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Microsampling in der gezielten Massenspektrometrie-basierten Proteinanalyse von Proteinen mit geringer Abundanz
JoVE Journal
Química
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JoVE Journal Química
Microsampling in Targeted Mass Spectrometry-Based Protein Analysis of Low-Abundance Proteins
DOI:

10:21 min

January 13, 2023

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Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:46Preparation of Antibody-Coated Magnetic Beads
  • 03:41Volumetric Absorptive Microsampling and Elution
  • 04:38Digestion of Eluted VAMS
  • 05:30The Capture of Proteotypic ProGRP Using Antibody-Coated Magnetic Beads
  • 07:37Analysis by LC-MS/MS
  • 08:26Results: Analysis of the MS Chromatograms and Base Peak Chromatograms of the Proteotypic Peptide
  • 09:42Conclusion

Summary

Tadução automática

Es wird ein Protokoll zur Bestimmung von Biomarkern mit geringer Abundanz aus getrockneten Serumproben vorgestellt, das am Beispiel des Biomarkers Progastrin-freisetzendes Peptid (ProGRP) veranschaulicht wird. Antikörperbeschichtete magnetische Beads werden zur selektiven Aufreinigung und Anreicherung eines proteotypischen ProGRP-Peptids verwendet. Das eingefangene Peptid wird anschließend mittels Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie analysiert.

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