Подготовка Мышь гипофиза Иммуноген для индукции экспериментального аутоиммунного гипофизит
Summary
Аутоиммунные гипофизит могут быть воспроизведены у мышей путем введения экстракта мыши белки гипофиза.
Abstract
Аутоиммунные гипофизит является хроническое воспаление гипофиза причиной или сопровождаться аутоиммунных 1. Он традиционно считается редким заболеванием, но отчетность заметно возросла в последние годы. Гипофизит, по сути, развивается не редкость, как "побочный эффект" у онкологических пациентов, получавших антитела, которые блокируют рецепторы тормозных экспрессируется на Т-лимфоциты, таких как CTLA-4 2 и PD-1 рецепторов. Аутоиммунные гипофизит могут быть вызваны экспериментальным путем введения мышам с гипофизом белки смешать с адъювантной 3. В этом видео статье мы покажем, как извлекать белки из мыши гипофиза и как подготовить их в форму, пригодную для индуцирования аутоиммунных гипофизит в SJL мышей.
Protocol
Discussion
Несмотря на то что первый пациент с аутоиммунными гипофизит сообщалось, в 1962 году 4, патогенных гипофиза аутоантигенов еще предстоит идентифицировать 5. Экспериментальные модели на животных могут быть очень полезны в выявлении таких аутоантигенов, содействие открытию биом…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана NIH грант DK080351 к ПК.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 15-ml Falcon tubes | ||||
| homogenization buffer | ||||
| phosphate buffered saline | ||||
| protease inhibitor cocktail | ||||
| Polytron homogenizer | ||||
| BCA assay | Pierce | 23225 | ||
| Complete Freund’s Adjuvant (CFA) | Sigma | F-5881 | ||
| Mycobacterium tuberculosis | Becton Dickinson | 231141 | ||
| 2.5 mL Hamilton gastight syringe | ||||
| 22-gauge micro-emulsifying needle |
References
- Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
- Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
- Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
- Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
- Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
