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Micropatterning ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी ग्रिड पूरे सेल क्रायो-इलेक्ट्रॉन टोमोग्राफी वर्कफ़्लो के भीतर प्रत्यक्ष सेल पोजिशनिंग के लिए
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1Department of Biochemistry,University of Wisconsin, Madison, 2Cryo-Electron Microscopy Research Center, Department of Biochemistry,University of Wisconsin, Madison, 3Midwest Center for Cryo-Electron Tomography, Department of Biochemistry,University of Wisconsin, Madison, 4Department of Chemistry,University of Wisconsin, Madison, 5Morgridge Institute for Research
Capítulos
- 00:04Introduction
- 01:25Preparation of Grids for Patterning and Application of the Anti-fouling Layer
- 02:50Applying PLPP Gel
- 03:33Micropatterning
- 06:11Deposition of Extracellular Matrix (ECM) Proteins
- 06:54Results: Micropatterning to Direct Cell Positioning within Whole-cell Cryo-electron Tomography
- 09:17Conclusion
इस प्रोटोकॉल का लक्ष्य क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए ग्रिड के लक्षित क्षेत्रों में सेल आसंजन और विकास को निर्देशित करना है। यह एक एंटी-फाउलिंग परत को लागू करके प्राप्त किया जाता है जो उपयोगकर्ता-निर्दिष्ट पैटर्न में एब्लेटेड होता है, जिसके बाद सेल सीडिंग से पहले पैटर्न वाले क्षेत्रों में अतिरिक्त-सेलुलर मैट्रिक्स प्रोटीन का जमाव होता है।
