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Immunoprécipitation de RiboTag dans les cellules germinales de la souris mâle
JoVE Journal
Biologia do Desenvolvimento
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JoVE Journal Biologia do Desenvolvimento
RiboTag Immunoprecipitation in the Germ Cells of the Male Mouse
DOI:

10:00 min

March 04, 2020

, ,

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:56Preparation of Solutions
  • 01:57Preparation of Tissue
  • 02:49Homogenization of Sample
  • 04:03Equilibration of Beads
  • 04:59Preclearing Sample
  • 05:56Incubation of Antibody and Beads
  • 06:29Washing of Beads
  • 07:21RNA Extraction
  • 07:54Results: Negative Controls, Reagents Impact, and a Mutant Model
  • 09:09Conclusion

Summary

Tadução automática

Ici, nous décrivons l’immunoprécipitation des ribosomes et de l’ARN associé de populations choisies de cellules mâles adultes de germe de souris utilisant le système de RiboTag. La reproduction stratégique et l’immunoprécipitation soigneuse donnent des résultats propres et reproductibles qui informent sur le translatome des cellules germinales et donnent un aperçu des mécanismes des phénotypes mutants.

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