Denne videoen beskriver en teknikk for å forberede brystkreftcelleprøver for metabolittprofilering. Brystkreftceller behandles med østradiol, som binder seg til østrogenreseptor alfa og forårsaker endring i metabolittsammensetningen.
Protocol
1. Metabolomics Analyse Prøvepreparering Cellekultur og behandling Frø 400.000 MCF7 celler per 10 cm plate i vekstmedium. For hver behandling forberede tre prøver. Bruk to plater i hvert utvalg for å få nok celler til søket. På dag 3, fjern mediet og tilsett 5 ml friskt medium med eller uten10-8 M Østradiol eller E2 til cellene. Behandle cellene i 24 timer (37 °C i fuktet 5 % CO2-atmosfære). Eksempel på samling Tilsett 5 ml iskald 1x PBS ti…
Sample Preparation for Metabolomics: A Method to Prepare Cell Samples for Metabolite Profiling. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20227, doi: (2023).