प्राथमिक मैमोस्फीयर का उत्पादन: सेल शक्ति निर्धारित करने के लिए एक तकनीक
Published: April 30, 2023
Abstract
स्रोत: लोम्बार्डो एट अल., मानव स्तन कैंसर ऊतकों और सेल लाइनों से मैमोस्फीयर गठन परख। जे विस Exp। (2015).
इस वीडियो स्तन कैंसर सेल लाइनों से कैंसर स्टेम कोशिकाओं को अलग करने का वर्णन करता है । हम इन कैंसर स्टेम सेल को आत्म-नवीकरण का आकलन करने और क्षेत्र बनाने की दक्षता की गणना करने के लिए प्राथमिक मैमोसेयर उत्पन्न करने के लिए संस्कृति करते हैं, जिससे विभिन्न बीज घनत्वों में तुलना की अनुमति मिलती है।
Protocol
1. मानव स्तन कैंसर सेल लाइनों से प्राथमिक स्तन रोगों की पीढ़ी नोट: एक बाँझ संस्कृति हुड के तहत निम्नलिखित चरणों का प्रदर्शन करें। 2 एमएम एल-ग्लूटामाइन, 100 यू/एमएल पेनिसिलिन, 100 यू/एमएल स?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| DMEM/F12 | Lonza | CC-3151 | |
| 2 mM L-glutamine | Sigma Aldrich | G8540 | |
| 100 U/ml Penicillin & Streptomycin | Sigma Aldrich | P4083 | |
| 20 ng/ml Recombinant human epidermal growth factor (EGF) | Sigma Aldrich | E9644 | |
| 20 ng/ml Recombinant human basic fibroblast growth factor (bFGF) | R&D systems | 233-FB-025 | |
| 1x B27 supplement | Invitrogen | 17504-044 | |
| Phosphate buffered saline (PBS) | Thermo Scientific | 12399902 | |
| 0.5% trypsin/0.2% EDTA | Sigma Aldrich | 59418C | |
| Fetal calf serum | First Link UK | 02-00-850 | |
| Trypan blue | Sigma Aldrich | 93595 | |
| Low attachment 6-well plates | Corning | CLS3814 |
Cite This Article
Generation of Primary Mammospheres: A Technique to Determine Cell Potency. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20211, doi: (2023).