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Producción, cristalización y determinación de la estructura del dominio vinculante iKK de NEMO
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Capítulos
- 00:04Título
- 01:12Large Scale Expression of Histidine-6 (His6)-Tagged Nuclear Factor-kappa-B Essential Modulator Crystallography Construct (NEMO-EEAA)
- 02:33His6-Tagged NEMO-EEAA Purification
- 04:42His6 Tag Cleavage and Purification
- 07:09Sparse Matrix Screening
- 08:23Seed Stock Generation
- 09:00Crystal Looping
- 09:43X-Ray Data Processing and Structure Solution
- 10:38Results: Representative Production, Crystallization, and Structure Determination of the IKK-Binding Domain of NEMO
- 12:28Conclusion
Describimos los protocolos para la determinación de la estructura del dominio de unión IKK de NEMO por cristalografía de rayos X. Los métodos incluyen la expresión de proteínas, purificación y caracterización, así como estrategias para la optimización exitosa del cristal y la determinación de la estructura de la proteína en su forma no unida.
