إعداد الأجنة المجهري للإلكترون من ذبابة الفاكهة أنبوب القلب الجنينية
Summary
نحن تصف عملية لترسيخ وتثبيت ، sectioning ، والتصوير من مرحلة متأخرة<em> ذبابة الفاكهة</em> الأجنة المجهري للإلكترون Trasmission للأنبوب القلب الجنينية. هذا الأسلوب يسمح للتصور من تجويف أنبوب القلب وكذلك الغشاء القاعدي ، والتي خطوط تجويف القلب.
Abstract
في التشكل من<em> ذبابة الفاكهة</emوقد برزت> أنبوب القلب الجنينية كنظام نموذجا قيما لدراسة الهجرة الخلية ، خلية خلية التصاق ويتغير شكل الخلية أثناء التطور الجنيني. واحدة من التحديات التي تواجهها في دراسة هذا الهيكل هو أن تجويف أنبوب القلب ، فضلا عن ميزات غشاء التي تعتبر حاسمة بالنسبة لتشكيل أنبوب القلب ، ويصعب تصور الأجنة في جبل بأكمله ، وذلك بسبب صغر حجم أنبوب القلب وداخل الفضاء lumenal نسبة إلى الجنين. استخدام المجهر الإلكتروني انتقال يسمح للتضخم أعلى من هذه الهياكل ويعطي ميزة لفحص الأجنة في المقطع العرضي ، الذي يكشف بسهولة حجم وشكل التجويف. في هذا الفيديو ، ونحن من التفاصيل عن عملية التثبيت موثوق بها ، والتضمين ، والمرحلة المتأخرة من sectioning<em> ذبابة الفاكهة</em> أجنة من أجل رؤية تجويف أنبوب القلب ، فضلا عن الهياكل الخلوية الهامة بما في ذلك خلية خلية تقاطعات والغشاء القاعدي.
Protocol
Discussion
برزت التشكل من القلب الجنينية ذبابة الفاكهة أنبوب كنظام نموذجا قيما لدراسة التصاق الخلايا ويتغير شكل الخلية أثناء التطور الجنيني. واحدة من التحديات التي تواجهها في دراسة هذا الهيكل هو أن تجويف أنبوب القلب من الصعب تصور الأجنة في جبل بأكمله. وقد أثبتت هذه التقنية تظاهروا في هذا الفيديو ، الذي تم تكييفه من الإجراءات المذكورة سابقا 1-2 ، لتكون ناجحة في كفاءة وموثوق بها وتحليل عدد كبير من المورثات لأنبوب تجويف القلب وتشكيل 3.
Acknowledgements
وأيد عملنا على تشكيل أنبوب القلب عن طريق منحة من مؤسسة العلوم الوطنية (ID جائزة 0744165) لSGK
References
- Tepass, U., Hartenstein, V. The Development of Cellular Junctions in the Drosophila embryo. Dev. Biol. 161, 563-596 (1994).
- Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, S. . Drosophila Protocols. , (2000).
- Santiago-Martinez, E., Soplop, N. H., Patel, R., Kramer, S. G. Repulsion by Slit and Roundabout prevents Shotgun/E-cadherin-mediated cell adhesion during Drosophila heart tube lumen formation. J. Cell Biol. 182, 241-248 (2008).
