薬の配達のためのMicroinjections、ウイルスベクター、または細胞移植で脳深部構造のターゲティング
Summary
この記事では、50μmのルーメンでガラスキャピラリー針を作成する方法を示しています。この手法は、大幅に、脳の損傷を軽減薬の受動拡散を最小限に抑え、齧歯類の脳に正確なターゲティングが可能になります。
Abstract
脳実質へMicroinjectionsは薬物、ウイルスベクターまたは細胞移植を実現する重要な手続きです。注射針は、その軌道の間に生成される脳の病変だけでなく、脳が小さいだけでなく、時には複数の注射が必要な場合には特に、マウスの脳内の主要な関心事である。ここでは、大幅に脳の損傷を軽減し、齧歯類の脳に正確なターゲティングが可能な50μmの内腔を持つガラスキャピラリー針を製造する方法を示しています。このメソッドは、少量の配信が可能になります（20〜100 NLから）、出血のリスクを軽減し、脳実質への薬剤の受動拡散を最小限に抑えます。キャピラリーガラス管の異なるサイズを使用して、または針の内腔を変更することにより、物質や細胞のいくつかのタイプを注入することができます。ガラス毛細管とMicroinjectionsはインジェクション技術と小型げっ歯類での最小限の巻き添え被害をターゲティング脳深部に有意な改善を表しています。
Protocol
Discussion
方法は、脳に非常に正確な場所に薬物やウイルスベクターのほとんどを提供するために非常に便利ですこのビデオで示した。この技術の主な利点のいくつかは、ターゲットポイント、注射の正確さと脳の病変や消化管の損傷1、2、5、6の小さいサイズの信頼性です。かつて技術はmistargetingの範囲が50μm2、1以下をすべき標準化されています。細胞移植は、より広い、100から150μm?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
OG – PはCONACyTの助成金（CB – 2008から101476）とFRABA（10分の686）によってサポートされていました。 AQ – Hは、国立衛生研究所、ハワードヒューズ医学研究所、ロバートウッドジョンソン財団とメリーランド州の幹細胞財団によってサポートされています。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Capillary glass tube | Wiretrol I | 5-000-1001 | ||
| Micropipette puller | Kopf | Model 730 | ||
| Microforge | World Precision Instruments | Model 48000 | ||
| Mineral oil | MSDS | M7700 | ||
| High-vacuum grease | Dow Corning | 05054-AB | ||
| Anesthesia: 2.5% Avertin | 2,2,2-tribromoethanol + tert-amyl alcohol, 1:1 w/v | |||
| Heater pad | Mastex | Model 900 | ||
| Stereotactic device | Kopf | Model Kopf-900 | ||
| Surgical scalpel blade # 15 | Medi-Cut | |||
| Micro driller | Ideal Micro Drill | 67-1000 | ||
| Fine forceps | Fine Scientific Tools | |||
| 1-μL Micropipette | Rainin | |||
| Parafilm M. | ||||
| Surgical microscope | Zeiss | Vasiorkop with Contraves system | ||
| Microinjector | Narishige | Model MO-10 |
References
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