Journal
/
/
Uttryck, rening, kristallisering, och enzym analyser av Fumarylacetoacetat Hydrolase Domain-innehållande proteiner
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Expression, Purification, Crystallization, and Enzyme Assays of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-Containing Proteins
DOI:

10:21 min

June 20, 2019

, , , , , , , ,

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:12Expression of FAHD Proteins in Competent E. coli
  • 03:44Lysis of Bacterial Pellets and Filtration of Debris
  • 04:33Purification of His-tagged FAHD Proteins using Ni-NTA Affinity Chromatography
  • 05:59Purification of FAHD Proteins via Ion Exchange Chromatography
  • 06:35Basic FAHD Activity Assays with Substrates Oxaloacetate and Acetylpyruvate
  • 07:53Results: Expression and Purification of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-containing Proteins
  • 09:19Conclusion

Summary

Tadução automática

Uttryck och rening av fumarylacetoacetat hydrolas domän-innehåll ande proteiner beskrivs med exempel (uttryck i E. coli, FPLC). Renade proteiner används för kristallisation och anti kropp produktion och användas för enzym analyser. Utvalda Foto metriska analyser presenteras för att Visa multifunktionaliteten hos FAHD1 som oxaloacetat dekarboxylas och acylpyruvate hydrolase.

Vídeos Relacionados

Read Article