아밀로이드에 대한 앞쪽에 지방 패드의 FNA 공연 및 처리

소개 전신 아밀로이드증는 총칭 아밀로이드로 불리는 각종 단백질의 세포외 증착을 말합니다 높은 변수 질병입니다. 베타 내기 구성이 아밀로이드 원섬유의 증착은 관련 기관에 따라 다양한 임상 프레 젠 테이션에 연결됩니다. 같은 심장, 간, 및 / 또는 신장 등 중요 장기의 참여가있을 때 체계 아밀로이드증의 가장 임상적으로 관련성이 높은 발현이 설명되어 있습니다. 역사적으로, 이러한 참여 기관은 아밀로이드의 존재를 설명하기 biopsied 것입니다. 이 적당히 침입 절차는 출혈을 포함하여 상당한 위험을 실시. 지방 패드의 열망 그 이후 전신 아밀로이드증 1 아밀로이드의 검출에 대한 신뢰성 및 비침 투 방법을 제공하기 위해 표시되었습니다. 이 절차는 작은 혈관 벽 2 부족한 아밀로이드 예금을 평가하기위한 fibroadipose 조직을 검색할 국소 마취하에 앞쪽에 복벽에 피하 지방의 지방 흡입에 근본적으로 비교할 수 있습니다. 조직에서 아밀로이드 식별에 가장 자주 활용 방법은 콩고 레드 스테인드 섹션 편광 현미경 세 이하 시각 때 본 특성 사과 녹색 복굴절 패턴 남아 있습니다. 지방 패드의 열망이 수행되는 경우, 콩고 레드 얼룩이 직접 발랐습 슬라이드 또는 aspirated 지방 조직의 세포 블록 준비 중에서 할 수 있습니다. 그러나, 아밀로이드증의 초기 단계에서 환자는 크게 4,5 콩고 레드 스테인드 셀 블록 섹션의 감도를 감소 부족한 아밀로이드 예금을 보유하고 있습니다. 전자 현미경에 의해 지방 패드 aspirates의 Ultrastructural 평가 나은 재현성 향상 감도 4했습니다. 따라서, 그것은 셀 블록 모두 준비 및 전자 현미경 2 수행하기위한 모든 지방 패드 aspirates를 제출하는 것이 좋습니다. 지방 패드의 열망이 상대적으로 낮은 비용과 체계적 아밀로이드증를 진단하기 위해 조직을 얻기위한 비침 투 방법입니다. 이 문서는 전자 현미경에 의해 콩고 붉은 얼룩과 ultrastructural 평가 모두에 대한 표본을 제출하는 샘플 처리에 대한 자세한 내용과 함께 지방 패드 열망 절차를 설명합니다. 이 비디오에서는, 우리는 최적의 진단 자료를 검색하려면이 재현성 및 간단한 절차를 보여줍니다. 1. 앞쪽에 지방 패드의 FNA 공연 지역의 A.의 Anesthetization (그림 1 & 2) 알코올 면봉이나 특정 기관에서 선호하는 피부 클렌징 에이전트를 사용하여 정중선에 측면 복부 하단 사분면 지역과 배꼽 (그림 1) 아래의 피부를 청소하십시오. 로 표시 펜으로 그림 1에 표시된 2 X 2인치에 대한 편능형 모양의 영역을 표시합니다. 1 % 대기음 약 10 ML은 18G 바늘로 lidocaine. 25G 1 ½ 첨부 주사기에 바늘 인치합니다. 액체가 적절하고 기포가 존재하지 않습니다 때까지 플런저를 누르면서 똑바로 주사기를 감청하여 갇혀 공기를 제거합니다. 그림 2에 표시된 이미 표시된 편능형 지역의 국경을 따라 마취. 단지 지점에서 피부 아래의 25G 바늘을 삽입하여 시작하고 신중하게 X. 당​​신이 선박 내에되지 않도록하기 위해 주사기의 플런저에 다시 세워 지점 subcutaneously 바늘을 밀어. 그런 다음 천천히 바늘이 바늘이 지점 (그림 2a3)에서 피부의 나와 아무말도없이 A를 가리 키도록 철수하면서 lidocaine 2.5 ML (10 ML의 주사기에서 lidocaine의 ¼ 정도)까지 침투하는 플런저를 밀어. 바늘로 여전히 피부 밑에 지점 Y (그림 2a4)쪽으로 방향을 변경하고 지점 Y (그림 2b1)에 subcutaneously 바늘을 밀어. 이전처럼 천천히 포인트를 통해 바늘을 철수하면서 바늘이 선박에 아니라는 것을 확인하고 lidocaine의 약 2.5 ML 하는걸 (2b4 통해 그림 2b3). Y에 X와 B (2d4을 통해 그림 2c1)를 가리키는 B 지점에서 B와 분배 lidocaine 피하부터 유사한 단계를 반복합니다. 모여서에서 출혈을 방지하고 살균 게이지의 한 조각이 회사 응용 프로그램에 의해 B. 