Journal
/
Genética
/
In Vitro Gerichte Evolutie van een beperking Endonuclease met strengere specificiteit
JoVE Journal
Genética
This content is Free Access.
JoVE Journal Genética
In Vitro Directed Evolution of a Restriction Endonuclease with More Stringent Specificity
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

In Vitro Gerichte Evolutie van een beperking Endonuclease met strengere specificiteit

DOI:
10.3791/60807-v

•

09:16 min

•

March 25, 2020

•

,
1International Institute of Molecular and Cell Biology, Warsaw (IIMCB)

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:49Split-and-Mix Synthesis of Mutagenic Primers
  • 02:34Performing Compartmentalized In Vitro Transcription-translation Reaction
  • 05:07Continued Processing of Libraries and Selection
  • 07:20Results: Examples of Screening of NlaIV Variants for Sequence Specificity Alteration
  • 08:16Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

De endonucleases van de beperking met nieuwe opeenvolgingsspecificiteit kunnen van enzymen worden ontwikkeld die een gedeeltelijk gedegenereerde opeenvolging erkennen. Hier bieden we een gedetailleerd protocol dat we met succes gebruikt om de volgorde specificiteit van NlaIV enzym te veranderen. De belangrijkste ingrediënten van het protocol zijn de in vitro compartimentering van de transcriptie/vertaalreactie en selectie van varianten met nieuwe sequentiespecifiekekenmerken.

Tags

Keywords: In Vitro Directed EvolutionRestriction EndonucleaseSequence SpecificityIn Vitro CompartmentalizationDirected EvolutionSubsaturation MutagenesisOligonucleotide SynthesisOil Surfactant MixtureLibrary Preparation

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/60807?article_type=v

Ontwerp en gebruik van een Low Cost, Automatiseren Morbidostat voor Adaptive evolutie van bacteriën onder antibioticum selectie
check_url/pt/60807?article_type=v

Procedure voor Adaptive Laboratorium Evolutie van micro-organismen met behulp van een Chemostat
check_url/pt/60807?article_type=v

Genoom bewerken en Directed Differentiatie van hPSCs voor ondervragen Lineage Determinanten in Human eilandjes Development
check_url/pt/60807?article_type=v

Kwantificering van informatie gecodeerd door Gene Expression niveaus tijdens levensduur modulatie onder breed-scala dieet beperking in C. elegans
check_url/pt/60807?article_type=v

Generatie van een gen-verstoord Streptococcus mutans stam zonder Gene klonen
check_url/pt/60807?article_type=v

De rol van zelfkopiërende plasmiden testen in de ontwikkeling van resistentie tegen antibiotica
check_url/pt/60807?article_type=v

Genoom-brede Surveillance van transcriptie fouten in eukaryote organismen
check_url/pt/60807?article_type=v

Productie van Gene verwijderingen in Escherichia coli door P1 transductie met accijnsplichtige antibioticaresistentie Cassettes
check_url/pt/60807?article_type=v

Met behulp van In Vitro en In cel vorm te onderzoeken klein molecuul veroorzaakte structurele veranderingen van de Pre-mRNA
check_url/pt/60807?article_type=v

Met behulp van Sniper-Cas9 te minimaliseren Off-target effecten van CRISPR-Cas9 zonder verlies van On-target activiteit Via gerichte evolutie

Read Article