Injection de sang autologue au modèle spontané Hémorragie intracérébrale chez la souris
Summary
Le modèle d'injection de sang autologue d'hémorragie intracérébrale chez la souris décrites dans ce protocole utilise la technique de double injection pour minimiser le risque de reflux du sang jusqu'à la piste d'aiguille, pas d'anticoagulants dans le système de pompage, et élimine tous les espaces morts et tuyaux extensibles dans le système.
Abstract
Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model. While ICH accounts for 10-15% of all strokes, there remains no specific effective therapy. The autologous blood injection model in mice involves the stereotaxic injection of arterial blood into the basal ganglia mimicking a spontaneous hypertensive hemorrhage in man. The response to hemorrhage can then be studied in vivo and the neurobehavioral deficits quantified, allowing for description of the ensuing pathology and the testing of potential therapeutic agents. The procedure described in this protocol uses the double injection technique to minimize risk of blood reflux up the needle track, no anticoagulants in the pumping system, and eliminates all dead space and expandable tubing in the system.
Protocol
Discussion
Ce modèle chirurgical de l'hémorragie intracérébrale chez des souris en utilisant les résultats autologues de sang dans l'artère la queue un modèle reproductible d'hémorragie spontanée ganglions basaux. Un modèle chez la souris CIH offre l'avantage de la disponibilité des animaux transgéniques pour étudier la physiopathologie, mais leur petite taille les rend interventions neurochirurgicales techniquement plus difficile que dans les grands animaux.
Le modèle de …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Le travail a été financé par une bourse de l'Institut pour la médecine translationnelle et de thérapeutique, et une bourse de formation de l'Institut de médecine et d'ingénierie (T32HL007954) à l'Université de Pennsylvanie et de l'Marlene L. Cohen et Jérôme H. Fleisch Scholar Subvention à la University of Connecticut Health Center (LHS) et NIH NS-029331 (FAW).
Materials
Stereotaxic frame for mouse neurosurgery (Stoelting, 51925)
Microinfusion pump and processor (UMP-3 and Micro4, World Precision Instruments, Sarasota, FL)
Mouse warmer (Stoelting, 50300)
Inhalational mouse anesthesia (Braintree Scientific, EZ-AF9000)
25 μL gastight borosilicate Hamilton syringe with coated plunger and no needle
(Hamilton company, Reno, NV, 1702RN syringe: 765401, ferrule: 30949, spacer: 30946)
fused silica needle cut to 2 cm length (Hamilton, 17739)
*note Hamilton syringe and fused silica needle may be reused for multiple surgeries if sterilized prior to each surgery. These materials are crucial to avoid blood clotting.
Sterile surgical gloves
Surgical gown, bonnet and mask
Betadine
75% ethanol
sterile 27 g needle (single use)
sterile 1 cc syringe (single use)
sterile surgical blade
Cidex
sterile water
buprenorphine and isoflurane
sterile gauze
paraffin wax paper squares
Veterinary surgical glue (Vetbond, 3M, St. Paul, MN)
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