpel Knorpel und Stimmbänder vorangetrieben werden.
Transurethrale Katheterisierung der Harnblase durch die Harnröhre ist leicht in weiblichen Schweinen durchgeführt, während dieser Prozedur ist extrem schwierig, vielleicht unmöglich, bei Männern 6. Es wird darauf hingewiesen, dass seit der weiblichen Harnröhrenmündung ist anterior der Vagina, der größere vaginale Öffnung irrtümlich kann katheterisiert werden. Die Verwendung von sterilen und Desinfektion Schmiermittel ist ratsam, für das Überleben Studien. Darüber hinaus kann Schmiermittel mit örtlicher Betäubung Wirkung erleichtert die Katheterisierung Verfahren.
Bei der Durchführung von Arteria und Vena femoralis Katheterisierung, die Wahl des Schiffes Kathetern und wie sie gesichert sind unterschiedlich zwischen Nicht-Überleben und das Überleben Studien, vor allem, wenn Katheter für einen längeren Zeitraum 6 sind implantiert. Zum Beispiel Katheter für chronische Implantation sollte hoch biokompatibel, haben Retentionsperlen oder Manschetten für die Befestigung sowie nicht traumatisieren der Gefäßwand im Laufe der Zeit, und veranlassten eine Thrombose oder Erosion 6.
Im vorliegenden Video, verwenden wir ein geschlossenes System mit Druckluft für transcardial Perfusion mit Strom versorgt. Eine weitere Möglichkeit ist, ein System von der Schwerkraft angetrieben verwenden. Der Vorteil der Schwerkraft-Systeme im Vergleich zu Systemen unter Verwendung von Druckluft ist, dass sie einfach, effizient sind, und stellen keine Gefahr von Druckluft in das Gefäßsystem. Jedoch ändert sich der hydrostatische Druck durch die Schwerkraft-Systeme ausgeübt kontinuierlich während der Perfusion, und dies kann die histologischen Ergebnisse 15 beeinflussen. Je nachdem, welche Art von histopathologischen Untersuchungen will man nicht, so kann es vorteilhaft sein, das Tier mit heparinisierten Kochsalzlösung ersten perfuse. Dies ist insbesondere bei der Durchführung importantance Immunfluoreszenzfärbung um Autofluoreszenz Probleme, die durch Erythrozyten zu vermeiden. Außerdem, wenn das Organ von Interesse ist das Gehirn, könnten die absteigende Aorta abgeklemmt, um zu retten Fixativ werden. Doch bei Schweinen, bringt dieser Schritt zusätzliche sezieren und das Verfahren zu verlängern.
The authors have nothing to disclose.
Die Studie wurde finanziell von der Lundbeck Foundation, The Karen Elise Jensen-Stiftung, The Health Research Fund der Zentrale in Dänemark Region und das Institut für Klinische Medizin der Universitätsklinik Aarhus unterstützt. Wir erkennen dankbar die geschickte Hilfe von Donald F Smith, Anders Steen Sörensen, Henrik Soerensen, Asbjoern Ettrup-Christensen, und das Personal an Paaskehoejgaard.
Procedure | Equipment | Company | Catalogue-number |
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Intubation | |||
Respirator | Datex-Ohmeda S/S Avance, GE Healthcare | 1009-9002-000 | |
Suction with blunt tip | Unomedical | 34091181 | |
Laryngoscope | Miller | 85-0045 (Laryngoscope set) | |
Endotracheal tube 5.5 mm ID | Smiths Medical International Ltd. | 100/199/055 | |
Stylet | Hudson RCI | 5-151001 | |
Syringe 5ml | |||
Stethoscope | Martin | 17-262-00 | |
Bladder catherization | |||
AquaFlate glycerine silicone Foley catheter 8-French with stylet | Rüsch | 178003 | |
Speculum nasal | Martin | 36-859-50 | |
Speculum rectal | Martin | 30-613-15 | |
Blunt-tip forceps | Martin | 13-374-16 | |
Catheter lubricant gel | |||
Cathejell Lidocain | Montavit | CJL08501 | |
Instillagel Comb. | Farco Pharma | 08-40-200 | |
A4 Urine drainage bag | Unomedical | 38 155 1S | |
Adhesive tape | |||
Femoral artery and vein catherization </ | |||
Scalpel | Martin | 10-295-11 | |
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Tissue forceps | Martin | 12-100-14 | |
Small blunt-tip surgical forceps | Martin | 13-375-13 | |
Small self-retaining Tissue retractor | Martin | 15-753-13 | |
Needleholder | Martin | 20-634-14 | |
Surgical swaps | |||
Suture with needle | |||
Saline | |||
Heparine | LEO | 585679 | |
18-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393206 | |
4-French brite tip sheaths with introducer and Seldinger guide wire | Cordis | 154-2629-1/0017 | |
Transcardial perfusion | |||
Pressurized perfusion system | Home made from parts available in most professional hardware stores | ||
Fume extraction system | Gram A/S | 01750000 and 0303700 | |
Perfusant 5L | |||
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Bone shears | F.S.T | 16150-24 | |
Large curved tip self-holding forceps | Martin | 13-421-18 | |
Self retaining sternal retractor | Rudolf Medical | 7520-10 | |
Pentobarbital | The Royal Veterinary and Agricultural University (KVL) | 200 mg/ml | |
22-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393202 |