Vorbereitung der Maus Pituitary Immunogen für die Induktion der experimentellen autoimmunen Hypophysitis
Summary
Autoimmune Hypophysitis kann in Mäusen durch Injektion ein Auszug aus Maus Hypophyse Proteine reproduziert werden.
Abstract
Autoimmune Hypophysitis ist eine chronische Entzündung der Hypophyse verursacht oder begleitet von Autoimmunität 1. Es ist traditionell eine seltene Erkrankung, aber die Berichterstattung hat sich in den letzten Jahren zugenommen. Hypophysitis in der Tat entwickelt sich nicht selten als "Nebenwirkung" bei Krebspatienten mit Antikörpern, die hemmenden Rezeptoren auf T-Lymphozyten, wie CTLA-4 2 und PD-1-Rezeptoren exprimiert Block behandelt. Autoimmune Hypophysitis kann experimentell durch die Injektion von Mäusen mit Hypophysen-Proteine mit einem Adjuvans 3 gemischte induziert werden. In diesem Video-Artikel werden wir zeigen, wie Proteine aus Maus Hypophyse und wie man sie in eine geeignete Form für die Induktion autoimmune Hypophysitis in SJL Mäusen vorbereiten zu extrahieren.
Protocol
Discussion
Trotz der Tatsache, dass der erste Patient mit Autoimmun-Hypophysitis in 1962 4 wurde berichtet, bleiben die pathogenen Hypophyse Autoantigene identifiziert 5 sein. Tiermodelle können sehr nützlich sein, um diese Autoantigene zu identifizieren, Beihilfe zur Entdeckung von Biomarkern, die übersetzbar Patientenversorgung leisten. Dieser Artikel hat eine einfache Verfahrensweise zur Herstellung von Hypophysen-Proteine in einer Form, die geeignet für Induktion autoimmune Hypophysitis bei Vers…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde vom NIH DK080351 zu PC unterstützt.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 15-ml Falcon tubes | ||||
| homogenization buffer | ||||
| phosphate buffered saline | ||||
| protease inhibitor cocktail | ||||
| Polytron homogenizer | ||||
| BCA assay | Pierce | 23225 | ||
| Complete Freund’s Adjuvant (CFA) | Sigma | F-5881 | ||
| Mycobacterium tuberculosis | Becton Dickinson | 231141 | ||
| 2.5 mL Hamilton gastight syringe | ||||
| 22-gauge micro-emulsifying needle |
References
- Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
- Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
- Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
- Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
- Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