이제 지역이 인접 unanesthetized 가볍게 피부와 비교하여, 팁 / 면화 거즈 조각의 모서리로 anesthetized 편능형 이내에 피부를 만져 anesthetized 있는지 확인합니다. B. 지방 흡인 패드 (그림 3) 공연 (이전 지방 패드 열망의 성능에 국소 마취의 응용 프로그램은 지역 및 개인 환경 설정에 따라 우회 수 있습니다. 앞쪽에 지방 패드 열망에 대해 올바르게 수행 FNAB 절차가 한 미친놈에 완료할 수 있습니다.하지만, 개별 환자의 고통 임계값에 따라 , 피하 지방 조직에 앞뒤로 18G 바늘의 작전을하는 것은 상대적으로 distres입니다노래. anesthetization 방법은 여기 25G 바늘로 두 거시기의 효과를 달성하고 절차를 개선 인내와 고통을 averts 설명.) 10 ML의 주사기에 18G 1 ½ 인치 바늘을 조립. 적절한 응용 프로그램 및 진공의 릴리스에 대한 주사기 그립 ( "FNAB 그립 / 총")에 주사 바늘 – 어셈블리를 마운트합니다. 정화 및 anesthetized 편능형 영역 (그림 3A) 이내에 피하 지방에 주사 바늘의 끝부분을 삽입합니다. 완전 진공 (그림 3B)를 생성하는 피하 조직에 삽입된 바늘과 주사기의 플런저를 철회. 진공을 유지하고 피하 지방 (3i를 통해 그림 3C)에 다양한 방향으로 앞뒤로 바늘을 기동. 각 스트로크는 바늘이 피부 밖으로 나와 아무말도없이 선택된 바늘의 길이와 최대한 오래해야합니다. 최대 샘플링하는 것은 각 뇌졸중 (그림 3i)와 방향을 변경하여 이루어진다. serosa에 접선과 복막 캐비티의 펑쳐링 피하기 위해 피부 표면에 평행하게 바늘의 방향을 유지하는 것이 중요합니다. fibroadipose 조직은 주사기에 축적되어. 일단 충분한 fibroadipose 조직 파편이 (조각 풍부한 혈액 혼합 시료 최대 1 ML) 검색되며, 완전히 진공을 해제하고 바늘을 (그림 3K)를 제거하십시오. 환자를 받거나 조수는 혈액의 넘쳐 흐름을 방지하기 위해 거즈의 패드와 프로 시저의 지역에서 확고한 압력을 적용합니다. 2. 스피스먼 처리 전자 현미경 (그림 4B)에 대한 글루 타 알데히드 용액에 fibroadipose 조직 최소한 5-6 조각을 놓으십시오. 기관 프로토콜에 따라 fibroadipose 조직 조각 몇 얼룩은 두 개의 슬라이드 (그림 4A) 사이를 확산하여 준비 수 있습니다. 나머지 자료는 주사기 응고 (이것은 응고 시간에 따라 5-7 분 정도 걸릴 수 있습니다) (그림 4C)에 허용됩니다. 응고된 fibroadipose 조직 재료는 주사기와 부유 (그림 4C2)의 벽에서 dislodged되도록 주사기에 포르말린 10 % 대기음. 주사기 (그림 4C3)에서 플런저를 제거하고 노즐 끝 (그림 4C4) 반대 주사기의 열린 월말부터 10 % 포르말린 용기에 응고된 fibroadipose 조직을 전송할 수 있습니다. 적절하게 컨테이너를 라벨 및 전자 현미경을위한 글루 타 알데히드와 H & E 섹션 콩고 레드 현미경을 편광에 따라 평가를 위해 얼룩을 위해 포르말린을 제출해주십시오. 얼룩이 준비가되어있다면, 그들은 개별 연구소의 프로토콜에 따라 처리될 수 있습니다. 그림 1. 앞쪽에 지방 패드의 FNAB 위해 anesthetized 수 영역입니다. 그림 2. 지역의 Anesthetization. 그림 3. 앞쪽에 지방 패드의 FNAB 공연. 그림 4. 앞쪽에 지방 패드 처리하면 아밀로이드 예금을 검출 실험에 제출하는 대기음. 3. 대표 결과 그림 5. fibroadipose 조직 조각의 작은 혈관의 벽에 아밀로이드. Fibroadipose 조직은 포르말린 – 처리, 파라핀 콩고 레드 물들일, 임베디드, 가벼운 현미경을 편광으로 조사되었다. 작은 혈관의 벽에 아밀로이드는 애플 그린 복굴절 (흰색 화살표)를 보여줍니다. 그림 6. 조직 아밀로이드증이 부족해. 애플 그린의 복굴절은 결석 다른 환자의 조직에서 아밀로이드증없이. 콜라겐 섬유의 블루 복굴절은 (흰색 화살표), 거의 모든 표본에 일반적으로 존재한다. 그림 7. 혈관 벽에 아밀로이드와 일치 원섬유. 직선이 아닌 분기의 전자 현미경, 혈관 벽에 아밀로이드의 형성 8-10 나노미터 직경 원섬유을 무작위로 – 흩어져.