Un<em> In vivo</em> Sistema de imagen se utiliza para generar mediciones cuantitativas de la infección murina con los protozoos tripanosomátidos<em> Leishmania</em>. Este es un método no invasivo y no letales para la detección de parásitos que expresan luciferasa en muchos tejidos en el curso de las enfermedades crónicas<em> Leishmania</em> Spp. infección.
Distintas especies de<em> Leishmania,</em> Un protozoo parásito de la familia<em> Trypanosomatidae</em>, Suelen causar diferentes manifestaciones de la enfermedad humana. Las formas más comunes de la enfermedad son la leishmaniasis visceral (LV) y la leishmaniasis cutánea (LC). Los modelos de ratón de la leishmaniasis son ampliamente utilizados, pero la cuantificación de la carga de parásitos durante la enfermedad requiere murino ratones que ser sacrificados en varias ocasiones después de la infección. Cargas parasitarias son medidos ya sea por microscopía, la limitación de ensayo de dilución, o la amplificación de ADN del parásito qPCR. La<em> In vivo</em> Sistema de imágenes (IVIS) tiene un paquete de software integrado que permite la detección de una señal bioluminiscente asociadas a las células en los organismos vivos. Tanto para minimizar el uso de los animales y para seguir a una infección de forma longitudinal en las personas, en modelos in vivo para las imágenes<em> Leishmania</em> Spp. causando VL o CL se establecieron. Los parásitos fueron modificados para expresar la luciferasa, y éstos se introdujeron en los ratones ya sea por vía intradérmica o intravenosa. Las mediciones cuantitativas de la bioluminiscencia de conducción luciferasa de los transgénicos<em> Leishmania</em> Parásitos dentro del ratón se realiza mediante IVIS. Ratones individuales se pueden visualizar varias veces durante los estudios longitudinales, lo que nos permite evaluar la variación inter-animal en la inoculación del parásito experimental inicial, y para evaluar la multiplicación de los parásitos en tejidos de ratón. Los parásitos se detectan con una alta sensibilidad en lugares cutáneos. Aunque es muy probable que la señal (fotones / segundo / parásito) es menor en los órganos viscerales profundos que la piel, pero las comparaciones cuantitativas de las señales de superficial en comparación con los sitios profundos no se han hecho. Es posible que el número de parásitos entre las partes del cuerpo no se pueden comparar directamente, aunque la carga de parásitos en los mismos tejidos pueden ser comparados entre los ratones. Ejemplos de una especie visceralizing (<em> L. infantum chagasi</em>) Y una especie que causa la leishmaniasis cutánea (<em> L. mexicana</em>) Se muestran. El procedimiento de IVIS pueden ser utilizados para el seguimiento y análisis de modelos de animales pequeños de una amplia variedad de<em> Leishmania</em> Especies causantes de las diferentes formas de la leishmaniasis humana.
El sistema de imágenes in vivo (IVIS) proporciona un método para obtener imágenes de animales enteros o en vivo modelos de infección experimental de imágenes de diferentes formas de leishmaniasis. 18,16 La spp Leishmania. los parásitos pueden ser modificados para expresar la luciferasa de luciérnaga en un nivel que se detecta en vivo con la tecnología de imagen IVIS. Una de las principales ventajas de este método es que permite la visualización no invasiv…
The authors have nothing to disclose.
Este trabajo fue financiado en parte por una subvención de revisión al Mérito del Departamento de Asuntos de Veteranos, por las subvenciones del NIH AI045540, AI067874, AI076233-01 y AI080801 (MEW), y por AI29646 (SMB). El trabajo fue realizado en parte en la financiación de la TC y la JG por el NIH T32 AI07511.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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D-Luciferin Potassium Salt | Reagent | Caliper LifeSciences (Formerly Xenogen) | 122796 | |
IVIS Imaging System 200 Series | Equipment | Caliper LifeSciences | Other IVIS models that can be used include: Lumina II, Lumina XR, Kinetic, and Spectrum. |