Journal
/
Genética
/
In Vitro Riktad Evolution av en begränsning Endonuclease med strängare specificitet
JoVE Journal
Genética
This content is Free Access.
JoVE Journal Genética
In Vitro Directed Evolution of a Restriction Endonuclease with More Stringent Specificity
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

In Vitro Riktad Evolution av en begränsning Endonuclease med strängare specificitet

DOI:
10.3791/60807-v

•

09:16 min

•

March 25, 2020

•

,
1International Institute of Molecular and Cell Biology, Warsaw (IIMCB)

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:49Split-and-Mix Synthesis of Mutagenic Primers
  • 02:34Performing Compartmentalized In Vitro Transcription-translation Reaction
  • 05:07Continued Processing of Libraries and Selection
  • 07:20Results: Examples of Screening of NlaIV Variants for Sequence Specificity Alteration
  • 08:16Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Begränsning endonucleases med nytt ordnar specificitet kan framkallas från enzym som känner igen ett delvist degenererat ordnar. Här tillhandahåller vi ett detaljerat protokoll som vi framgångsrikt använde för att ändra sekvenss specificitet nlaIV enzym. Viktiga ingredienser i protokollet är in vitro-uppdelning av transkriptions-/översättningsreaktionen och valet av varianter med nya sekvenssub specificiteter.

Tags

Keywords: In Vitro Directed EvolutionRestriction EndonucleaseSequence SpecificityIn Vitro CompartmentalizationDirected EvolutionSubsaturation MutagenesisOligonucleotide SynthesisOil Surfactant MixtureLibrary Preparation

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/60807?article_type=v

Utformning och användning av en låg kostnad, Automated Morbidostat för Adaptive Evolution av bakterier under antibiotikum Drug Val
check_url/pt/60807?article_type=v

Förfarande för adaptiv Laboratory Evolution av mikroorganismer med hjälp av en kemostat
check_url/pt/60807?article_type=v

Genome redigering och riktad differentiering av hPSCs för Förhöra Lineage bestämmelse i Human Pancreatic utveckling
check_url/pt/60807?article_type=v

Kvantifiering av Information kodas av genen uttryck nivåer under livslängden modulering enligt bred-range kosttillskott begränsning i C. elegans
check_url/pt/60807?article_type=v

Generation av en gen-stört Streptococcus mutans stam utan genen kloning
check_url/pt/60807?article_type=v

Testning Multicopy plasmider roll i utvecklingen av antibiotikaresistens
check_url/pt/60807?article_type=v

Genome-wide övervakning av transkription fel i eukaryota organismer
check_url/pt/60807?article_type=v

Producerar genen borttagningar i Escherichia coli av P1 transduktion med punktskattepliktiga antibiotikaresistens kassetter
check_url/pt/60807?article_type=v

Använda i Vitro och i cell form att undersöka småmolekylära inducerad Pre-mRNA strukturella förändringar
check_url/pt/60807?article_type=v

Med Sniper-Cas9 att minimera Off-target effekter av CRISPR-Cas9 utan förlust av på målet aktiviteten Via riktad Evolution

Read Article