Intracraniële Injectie van adeno-geassocieerde virale vectoren

Intracraniële injectie van virale vectoren ontwikkeld om een fluorescerend eiwit tot expressie is een veelzijdige labeling techniek voor visualisatie van specifieke subsets van cellen in verschillende hersengebieden, zowel in vivo en in de hersenen secties. In tegenstelling tot de injectie van fluorescerende kleurstoffen, virale etikettering biedt targeting van individuele celtypen en is minder kostbaar en tijdrovend dan het vaststellen van transgene muis lijnen. In deze techniek wordt een adeno-geassocieerde virale (AAV) vector geïnjecteerd met behulp van intracranially stereotaxische coördinaten, een micropipet en een automatische pomp voor precieze aflevering van AAV naar het gewenste gebied met minimale schade aan het omringende weefsel. Injectie parameters kunnen worden aangepast aan de individuele experimenten door het aanpassen van het dier leeftijd bij injectie, injectie locatie, het volume van de injectie, de mate van injectie, AAV serotype en de promotor rijden genexpressie. Afhankelijk van de gekozen omstandigheden kunnen viraal geïnduceerde transgenexpressie laten visualisatie van groepen cellen, individuele cellen of fijne cellulaire processen, tot op het niveau van de dendritische spines. Het experiment hier getoond toont een injectie van double-stranded AAV uiten van groen fluorescerend eiwit voor de etikettering van neuronen en glia in de muis primaire visuele cortex.