Journal
/
Neurociência
/
Celltypspecifik proteinrening och identifiering från komplexa vävnader med hjälp av en mutant metionin tRNA-syntetasmuslinje
JoVE Journal
Neurociência
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Neurociência
Cell-Type Specific Protein Purification and Identification from Complex Tissues Using a Mutant Methionine tRNA Synthetase Mouse Line
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Celltypspecifik proteinrening och identifiering från komplexa vävnader med hjälp av en mutant metionin tRNA-syntetasmuslinje

DOI:
10.3791/63713-v

•

07:39 min

•

April 13, 2022

•

, , , , , ,
1Max-Planck-Institute for Brain Research,Synaptic Plasticity Department, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology,Veterinary School, Complutense University of Madrid

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:40Tissue Harvesting, Lysis, and Protein Extraction
  • 03:03Protein Purification
  • 05:28Results: Cell-Type-Specific Protein Labeling with Azidonorleucine
  • 06:35Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Detta protokoll beskriver hur man utför celltypspecifik proteinmärkning med azidonorleucin (ANL) med hjälp av en muslinje som uttrycker ett mutant L274G-metionin-tRNA-syntetas (MetRS*) och de nödvändiga stegen för märkt celltypspecifik proteinisolering. Vi beskriver två möjliga ANL-administreringsvägar i levande möss med (1) dricksvatten och (2) intraperitoneala injektioner.

Tags

Cell-type SpecificProtein PurificationProtein IdentificationMutant Methionine TRNA SynthetaseCell Type Specific ProteinsIn VitroIn VivoImmunofluorescentAlkylationIodoacetamideBuffer ExchangeClick ChemistryAzidonorleucine IncorporationNeutravidin Binding

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

Beredning av Synaptoneurosomes från mus Cortex med en kontinuerliga Percoll-Sackaros densitetsgradient

Isolera LacZ-uttryckande celler från mus Inre öronvävnader med flödescytometri

Isolering och kvantifiering av botulinneurotoxin Från Komplexa matriser med de BoTest Matrix Analyser

Använda Fluorescensaktiverad cellsortering för att Undersök Cell-Type-Specific Gene Expression i råtthjärnvävnad

Rening av Mouse Brain Fartyg

Extern Excite av nervceller Använda elektriska och magnetiska fält i en-och två-dimensionella kulturer

Levande bilder av GLUT4 Protein människohandel mus primära hypotalamus nervceller använder Deconvolution mikroskopi

Snabb och specifika immunmagnetisk isolering av mus primära oligodendrocyter

Kvantifiera heterogen fördelning av ett Synaptic Protein i mus hjärnan med hjälp av immunofluorescens

Rening av Prominin-1+ stamceller från Postnatal Mus Cerebellum

Read Article