إعداد مستمنع ماوس النخامية للتحريض التهاب النخامية الذاتية التجريبي
Summary
يمكن استنساخها الذاتية التهاب النخامية في الفئران عن طريق حقن مستخرج من البروتينات النخامية الماوس.
Abstract
التهاب النخامية الذاتية هو التهاب مزمن في الغدة النخامية أو بسبب المناعة الذاتية مصحوبة 1. وقد جرت العادة على اعتبار أنه مرض نادر ولكن التقارير قد ازداد بشكل ملحوظ في السنوات الأخيرة. التهاب النخامية ، في الواقع ، لم يتطور بدرجة غير عادية باعتبارها "الآثار الجانبية" في علاج مرضى السرطان مع الأجسام المضادة التي تعمل على منع المستقبلات المثبطة وأعرب عن الخلايا اللمفية تي ، مثل CTLA – 4 2 ومستقبلات PD – 1. يمكن أن يتسبب التهاب النخامية الذاتية تجريبيا عن طريق حقن الفئران مع البروتينات النخامية مختلطة مع مساعد 3. في هذه المقالة الفيديو نظهر كيفية استخراج البروتينات من الغدد النخامية الماوس وكيفية التحضير لها في شكل مناسب لإحداث التهاب النخامية في الفئران SJL الذاتية.
Protocol
Discussion
على الرغم من حقيقة ان تم الابلاغ عن اول مريض مع التهاب النخامية الذاتية في عام 1962 4 ، والمسببة للأمراض الغدة النخامية autoantigens لا يزال يتعين تحديدها 5. نماذج حيوانية يمكن أن تكون مفيدة جدا لتحديد هذه autoantigens ، والمساعدة في اكتشاف المؤشرات الحيوية التي هي ترجم?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح DK080351 إلى الكمبيوتر.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 15-ml Falcon tubes | ||||
| homogenization buffer | ||||
| phosphate buffered saline | ||||
| protease inhibitor cocktail | ||||
| Polytron homogenizer | ||||
| BCA assay | Pierce | 23225 | ||
| Complete Freund’s Adjuvant (CFA) | Sigma | F-5881 | ||
| Mycobacterium tuberculosis | Becton Dickinson | 231141 | ||
| 2.5 mL Hamilton gastight syringe | ||||
| 22-gauge micro-emulsifying needle |
References
- Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
- Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
- Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
- Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
- Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
