/

/

短いビオチン化RNAを用いたRNA結合タンパク質の最適化された定量的プルダウン解析(英語)

JoVE Journal
Bioquímica

This content is Free Access.

JoVE Journal Bioquímica

An Optimized Quantitative Pull-Down Analysis of RNA-Binding Proteins Using Short Biotinylated RNA

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

短いビオチン化RNAを用いたRNA結合タンパク質の最適化された定量的プルダウン解析(英語)

DOI:

10.3791/64923-v

•

07:55 min

•

February 17, 2023

•

Núria Crua Asensio, Stefano Rizzieri, Alessandro Cuomo, Gian Gaetano Tartaglia³, Elsa Zacco

¹Center for Human Technology,Italian Institute of Technology (IIT), ²Department of Experimental Oncology,European Institute of Oncology (IEO), ³Department of Biology and Biotechnologies ‘Charles Darwin’,Sapienza University of Rome

Capítulos

00:05Introduction
00:42Total Protein Harvest and Protein Concentration Determination
01:48Bead Preparation
03:12Bead Loading and Protein Binding on Beads
04:13Washing of Nonspecific Binders
04:53Elution of Specific Binders
05:39Results: Quantification and Validation of Protein Interactors of Specific RNA Sequences
07:24Conclusion

Summary

Tadução automática

ここでは、ヒト細胞からの総タンパク質抽出物、ビオチン化RNAでコーティングされたストレプトアビジンビーズ、および質量分析を使用して、特定のRNA配列のタンパク質相互作用因子を発見、定量、および検証するための最適化された in vitro メソッドを紹介します。

Tags

Keywords: RNA-binding Proteins Pull-down Analysis Biotinylated RNA Protein Complexes HEK 293T Cells Lysis Buffer Magnetic Beads Yeast TRNA RNA Oligonucleotide

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

非コード小型RNA定量化のための高密度リポタンパク質の単離

赤外蛍光色素で標識されたオリゴヌクレオチドを使用したゲルシフトアッセイのために最適化されたプロトコル

定量的トランスクリプトーム解析に使用するための種子から高度に精製されたRNAの単離のための効率的な方法

ビオチン化細胞表面タンパク質の精製<em> Rhipicephalus microplus</em>上皮腸細胞

ヒト僧帽弁からのタンパク質抽出のための最適化プロトコル

質量分析を用いた識別 RNA 結合領域のための試料作製

(CARIC) 戦略をキャプチャするキャプチャとクリック化学支援 RNA インタラクトームを用いた RNA 結合タンパク質の同定

PeptiQuick、合理化されたタンパク質結合アッセイのためのバイオチン化ペプチドディスクへの膜タンパク質のワンステップ組み込み

並列反応モニタリングによるユビキチン連鎖解析

成熟米の横断断面(オリザ・サティバ L.ピペットチップを固定化支援として用いた走査電子顕微鏡イメージング用カーネル

Read Article