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न्यूरॉन्स में सेलुलर ट्रैफिकिंग स्टडीज के लिए एक ट्यूब में मोनो-बायोटाइनलेट रेकॉम्बिनेंट बीडीएनएफ को शुद्ध और सीधे मोनो-बायोटाइनलेट रेकॉम्बिनेंट बीडीएनएफ के लिए एक बेहतर प्रोटोकॉल
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1Department of Physiology, Faculty of Biological Sciences,Pontificia Universidad Católica de Chile, 2Department of Molecular and Cellular Biology, Faculty of Biological Sciences, Center for Aging and Regeneration (CARE UC),Pontificia Universidad Católica de Chile, 3Institute of Biomedical Sciences. Faculty of Medicine and Faculty of Life Sciences,Universidad Andrés Bello, 4Department of Neuromuscular Diseases, UCL Queen Square Institute of Neurology and UK Dementia Research Institute at UCL,University College London Campus
Capítulos
- 00:00Introdcution
- 00:48Transfection of HEK293 cells
- 01:49Media Collection and Storage
- 03:02Media Concentration and Purification
- 04:58In vitro Mono-biotinylation Reaction
- 06:01Biotinylation Analysis
- 06:56Visualization of Retrograde Axonal Transport of BDNF-QD in Live Neurons
- 07:58Represetative Results
- 13:17Conclusion
एक लवी अनुक्रम (BDNFAvi) युक्त Recombinant BDNF एक लागत प्रभावी तरीके से HEK293 कोशिकाओं में उत्पादित किया जाता है और आत्मीयता क्रोमेटोग्राफी द्वारा शुद्ध है । BDNFavi तो सीधे मोनो-बायोटिनिलेटेड एंजाइम बीरा के साथ एक ट्यूब में है । व्यावसायिक रूप से उपलब्ध बीडीएनएफ की तुलना में बीडीएनफैवी और मोनो-बायोटिनेलेटेड बीडीएनफावी अपनी जैविक गतिविधि को बनाए रखते हैं।
