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Micropatterning Transmission Electron Microscopy Griglie per dirigere il posizionamento delle cellule all'interno dei flussi di lavoro della tomografia crioelettronica a cellule intere
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1Department of Biochemistry,University of Wisconsin, Madison, 2Cryo-Electron Microscopy Research Center, Department of Biochemistry,University of Wisconsin, Madison, 3Midwest Center for Cryo-Electron Tomography, Department of Biochemistry,University of Wisconsin, Madison, 4Department of Chemistry,University of Wisconsin, Madison, 5Morgridge Institute for Research
Capítulos
- 00:04Introduction
- 01:25Preparation of Grids for Patterning and Application of the Anti-fouling Layer
- 02:50Applying PLPP Gel
- 03:33Micropatterning
- 06:11Deposition of Extracellular Matrix (ECM) Proteins
- 06:54Results: Micropatterning to Direct Cell Positioning within Whole-cell Cryo-electron Tomography
- 09:17Conclusion
L'obiettivo di questo protocollo è quello di dirigere l'adesione e la crescita cellulare verso aree mirate di griglie per la crio-microscopia elettronica. Ciò si ottiene applicando uno strato antivegetativo che viene ablato in modelli specificati dall'utente seguito dalla deposizione di proteine della matrice extracellulare nelle aree modellate prima della semina cellulare.
