Ciblage des structures cérébrales profondes avec des microinjections de livraison des médicaments, des vecteurs viraux, ou de cellules
Summary
Dans cet article, nous montrons une méthode pour faire des aiguilles capillaires en verre avec une lumière de 50 um. Cette technique réduit considérablement les dommages au cerveau, minimise la diffusion passive des médicaments et permet un ciblage précis dans le cerveau des rongeurs.
Abstract
Microinjections dans le parenchyme cérébral sont importantes procédures pour délivrer des médicaments, des vecteurs viraux ou des greffes de cellules. La lésion du cerveau qui produit une aiguille injectant au cours de sa trajectoire est une préoccupation majeure en particulier dans le cerveau de souris pour non seulement le cerveau est petit, mais aussi parfois de multiples injections sont nécessaires. Nous montrons ici une méthode pour produire des aiguilles capillaires en verre avec une lumière de 50 um ce qui réduit considérablement les dommages au cerveau et permet un ciblage précis dans le cerveau des rongeurs. Cette méthode permet une livraison de petits volumes (de 20 à 100 nl), réduit les risques hémorragiques, et minimise la diffusion passive des médicaments dans le parenchyme cérébral. En utilisant différentes tailles de tubes capillaires en verre, ou en changeant la lumière aiguille, plusieurs types de substances et de cellules peuvent être injectées. Microinjections avec un tube capillaire en verre représentent une amélioration significative dans les techniques d'injection et cérébrale profonde ciblage avec un minimum de dommages collatéraux chez les petits rongeurs.
Protocol
Discussion
La méthode a montré dans cette vidéo est très utile pour fournir la plupart des médicaments ou des vecteurs viraux dans des endroits très précis dans le cerveau. Certains des principaux avantages de cette technique sont la fiabilité du point de ciblage, de l'exactitude des injections et la petite taille de la lésion cérébrale et 1 dommages voies, 2, 5, 6. Une fois la technique standardisée de la gamme des erreurs de ciblage devrait 50 microns ou moins 1, 2. Greffes de cel…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
OG-P a été soutenue par le CONACyT s subvention (CB-2008-101476) et FRABA (686/10). AQ-H soutenue par le National Institute of Health, le Howard Hughes Medical Institute, la Fondation Robert Wood Johnson Foundation et le Maryland, les cellules souches.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Capillary glass tube | Wiretrol I | 5-000-1001 | ||
| Micropipette puller | Kopf | Model 730 | ||
| Microforge | World Precision Instruments | Model 48000 | ||
| Mineral oil | MSDS | M7700 | ||
| High-vacuum grease | Dow Corning | 05054-AB | ||
| Anesthesia: 2.5% Avertin | 2,2,2-tribromoethanol + tert-amyl alcohol, 1:1 w/v | |||
| Heater pad | Mastex | Model 900 | ||
| Stereotactic device | Kopf | Model Kopf-900 | ||
| Surgical scalpel blade # 15 | Medi-Cut | |||
| Micro driller | Ideal Micro Drill | 67-1000 | ||
| Fine forceps | Fine Scientific Tools | |||
| 1-μL Micropipette | Rainin | |||
| Parafilm M. | ||||
| Surgical microscope | Zeiss | Vasiorkop with Contraves system | ||
| Microinjector | Narishige | Model MO-10 |
References
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