Journal
/
/
Выражение, очищение, кристаллизация и ферментные анализы Fumarylacetoacetate Hydrolase Домен-содержащих белков
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Expression, Purification, Crystallization, and Enzyme Assays of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-Containing Proteins
DOI:

10:21 min

June 20, 2019

, , , , , , , ,

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:12Expression of FAHD Proteins in Competent E. coli
  • 03:44Lysis of Bacterial Pellets and Filtration of Debris
  • 04:33Purification of His-tagged FAHD Proteins using Ni-NTA Affinity Chromatography
  • 05:59Purification of FAHD Proteins via Ion Exchange Chromatography
  • 06:35Basic FAHD Activity Assays with Substrates Oxaloacetate and Acetylpyruvate
  • 07:53Results: Expression and Purification of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-containing Proteins
  • 09:19Conclusion

Summary

Tadução automática

Выражение и очищение фумарилацетата гидролазы доменных белков описывается на примерах (выражение в E. coli,FPLC). Очищенные белки используются для кристаллизации и производства антител и используются для ферментных анализов. Избранные фотометрические анализы представлены для отображения многофункциональности FAHD1 как оксалоацетат декарбоксилаза и ацилпируватгидроза.

Vídeos Relacionados

Read Article