Journal
/
Bioquímica
/
Et optimeret enkeltmolekyle pull-down assay til kvantificering af proteinfosforylering
JoVE Journal
Bioquímica
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Bioquímica
An Optimized Single-Molecule Pull-Down Assay for Quantification of Protein Phosphorylation

Et optimeret enkeltmolekyle pull-down assay til kvantificering af proteinfosforylering

DOI:
10.3791/63665-v

•

07:45 min

•

June 06, 2022

•

, , , , , , ,
1Department of Pathology,University of New Mexico School of Medicine, 2Department of Physics and Astronomy,University of New Mexico, 3Comprehensive Cancer Center,University of New Mexico Health Sciences Center

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:53Coverslip Preparation
  • 03:18Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
  • 04:09SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
  • 04:40Image Acquisition
  • 05:45Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
  • 07:19Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Denne protokol beskriver prøveforberedelse og dataanalyse for at kvantificere proteinfosforylering ved hjælp af et forbedret enkeltmolekyle pull-down (SiMPull) assay.

Tags

AI-powered Protein Phosphorylation QuantificationSingle-molecule Pull-down AssaySiMPull ProtocolAntibody LabelingAutofluorescence ReductionSingle-molecule AnalysisPhosphorylation Status Of Individual ProteinsAlternative To Western Blotting And Mass Spectrometry

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/63665?article_type=v

En optimeret protokol for elektroforetisk mobilitet Shift Assay brug af infrarød fluorescerende farvestof-mærkede oligonukleotider
check_url/pt/63665?article_type=v

Oligopeptidkonkurrenceanalyse for phosphoryleringsstedbestemmelse
check_url/pt/63665?article_type=v

Assay for fosforylering og mikrotubulus bindende sammen med lokalisering af Tau Protein i kolorektal cancerceller
check_url/pt/63665?article_type=v

Enkelt-molekyle Manipulation af G-quadruplexes af magnetiske pincet
check_url/pt/63665?article_type=v

Ved hjælp af trefarvet enkelt-molekyle FRET at studere sammenhængen af Protein interaktioner
check_url/pt/63665?article_type=v

Identifikation af Cyclin-afhængig Kinase 1 specifikke fosforylering websteder ved en In Vitro -Kinase Assay
check_url/pt/63665?article_type=v

Kovalente immobilisering af proteiner for enkelt molekyle kraft spektroskopi
check_url/pt/63665?article_type=v

Proteom-wide kvantificering af mærkning homogenitet på enkelt-molekyle niveau
check_url/pt/63665?article_type=v

OaAEP1-Medieret enzymatisk syntese og immobilisering af polymeriseret protein til enkeltmolekylet spektroskopi
check_url/pt/63665?article_type=v

En In Vitro Single-Molecule Imaging Assay til analyse af cap-afhængige oversættelse kinetik

Read Article