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肝癌における相撲プロテオームの濃縮、単離、同定、特性評価のためのツールとしての相撲結合エンティティ(SES)

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

SUMO-Binding Entities (SUBEs) as Tools for the Enrichment, Isolation, Identification, and Characterization of the SUMO Proteome in Liver Cancer

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肝癌における相撲プロテオームの濃縮、単離、同定、特性評価のためのツールとしての相撲結合エンティティ(SES)

DOI:

10.3791/60098-v

•

08:29 min

•

November 01, 2019

•

Fernando Lopitz-Otsoa, Teresa C Delgado, Sofía Lachiondo-Ortega, Mikel Azkargorta, Felix Elortza, Manuel S Rodríguez, María Luz Martínez-Chantar

¹Liver Disease and Liver Metabolism Lab,CIC bioGUNE, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Hepáticas y Digestivas (CIBERehd), ²Proteomics Platforms,CIC bioGUNE, ProteoRED-ISCIII, CIBERehd, ³Advanced Technology Institute in Life Sciences (ITAV)-CNRS-IPBS,UbiCARE

Capítulos

00:04Título
01:58Cell Preparation and Lysis
03:27Tissue Preparation and Lysis
03:54Binding of GST-SUBEs or GST Control to Glutathione-Agarose Beads
04:52GST Pull Down Assay
05:59Identification and Characterization of SUMO Targets
06:36Results: Western Blot and Mass Spectrometry Analysis
07:33Conclusion

Summary

Tadução automática

ここでは、SUMO結合系エンティティ(SES)を用いて肝細胞癌のマウスモデルから得られたヒト肝腫細胞および肝腫瘍の両方から、生体内で相撲によって修飾されたタンパク質を濃縮、単離、同定、および特徴付けるプロトコルを提示する。

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Keywords: SUMO-binding Entities SUBEs SUMO Proteome Liver Cancer SUMOylation Protein Isolation Protein Characterization Protease Tandem Repeats SIMs Therapeutic Approach Human Hepatoma Cells Cell Lysis Trypsinization

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