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使用200 KV透射电子显微镜常规收集高分辨率冷冻电镜数据集

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

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使用200 KV透射电子显微镜常规收集高分辨率冷冻电镜数据集

DOI:

10.3791/63519-v

•

09:49 min

•

March 16, 2022

•

Adrian Koh*¹, Sagar Khavnekar*², Wen Yang, Dimple Karia, Dennis Cats, Rob van der Ploeg, Fanis Grollios, Oliver Raschdorf, Abhay Kotecha, Daniel Němeček

¹Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific, ²Max Planck Institute of Biochemistry, Molecular Structural Biology, ³Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific

Capítulos

00:04Introduction
01:27Grid Loading, Mapping, and Selection of Best Cryo-EM Grids for Data Collection
02:36Setting up a Data Collection Session in the Single Particle Analysis Software
05:44Final Microscope Alignments Before Starting Data Collection
07:15Results: Gallery of Grids, Cryo-EM Reconstruction of Apo-Ferritin, and Effect of Energy Filtering on Cryo-EM Images
08:56Conclusion

Summary

Tadução automática

大分子的高分辨率冷冻电镜图谱也可以通过使用200 kV透射显微镜来实现。该协议显示了设置精确光学对准、数据采集方案和成像区域选择的最佳实践，这些对于使用200 kV TEM成功收集高分辨率数据集至关重要。

Tags

Cryo-EM 200 KV TEM High-resolution Protein Structure Protein Complexes Molecular Mechanisms Structure-based Drug Design Apoferritin Proteasome Auto Grids Liquid Nitrogen Automated Data Collection Atlas EPU

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